复方中药五灵胶囊对小鼠免疫功能的影响

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1、复方中药五灵胶囊对小鼠免疫功能的影响摘要:目的观察五灵胶囊对小鼠免疫功能的影响.方法小鼠免疫器官质量法观察五灵胶囊对免疫器官质量的影响;溶血素测定法观察体液免疫功能;E花结与脾抗体生成细胞试验观察细胞免疫功能;以LPS+BCG诱导小鼠免疫性肝损伤观察五灵胶囊对一氧化氮（NO）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）的影响;戊巴比妥钠诱导小鼠P450观察五灵胶囊对小鼠P450含量和睡眠时间的影响.结果五灵胶囊能使免疫小鼠E花结数、脾脏指数、胸腺指数和QHS增加，促进体内IgG与IgM释放，血清HCIgG与HCIgm水平上升.对免疫性肝损伤小鼠微粒体内NO五灵胶囊大剂量有促进作用，

2、小剂量有抑制作用，对IL-2与IL-6影响不显著.戊巴比妥钠能诱导小鼠的P450含量增加，五灵胶囊并不影响P450含量，但却抑制P450对戊巴比妥钠的代谢，使睡眠时间延长.此外，五灵胶囊还能降低戊巴比妥钠诱导升高的谷胱苷肽S转移酶（GSH-ST）.结论五灵胶囊是一种免疫增强剂，对体液免疫与细胞免疫均有促进作用，不诱导P450产生，但能抑制P450对戊巴比妥钠的代谢，对LPS诱导的细胞因子，五灵胶囊作用不显著，对微粒体内NO呈双向作用.　　Keymunity;hemolysins;liver/in-juries　　Abstract:AIMToinvestigatetheeffectofETH

3、ODSTheinfluenceof.Thebigdosageof的测定取［1.2.1］实验组小鼠血清各10μL，1份不作处理，1份加等量2-巯基乙醇，置37℃水中温浴30min，两份血清各加Gsy’s缓冲液至4mL.取2-巯基乙醇处理的血清稀释液0.5mL，加50g・L-1SRBC0.5mL，充分混匀，再加羊抗小鼠IgG和补体各0.5mL;空白管以0.5mLGsy’s缓冲液代替血清同法操作;取未处理血清稀释液0.5mL，依次加入SRBC、补体、Gsy’S缓冲液各0.5mL同法操作;3样品置37℃水中温浴1h，450g离心10min，取上清液在A540nm处测定A值.按文献［4

4、］计算含量HcIgG=2-巯基乙醇处理血清的A值×稀释倍数，HcIgM=未处理血清的A值×稀释倍数.　　1.2.4IL-2与IL-6的测定BALB/c雄性小鼠50只，体质量（20±2）g，按体质量随机分成5组，正常组、模型组、环磷酰胺组和五灵胶囊1，0.5g・kg-1组;小鼠置室温（22±3）℃、湿度45%～65%的实验室适应环境3d后试验，试验日正常组小鼠尾iv生理盐水0.1mL，余组小鼠尾ivBCG0.1mL，BCG注射6d后正常组小鼠尾iv生理盐水0.1mL，试验组小鼠尾ivLPS90μg，次日正常组小鼠腋窝SC生理盐水0.1mL，试验组小鼠注射完全佐剂0.1mL，同时

5、正常组和模型组ig生理盐水10mL・kg-1，环磷酰胺组ip环磷酰胺30mg・kg-1，五灵胶囊组分别ig五灵胶囊1.0g・kg-1和0.5g・kg-1.给药6d，正常组ip生理盐水0.1mL，试验组ipLPS100μg，继续给药至12d，末次给药后，正常组小鼠尾iv生理盐水0.1mL，试验组小鼠尾ivLPS120μg，禁食给水，12h后活杀取肝组织用冰冷生理盐水冲洗，加TMS缓冲液置冰浴中匀化制得20g・L-1肝匀浆，按文献［5］制备微粒体，4℃12216g离心30min，取上清3mL，加88mmol・L

6、-1氯化钙0.3mL，充分摇匀，4℃静置15min，12216g离心40min，弃上清，沉淀加0.3mol・L-1磷酸缓冲液1mL碾匀作为微粒体供试品液.取供试品液0.5mL按硝酸还原酶法测定NO含量.在无菌状态下取小鼠脾脏碾磨，用1640完全培养液制成1×109・L-1的悬液，加入24孔培养板，每孔1mL，再加ConA使其终浓度为5mg・L-1，置37℃50.0mL・L-1CO2孵箱中培养48，72h，按文献［6］分别检测IL-2，IL-6的含量.　　1.2.5睡眠时间与P450的测定BALB/c雄性小鼠40只，体质量（20±2）g

7、，按体质量随机分为4组，正常组、对照组和五灵胶囊1，2g・kg-1组;小鼠置室温（22±3）℃、湿度45%～65%的实验室适应环境3d后试验，试验日先分别ig五灵胶囊1，2g・kg-1，给药2h后，正常组ip生理盐水10mL・kg-1，其余3组ip50mL・L-1戊巴比妥钠溶液10mL・kg-1，并观察记录小鼠的睡眠时间.连续重复试验3次，3d后小鼠禁