杜仲不同提取部位对肾阳虚小鼠抗氧化和抗抑郁作用的影响

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1、杜仲不同提取部位对肾阳虚小鼠抗氧化和抗抑郁作用的影响:吕圭源陈素红苏洁颜美秋范景张益勋方哲张伟【摘要】目的]观察杜仲三个部位对肾阳虚小鼠的抗氧化和抗抑郁作用,为认识杜仲“甘温,入肝、肾经”药性的现代科学内涵提供药效学基础。[方法]ICR雄性小鼠,随机分为正常对照组,模型对照组,桂附地黄丸组,杜仲水部位组、正丁醇部位组、乙酸乙酯部位组。采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成小鼠肾阳虚模型。对小鼠抗氧化指标(SOD、GSHPx、CAT活性及MDA含量)、抗抑郁指标(悬尾、MAO活性)、疲劳指标等进行测定。[结果]抗氧化指标:杜仲三个部位都能降低MDA含量、提高SO

2、D活性,杜仲水部位和正丁醇部位能提高CAT活性,杜仲水部位和乙酸乙酯部位能提高GSHPx活性。抗抑郁指标:杜仲乙酸乙酯部位能提高小鼠悬尾活动时间,杜仲三个部位均能抑制MAO活性。杜仲三个部位都能提高小鼠奔跑时间和距离。[结论]杜仲可改善肾阳虚衰引起的衰老和抑郁,其抗氧化和抗抑郁作用可认为是其“甘,温,归肝、肾经”主要药效群的组成部分。杜仲水部位和正丁醇部位的药效较类似,可能是其主要的药效群物质基础。【关键词】杜仲;肾阳虚;甘温;肝经;肾经  杜仲味甘,性温,归肝肾经,功能补肝肾、强筋骨、安胎[1]。我们前期药理研究发现,杜仲可通过提高肾阳虚小鼠抓力、

3、肛温、游泳时间、自主活动、睾丸和精囊腺指数,降低血清肌酐、尿素,改善血液学指标,从而改善肾阳虚证之腰膝酸软、性欲减退、畏寒肢冷、精神萎靡、阳虚水泛,以及肾精亏虚、肝气虚弱所致的血液亏虚[2]。《神农本草经》曰杜仲“主腰脊痛,补中益精气,坚筋骨,强志……久服轻身耐老”。因其能为“强志”和“轻身耐老”,故观察其在抗氧化和抗抑郁方面的作用,并进一步探讨其性、味、归经在功能方面的现代科学内涵。  1材料和仪器  1.1药物盐杜仲,批号080110,购自浙江中医药大学中药饮片厂,经鉴定为杜仲科植部位杜仲EumiaulmoidesOliv.树皮的炮制品。取药材用1

4、0倍体积95%乙醇2次,分别制成乙酸乙酯部位、正丁醇部位,再用10倍体积水提取2次制成水部位。水、正丁醇、乙酸乙酯部位分别加吐温-80稀释至0.125g生药/ml。  1.2试剂超氧化物歧化酶、谷胱胺肽过氧化酶、过氧化氢酶、单胺氧化酶、丙二醛试剂盒(SOD、GSHPX、CAT、MAO、MDA,南京建成生物工程研究所,批号20081009)。苯甲酸雌二醇(上海通用药业股份有限公司,批号070905)。桂附地黄丸(兰州太宝制药有限公司,批号80080542)。  1.3动物ICR小鼠,雄性,体重18~22g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,合格证号

5、:SCXK(沪)2007-0005。  1.4仪器YLS18A小鼠悬尾测试仪(山东省医学科学院设备供应维修站);YLS10A小鼠转轮式疲劳仪(山东省医学科学院设备供应维修站);酶标仪(美国BioTEK公司,Pog/ml的苯甲酸雌二醇大豆油稀释液,每日1次,连续13d,造成肾阳虚模型[2],体积为0.1ml/10g体重。各受试药组给予相应的药物0.125g生药/ml,桂附地黄丸组给予0.15g生药/ml桂附地黄丸混悬液,对照组和模型组给予0.4%吐温-80,灌胃给药,每日1次,连续30d,体积为0.1ml/10g体重。  2.2指标检测期间观察以下

6、指标:抗氧化指标:SOD活性、GSHPX活性、CAT活性、MDA含量的测定:方法参照试剂盒说明书。抗抑郁指标:平行测试各小鼠悬尾6min内的总活动时间和活动时间比;MAO测定:方法参照试剂盒说明书。平行测试各小鼠在转棒式疲劳仪(参数:20转/min、电击电流量为0.25mA、电击持续时间为2.5s)上的奔跑时间及奔跑距离。  2.3统计分析数据以x±s表示,组间比较采用ttest检验。  3结果  3.1杜仲不同部位对雌二醇致肾阳虚小鼠的抗氧化作用  3.1.1对雌二醇致肾阳虚小鼠肝脏抗氧化酶SOD、GSHPX和CAT活性的影响与对照组比较,模型

7、组肝脏抗氧化酶SOD、GSHPX和CAT活性均明显降低(P<0.01);与模型组比较,杜仲水部位组能显著提高肾阳虚小鼠肝脏SOD、GSHPX和CAT的活性,正丁醇部位组能明显提高SOD和CAT的活性,而乙酸乙酯部位组能显著提高SOD和GSHPX的活性(P<0.05~0.01)。结果说明杜仲能改善肾阳虚小鼠抗氧化酶的水平,见表1。  表1对肾阳虚小鼠肝脏抗氧化酶SOD、GSHPX和CAT活性的影响(略)  与正常对照组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与模型对照组比较*P<0.05,**P<0.01  3

8、.1.2对雌二醇致肾阳虚小鼠肝脏脂质过氧化产物MDA的影响与对照组比较,模型组肝脏脂质过氧化产

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