hsp27、70、90在胃癌中的表达及意义

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1、HSP27、70、90在胃癌中的表达及意义尚进才曲义坤刘伟新(通讯作者)(黑龙江省佳木斯大学附属第一医院普外二科154002)【摘要】目的探讨热休克蛋白27(HSP27)、70、90及其mRNA在胃癌、癌旁组织、慢性胃炎和正常胃粘膜组织中的表达情况，及与临床、病理资料之间的关系。方法采用组织芯片技术、免疫组织化学方法检测病理诊断明确的60例胃癌组织标木及对应的距胃癌组织边缘1.5cm处的癌旁组织、距胃癌组织边缘5cm以上的正常组织以及胃炎组织中HSP27、70、90的表达差异，RT-PCR法对1

2、0例患者的胃癌组织及对应的癌旁组织、慢性胃炎组织和正常组织的HSP27、70、90mRNA的表达情况进行检测，结合临床病理资料进行统计分析。结果HSP27、70、90的表达：在60例胃癌组织中的阳性表达率为73.3%、75%、71.7%，明显高于癌旁组织(p<0.01)、胃炎组织(p<0.01)和正常组织(p<0.01);在mRNA水平，胃癌组织的HSP27、70、90表达也明显高于其余3组(P<0.001)。HSP27、70、90的表达与病人年龄、性别、肿瘤组织类型和浸

3、润胃壁深度无明显相关性(P>；0.05)；与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性(P<0.05)o结论胃癌中HSP27、70、90的表达水平明显高于癌旁组织、胃炎组织和正常组织，提示与胃癌发生、发展密切相关；而且与病人年龄、性别、肿瘤组织类型和浸润胃壁深度无明显相关性；与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性；HSP27、70、90之间具有相关性。【关键词】胃癌HSP277090免疫组化组织芯片RT-PCR热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)是细胞受

4、到刺激后产生的蛋白质，它高度保守。实验证实HSP在某些肿瘤组织中的表达与在正常组织中的表达不同[1,2],如在卵巢癌中的表达与其临床病理分期和术后牛.存有关[3],证实其是存在于肿瘤与正常组织间的一种差异蛋白[4]。木实验采用组织芯片技术、免疫组织化学方法及RT-PCR法研宄HSP27、70、90在胃癌、癌旁组织、胃炎组织和正常组织中的表达，探讨其在胃癌中的表达及与临床病理学特征的关系，为胃癌的发展和预后提供理论依据。1材料与方法1.1标本来源组织芯片标本为佳木斯大学附属第一医院手术切除、经病理

5、诊断证实为胃腺癌组织、距胃癌组织边缘1.5cm处的组织、距胃癌组织边缘5cm以上的正常胃粘膜组织及胃炎组织标本60例，用组织芯片制作仪细针打孔,制作组织芯片。在术前这些患者均未接受任何抗癌治疗，男性43例，女性17例。本组患者的平均年龄是60±12岁（中位年龄是60.5岁，33-81岁）。RT-PCR组织标本也来自该院病理科提供的10例胃癌患者，及对应的癌旁组织、胃炎组织和正常胃粘膜组织。根据Lauen分类法（1965年）将肿瘤分类：60例中，肠型20例，弥漫型40例。按照肿瘤的分

6、化分三类：高分化4例，中分化10例，低分化46例。根据国际抗癌联盟（UICC）1987年公布的胃癌TNM分期法将肿瘤分期：I期11例，II期19例，III期20例，IV期10例。17例阳性患者淋巴结阴性，43例阳性患者淋巴结阳性（N1,27例；N2,16例）。在检查的60例中有3例远处转移。所冇标本经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，4um厚切片。1.2方法1.2.1制作组织芯片HE染色切片，行病理诊断，标记病变组织范围。新鲜肿瘤组织经石蜡处理后，按照实验0的设计组织芯片阵列的组织类型和排列方式

7、；在组织数据库中选择合适的组织病例编号；按照组织病例编号从组织库中取出组织蜡块和对应的HE染色切片；用组织包埋机制备合适的空白受体蜡块;用组织阵列仪按照阵列设计抽提病理蜡块组织芯并有规律地排列在空白受体蜡块上；将组织阵列块置于52°C的恒温烤箱中进行加热融合，使组织芯与受体蜡块紧密相连；用直後1mm的打孔针，在全自动组织切片机上以20μm/min的进刀速度对组织阵列块进行蜡块修整，直至80%的组织芯完全暴露。在全自动组织切片机上以4μm/min的进刀速度对组织阵列块进行切片；将切片裱

8、附于防脱片处理的载玻片上；将阵列切片置于60°C恒温烤箱中加热16h:按编号,每隔10张组织芯片抽取一张进行HE染色；对抽检组织芯片中的每一个组织样本进行复诊质检；组织芯片实验白片保存于切片盒中，置于5°C冰箱保存；对使用过的病理组织蜡块进行封腊，并将其和对应的HE染色切片归位放问蜡块彬和切片盒中。1.2.2免疫组织化学炎色ElivisionTMplus试剂盒将多个抗鼠和抗兔IgG分子与辣根过氧化物酶聚合，所形成的聚合物直接与一抗结合，从而放人了抗原抗体结合的信号。其染色步骤如下：（1）芯片脱蜡