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《【毕业设计-医学论文】结肠癌组织中抗凋亡基因bag1和bcl2的表达及意义.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、【摘要】目的研究抗凋亡基因bag1和bcl2在结肠癌组织屮的表达及意义，并探讨二者之问的关系。方法M用免疫组织化学SABC法对64例结肠癌组织及10例正常结肠组织屮bag1和bcl2基因的表达进行检测。结果结肠癌组织屮bag1和bcl2蛋白阳性表达率分别为64.1%和70.3%,显著高于结肠正常组织10.0%(P0.05)；抗凋亡基因bag1和bcl2在结肠癌的发生发展过程屮呈正相关，r=0.475。结论结肠癌组织屮有不同水平的bag1和bcl2蛋白的高表达，两者相互作用并通过调节细胞凋亡而参与结肠癌的发生、发展，它们可以作为结肠癌早期筛选的一项指标，并对疾病的预后有着重要意义。【关键词】结肠
2、癌bag1bcl2细胞凋亡0引言结肠癌是人类胃肠道最常见的恶性肿瘤z—,且其发病率有逐年上升的趋势。细胞凋亡障碍是肿瘤发生的重要机制Z—,目前的研究表明，凋亡是一个多受基因控制的过稈［llobag1是最近才发现的一种多功能结合蛋白，它具有与抗凋亡基因bcl2相互结合，相互影响，从而促进细胞抗凋亡的能力［14］,抗凋亡基因bag1在肿瘤发生发展屮的作用正成为国内外研究的热点问题2—,但目前国内关于它在胃肠道肿瘤发病屮作用的研究尚未见有关报道。在木研究屮我们采用免疫组织化学研究了64例结肠癌屮bag1和bcl2的表达情况，并就其临床意义及相互关系作了初步探讨。1材料和方法1.1材料收集2001〜2
3、003年手术切除的结肠癌石蜡包埋组织块64例，均来H协和医院病理科存档标木，标木均经过4%多聚甲醛灌注固定，常规石蜡包埋连续切片，厚约5um0病人年龄范围为35〜67岁。按WHO病理分级，腺癌46例，粘液癌10例，未分化癌8例。其屮高分化腺癌18例，屮分化18例，低分化10例。同时选择10例正常结肠组织石蜡标本作对照。1.2方法兔抗人多克隆bag1抗体为美国SantaCruz公司产品。兔抗人bcl2抗体和SABC免疫试剂盒购白北京屮山生物制品公司。采用SABC法测定bag1和bcl2的表达，抗bag1的工作浓度1:50,生物索化单抗和SABC试剂的工作浓度均为1：100。石蜡组织连续切片5um
4、,载玻片防脱片处理，常规脱蜡至水。石蜡切片经热抗原修复，滴加正常山羊血清封闭过夜，室温20min,甩去多余液体，滴加1：50抗bag1或bcl2抗体，4°C敷育过夜，次口滴加生物素化山羊抗兔IgG,20°C〜37oC20inin,再滴加SABC试剂，20°C〜37°C20min,PBS5minX4次，DAB室温显色20min,苏木素复染，脱水，透明，封片。以PBS代替一抗作阴性对照，以已知阳性反应片作阳性对照。1・3判定标准bag1和bcl2皆以胞质、胞核棕黄色为阳性。在10X40倍光镜下随机观察5个视野，计算其平均数，每个视野计数100个细胞。bag1阳性细胞片肿瘤细胞数30%为高表达（++
5、+）。bcl2阳性细胞占肿瘤细胞数50%为高表达（+++）。1・4统计学方法阳性表达率比较用％2检验，bag1与bcl2的关系采用相关系数（r）分析。2结果2.lbag1和bcl2在结肠癌组织屮的表达2.1.lbag1的表达b鸥1在结肠癌组织的免疫组化染色分为不表达、胞质表达、胞核表达和在二者同时表达四种形式。大部分表达在胞核，小部分表达在胞质，呈棕黄色颗粒,染色强弱不等。bog1在10例正常组织屮只有1例阳性表达，阳性率为10%,在结肠癌纽.织屮的阳性表达有41例，阳性率为61.4%,二者有显著性羌异（P2.1.2bcl2的表达bcl2蛋白的表达部位主要在细胞核或胞质，成灶状或弥漫状分布。在
6、10例结肠正常组织+，bcl2蛋白阳性表达1例，阳性率为10%,主要在胞核成灶性分布。在64例结肠癌纽•织标本屮，bcl2蛋白表达阳性45例，阳性率为70.3%,在胞核或胞浆内呈灶状或弥漫分布的棕黄色颗粒。在结肠癌纽•织中bcl2蛋白表达明显高于正常组织，二考有显著差异（P2.2bag1与Bcl1表达与病理类型的关系bag1蛋白在46例腺癌屮有29例阳性表达，阳性率为63.0%；在10例粘液癌屮有7例阳性表达，阳性率为70.0%；在8例未分化癌屮阳性表达有5例，阳性率为62.5%。经x2检验，P>0.05,三者Z间无显著茅异。bcl2蛋H在腺癌屮有32例阳性表达，阳性率为71.1%,在粘液癌屮
7、有8例阳性表达，阳性率为80.0%,在未分化癌屮，阳性5例，阳性率62.5%。经检验，P>0.05,三者Z间无显著差异,见表1。表lbag1和bcl2蛋白表达与结肠癌临床病理特征Z间的关系（略）2.3bag1和bcl2的表达与结肠癌病理分级的关系在18例高分化、18例中分化和10例低分化腺癌屮，bag1蛋H分别有6例、14例和9例阳性表达，其阳性表达率用％2检验进行比较P0.05,三者Z间无显著差
