bcl┐2及bag┐1基因产物在肾癌组织中的表达及意义

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1、Bcl┐2及Bag┐1基因产物在肾癌组织中的表达及意义摘要:目的讨论基因Bcl-2和Bag-1在肾癌组织中的表达及相互关系，了解肿瘤增殖与凋亡的特点.方法采用免疫组化SABC法对41例肾癌与10例正常肾组织的石蜡标本切片对照，进行产物表达的统计研究.结果Bcl-2在肾癌组织中阳性表达率为75.6%，与正常肾组织30.0%相比，有显著性差异（P<0.05），但其表达与不同病理细胞类型、病理分级及临床分期无关（P>0.05）.Bag-1在肾癌组织中表达率为61.0%，正常肾组织10.0%表达.Bag-1与肿瘤分级、分期及预后密切相关（P<0.05），随肾癌恶性程度增加，其表达

2、强度也增加.Bcl-2与Bag-1的表达正相关（r=0.438）.结论肾癌组织中Bag-1表达可作为预后指标;Bcl-2可能参与肾组织由良性向恶性转化的过程，但与癌细胞恶性分化程度无关.　　Keys;immuno-histochemistry;geneexpression　　Abstract:AIMToinvestigateBcl-2andBag-1expressionsinrenalcellcarcinomasandtoevaluatetheirclinicalsignifi┐cance.METHODSBcl-2andBag-1expressionsmunohistochemstrySt

3、reptavidin-Biotin-Peroxidaseplex（SABC）methodsin41samplesofrenalcarcinomatissuesandin10normalrenaltissues，andtheirclinicalsig-nificanceatissuesalrenaltissues（P<0.05）.Ac-cordingly，thepositiverateofBag-1expressioninthecarci-nomatissuesaltissues（P<0.05）.Hoorgrade，clinicalstageandpathologicalcell

4、types.Ontheotherhand，Bag-1orgrade，tumorstageandtheprognosisofthepatient（P<0.05）.Significantcorrelationightserveasaprognosticmakerfortherenalcellcarcinoma.Bcl-2mightbeinvolvedinthetrans-formationofbenigntomalignantprocessbutisnotrelatedtothedegreeofdifferentiationofthetumorcells.　　0引言　　Bcl-2与Bag

5、-1都是细胞抗凋亡基因，在肾癌的发病及肾癌细胞逃避凋亡的过程中可能具有不可忽视的重要作用.我们用免疫组化方法控制Bcl-2和Bag-1在肾癌不同病理阶段的表达水平，与正常肾组织作对照，以了解Bcl-2与Bag-1表达的意义及相互关系.　　1材料和方法　　1.1材料1989/1997手术切除的肾癌石蜡包埋组织块41例，均来自我院病理科存档标本，平均年龄58.4（46～77）岁.其中透明细胞癌26例，颗粒细胞癌15例.按分期:Ⅰ期18例，Ⅱ期12例，Ⅲ期8例，Ⅳ期2例.所有病理均获随访8mo～5a，平均5a生存率为70.7%.正常肾组织石蜡标本10例作对照.　　1.2方法兔抗人Bcl-2抗体购

6、自美国SantaCruz公司，兔抗人Bag-1抗体由加拿大Dr.H.BlissMurphy癌症中心赠送，SABC免疫试剂盒购自武汉博士德公司.石蜡组织连续切片5μm厚，常规脱蜡至水.采用SABC法测定Bcl-2与Bag-1的表达.抗Bcl-2及Bag-1的工作浓度1∶50，生物素化单抗和SABC试剂的工作浓度均为1∶100.石蜡切片经抗原修复后，滴加1∶50抗Bcl-2或抗Bag-1抗体，4℃过夜，次日滴加生物素化山羊抗兔IgG及SABC试剂，DAB显色，苏木精复染，以PBS代替一抗作阴性对照，以已知阳性反应片作阳性对照.Bcl-2染色胞质棕黄色为阳性，Bag-1胞质胞核棕黄色染色为阳性.

7、在10×40倍光镜下随机观察5个视野，计算其平均数，每个视野计数100个细胞.Bcl-2阳性标准:阳性细胞占肿瘤细胞数<30%为低表达（+），30%～50%为中度表达（），>50%为高表达（）.Bag-1染色阳性细胞<10%为低表达（+），10%～30%为中度表达（），>30%为高表达（）.　　统计学方法:阳性表达率比较用χ2检验，平均表达率比较采用t检验，Bcl-2与Bag-1关系采用相关系数（