大肠癌中hsp27和p14arf的表达及意义

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1、大肠癌中hsp27和p14ARF的表达及意义：左国进朱润庆刘卫容夏东【摘要】　　目的：研究hsp27和p14ARF在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法：利用SP法检测48例大肠癌和10例大肠腺瘤以及15正常大肠黏膜组织中hsp27和p14ARF的蛋白表达。结果：①大肠癌组织中hsp27和p14ARF表达阳性率分别为79.2%、58.4%，大肠腺瘤组织中分别为40%、70%，正常大肠粘膜组织中分别为33.3%、80%；②p14ARF在高、中分化腺癌组的表达率为64.1%，显著高于低分化组22.2%（P<0.05)；③两者在大肠

2、癌组织中的表达无明显相关性。结论：hsp27和p14ARF可能与大肠癌的发生有关,同时，p14ARF的表达与大肠癌的临床病理分级有关，其低表达可能参与了大肠癌的去分化过程。【关键词】大肠癌；hsp27；p14ARF；免疫组织化学　　近年来的很多研究发现，肿瘤的形成、转移和预后与多因素有关。其中肿瘤细胞增殖与凋亡的失衡是肿瘤发生和发展的重要环节。研究表明hsp27和p14ARF在细胞增殖、分化及凋亡中发挥重要作用。本实验应用免疫组化SP法对大肠癌、大肠腺瘤和正常大肠黏膜组织中hsp27和p14ARF的表达进行研究,探讨它们在大肠癌发生发展中的意义及

3、其与临床病理表现的关系。　　1材料与方法　　　　1.1标本　　收集武汉大学中南医院2005～2006年手术切除的大肠癌患者组织标本48例、大肠腺瘤10例、正常黏膜15例取自大肠癌根治标本距肿块切缘5cm以上粘膜。肿瘤患者中男性27例，女性21例，年龄36～94岁，平均年龄65岁。按组织学分级:其中高分化癌10例、中分化癌29例、低分化癌9例;按Dukes分期:A期癌13例、B期癌25例、C期癌10例。标本均用10％中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，作厚4μm的连续切片。所有组织均经病理学证实。　　1.2免疫组织化学方法　　采用SP法,操作步骤

4、严格按照说明书进行。鼠抗人HSP27、p14ARF单克隆抗体及SP试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司。DAB显色,苏木素复杂。用已知阳性切片作阳性对照,用磷酸缓冲盐溶液(PBS)代替一抗作阴性对照。　　1.3免疫组化结果判断　　免疫组化HSP27和p14ARF阳性染色主要定位于细胞核和（或）细胞质内，表现为在胞核和胞质内有棕黄色颗粒，参照文献［1］方法观察hsp27和p14ARF蛋白的分布、阳性强度和阳性率。先按染色强度打分:0分为无色,1分为浅黄色,2分为棕黄色,3分为棕褐色,染色强度需与背景着色相对比;再按阳性细胞所占百分比打分:0分为阴性,

5、1分为阳性细胞≤10%,2分为11%～50%,3分为51%～75%,4分为>75%,染色强度与阳性细胞百分比的乘积≥2分为免疫反应阳性(+)。　　1.4统计学处理　　采用χ2检验和四格表的精确概率法及计数资料的相关性分析，所有数据均在SPSS11.5软件上处理。以P＜0.05为有显著性差异。　　2结果　　2.1HSP27和p14ARF在不同组织中的表达　　在48例大肠癌组织中，HSP27和p14ARF表达阳性率分别为79.2%(38/48)、58.4%(28/48)。　　在10例大肠腺瘤组织中，HSP27和p14ARF各有4、7例阳性表达，阳

6、性率分别为40%、70%。　　在15例正常肠壁组织中，HSP27和p14ARF的阳性表达与阴性对照组比较，各有5、12例阳性表达，阳性率分别为33.3%、80%，见表1。　　表1HSP27和p14ARF在不同组织中的表达（略）　　注：*大肠癌与腺瘤组、正常大肠组比较，P＜0.05。　　大肠癌组各指标的阳性表达率与大肠腺瘤、正常大肠组比较，差异具有显著性意义(P<0.05)，腺瘤组各指标的阳性表达率与正常大肠组的阳性表达率比较差异无显著性意义(P>0.05)。HSP27在各组中均有阳性表达，但在大肠癌中最高，在正常大肠组织中最低。p14A

7、RF在大肠癌、腺瘤及正常大肠组中的表达与HSP27相反，其阳性表达率在大肠癌组最低，在正常大肠组最高。　　2.2HSP27和p14ARF的表达与大肠癌临床病理因素的关系　　HSP27蛋白在癌组织学分级中的阳性表达率为:高、中分化癌为77.1%，低分化癌为88.8%，各级癌组间比较差异无显著性(P=0.341)；在大肠癌Dukes分期中的阳性表达率为:A期为76.9%,B期为80%,C期为80%,各期癌组间比较差异无显著性(P=0.865)；已伴淋巴结转移组的C期癌与无淋巴结转移组的A、B期癌比较，差异无显著性(P=0.679)。p14ARF的表达与

8、临床分期和有无淋巴结转移无明显相关性(P1=0.992；P2=0.600)，仅和病理分级有关，高、中分化腺癌组的表达率为6