dna倍体分析联合腹水-血清cea比值测定对腹水性质鉴别诊断价值

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1、DNA倍体分析联合腹水/血清CEA比值测定对腹水性质鉴别诊断价值【摘要】目的探讨应用流式细胞仪(FCM)进行腹水细胞DNA倍体分析，以及联合检测腹水/血清癌胚抗原（CEA）比值对良、恶性腹水的鉴别诊断价值。方法应用流式细胞术对106例腹水病人（良性腹水50例，恶性腹水56例）进行腹水细胞DNA倍体分析，以腹水细胞中发现异倍体为阳性；同时采用ELISA法进行腹水及血清CEA测定，以血清或腹水CEA浓度>5μg/L、腹水/血清CEA比值>1为阳性。结果恶性腹水组病人的腹水/血清CEA比值阳性率及腹水中检出异倍体的阳性率均明显高于良性腹水组。腹水/血清CEA

2、比值阳性和腹水中检出异倍体诊断恶性腹水的灵敏度和特异度分别为51.79%、98.00%和71.43%、86.00%。腹水中检出异倍体与腹水/血清CEA比值阳性联合诊断恶性腹水的灵敏度和特异度分别为92.86%和100%。结论DNA倍体分析、腹水/血清CEA比值检测对于鉴别良、恶性腹水是有价值的生物学指标，二者联合可以提高鉴别诊断良、恶性腹水的灵敏度和特异度，提高诊断效能。【关键词】腹水癌胚抗原DNA倍体分析诊断鉴别　　［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigatethedifferentialdiagnosticsignificanceofDNA

3、ploidyanalysisandascites/serumcarcinoembryonicantigenratioassayinmalignantandbenignascites.MethodsFloetry(FCM)elinkedimmunosorbentassay(ELISA).CEAvalue>5μg/Landascites/serumCEAratio>1CEA,asciticCEA,ascites/serumCEAratioandaneuploidyinmalignancyCEAratioindiagnosisofmalignantascit

4、esCEAedthevalueofascites/serumCEAratiosassayandDNAploidyanalysisindifferentialdiagnosisofmalignantascites,andthebinationofascites/serumCEAratiosassayandtheDNAploidyanalysiscouldincreasesensitivityandspecificityofdifferentialdiagnosisofmalignantascitesfrombenignascites.［KEYANCOULTER公司提

5、供。全自动酶标分析仪（伯乐680型，美国），流式细胞仪（EPICSXLMCL型，美国），低温高速离心机（ContifugeStratos型，德国）。　　1.3标本制备按腹膜腔常规穿刺方法进行腹腔穿刺，抽取腹水100mL行DNA倍体分析及ELISA法检测腹水CEA浓度；同时常规静脉穿刺取血2mL,离心分离血清，ELISA法检测血清CEA浓度。　　1.4腹水DNA倍体分析由我院中心实验室按试剂盒说明书对腹水脱落细胞进行DNA倍体分析，以正常人新鲜淋巴细胞的DNA荧光信号主峰值作为二倍体细胞DNA含量的参考值，以腹水中二倍体细胞DNA含量作为内标，由仪器自带程序对样品

6、细胞的DNA指数、增殖指数、S期细胞百分率等指标进行分析，并绘出直方图。若直方图上出现与二倍体细胞G0/1峰完全分离的荧光信号峰（DI≠1），即判断受检标本含有DNA异倍体细胞，为阳性。　　1.5血清及腹水CEA浓度测定按试剂盒说明书操作，将25μL血清或腹水标本、标准液、控制液及100μL抗体加入反应微孔中，室温下反应1h；用稀释的洗液反复冲洗6次，再加入100μL染色剂，37℃孵化30min；然后加入100μL反应终止液，在15min内于405nm波长处读出吸光度（A）值，以吸光度值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线。根据血清或腹水样品的吸光度值可在

7、标准曲线上查出其浓度，结果由全自动酶标分析仪自动产生。按照试剂盒说明书，血清和腹水的CEA阳性界值为5μg/L。若血清或腹水CEA阳性，则计算腹水/血清CEA比值，以比值>1为阳性。　　1.6统计学处理计量资料以±s表示，组间比较采用t检验；计数资料以率或构成比表示，应用χ2检验。　　2结果　　2.1腹水细胞DNA倍体分析本文56例恶性腹水病人中有40例（71.43%）检出异倍体，明显高于良性腹水病人异倍体检出率（16.00%），差异有显著性（χ2=32.75，P<0.01）。异倍体区别良性、恶性腹水的灵敏度为71.43%（40/56），特异度为84.

8、00%(4