低频脉冲电针对慢性根性痛大鼠背根神经节p物质的影响

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1、低频脉冲电针对慢性根性痛大鼠背根神经节P物质的影响：屠文展，蒋松鹤，楼新法，张瑞峰，刘芬，庞玲霞，李莎莎【摘要】目的:探讨局部及肢体远端不同穴位低频脉冲电针对慢性根性痛大鼠背根神经节P物质（sP）的影响。方法:复制慢性根性痛大鼠模型。将25只雄性ethods:Themodelofratalenessalcontrolgroup，modelgroup，localacupointsneedlinggroup（chooseGB34Yanglingquanateachside），distantacupointsneedlinggroup（chooseEX-B2Jiajiat

2、eachsideofL4）；distantandlocalcoordinationofacupointsneedlinggroup（chooseGB34tYanglingquanateachsideandEX-B2JiajiateachsideofL4）.ThechangesoftheexpressionofsubstancePinthedorsalrootganglionmunochemistry.Results:paredodelgroup，theexpressionofsubstancePinthedorsalrootganglioninthenormalco

3、ntrolgroupandelectroacupuncturegroupsongtheelectroacupuncturegroups，theexpressionofsubstancePindistantandlocalcoordinationofacupointsneedlinggroupeextent.paredmunochemistry；ganglia低频脉冲电针是将物理医学与中医针灸学相结合治疗慢性腰腿痛的有效而副作用极少的一种手段。已有大量动物实验证实低频脉冲电针是通过调节神经递质的表达和释放而起到镇痛作用。P物质(substanceP，sP)，是其中较为

4、重要的一种[1，2]。但电针对于其中较为复杂的慢性根性痛模型（类似于人体的腰椎间盘突出症）的神经递质表达影响少见报道，尤其是局部取穴法和远道取穴法电针镇痛效果孰优及其结合应用价值的实验数据鲜见报道。本研究通过不同规律配穴[3]的电针干预慢性根性痛大鼠模型，观察根性压迫的局部及肢体远端等不同部位穴位电刺激所引起的背根神经节内sP表达是否存在差异。1材料和方法1.1动物及分组雄性公司产品），购自上海西格玛奥德里奇生物技术有限公司，SABC（兔IgG）-POD试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司产品），其他试剂均为国产化学纯。1.3动物模型复制参照文献[5]复制腰神经根压迫

5、模型。经10%水合氯醛腹腔麻醉（0.5g/kg）后，在手术显微镜下咬除L4、5棘突、右侧椎板和关节突，暴露并游离出右侧L4脊神经背根，在接近背根神经节（DRG）近侧端处用内径为1mm的硅胶管，纵行切开，套入L4脊神经背根，在硅胶管外用丝线结扎，缝合切口，动物存活4周。1.4电针方法动物术后4周，将电针组大鼠固定在特定筒架上，按要求取穴进针后，用韩氏治疗仪通电给予刺激，频率2Hz，强度以引起大鼠肢体轻度抖动为宜(≤2mA)，持续30min，每日同一时段连续电针8d。1.5标本制备及sP检测造模后35d（即电针组电针8d后）各组大鼠经10%的水合氯醛液（0.75g/kg

6、）腹腔麻醉，开胸暴露心脏，经左心室灌流固定。先用150ml生理盐水快速灌流冲洗血液，继以4%多聚甲醛400ml(用0.1mol/LPBS缓冲液配制，pH7.4)持续灌注1h左右。取患侧L3～5背根神经节后，固定2h（4℃），放入含20%蔗糖的PB溶液中过夜至组织块沉底，冰冻切片，片厚10μm，间隔取片，贴片后切片置-80℃冰箱内保存，免疫组化法检测sP。SP免疫组化染色按照说明书操作。1.6图像分析及统计学处理方法利用Image-ProPlus5.1图文分析系统对结果进行计算机图像分析处理，每个样本取5个视野，测定累积光密度IOD值,将这五个数值取均数代表此例动物该

7、侧背根神经节IOD值，作为sP的相对含量。用SPSS13.0统计软件进行统计。各检测指标的组间数据用单因素方差分析和LSD检验。3讨论3.1关于动物模型本实验所制备的慢性根性痛大鼠模型稳定，L4神经根压迫部位HE染色的慢性炎症表现及行为学步态情况[6]，与临床腰椎间盘突出压迫神经根患者的病理和临床症状相似。3.2sP与痛觉传递背根神经节细胞分三种类型：大细胞（>50μm）、中细胞（25～50μm）、小细胞(<25μm)。其中大型神经元主要发出粗的有髓纤维(Aa/Aβ)，在传递非伤害性感受和抑制伤害感受中起着重要作用；中、小型神经元主要发出细髓的Aδ纤