蒙药冷蒿的遗传多样性随机引物多态性研究

蒙药冷蒿的遗传多样性随机引物多态性研究

ID:9466021

大小:58.00 KB

页数:9页

时间:2018-05-01

蒙药冷蒿的遗传多样性随机引物多态性研究_第1页
蒙药冷蒿的遗传多样性随机引物多态性研究_第2页
蒙药冷蒿的遗传多样性随机引物多态性研究_第3页
蒙药冷蒿的遗传多样性随机引物多态性研究_第4页
蒙药冷蒿的遗传多样性随机引物多态性研究_第5页
资源描述:

《蒙药冷蒿的遗传多样性随机引物多态性研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库

1、蒙药冷蒿的遗传多样性随机引物多态性研究摘要:目的研究内蒙古通辽地区蒙药冷蒿的遗传特异性及通辽、呼和浩特、锡林郭勒3个不同地区蒙药冷蒿的遗传多样性。方法采用随机引物多态性(RAPD)方法,从17组RAPD引物中筛选出13组条带清晰、多态性明显并且重复性好的引物用于实验,并利用Popgen32和NTSYS软件进行数据计算与聚类分析。结果①13组引物共产生的209条带中,有201条多态性带,多态位点百分率达96.17%。②3个地区蒙药冷蒿Ht=0.2381,Hs=0.1874,Dst=0.0507,地区间的Gst=0.2129。③通过UPGMA分析,呼和浩

2、特与锡林郭勒盟冷蒿聚为一类,通辽冷蒿单独聚为一类。结论①冷蒿具有较高的遗传多样性且不同地区差异明显。②冷蒿居群总的遗传多样性来自于居群内(78.71%),且居群间有基因的交流。关键词:冷蒿种群;改进CTAB;RAPD;遗传多样性  Abstract:ObjectiveTostudythegeicdiversityofAtremisiafrigidainTongliaopopulationandthreedifferentregionsofInnerMongolia(Tongliao,Hohhot,Xilingol).Methods13groupsof

3、primersorphicandreproduciblebandsthe17groupsofprimersbyrandomamplifiedpolymorphicDNA(RAPD)method.Thebandsproducedbythe13groupsofprimersersgenerated209bands,including201polymorphicbands.Thepercentageofpolymorphiclociationisiafrigidapopulationongpopulations(Dst)ongpopulations(Gst

4、)thegeicvariationongpopulations.  Keyisiafrigidpopulation;ImprovedCTAB;RAPD;Geicdiversity  蒙药冷蒿Atremisiafrigida(蒙语:阿给),又名小白蒿、菟毛蒿,菊科蒿属的小灌木,是蒙医的常用药,主要分布在内蒙古[1~3]。近年来,随着中药材标准化进一步深入,为提高中药质量和临床效果,中药材的道地性的研究越来越受到重视[4~6]。但对民族药的道地性研究甚少。长期以来,蒙药冷蒿一直在民间用于出血疾病的治疗[7]。研究发现,不同产地的蒙药冷蒿制炭后止血效果差异

5、显著,而且来自荒漠草原的蒙药冷蒿制炭后活性成分的含量偏高。目前,冷蒿药材为野生冷蒿,随着荒漠化的进程,以及药材的大量开采,将使冷蒿变成濒危物种。为了避免野生药用植物的枯竭,势必要进行药材的规范化栽培种植(GAP),对冷蒿遗传背景的分析,不但可以从遗传学角度观察引起冷蒿质量变异的原因,也可以为冷蒿栽培种植提供理论指导。  在PCR基础上建立起来的随机扩增多态性(randomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD)分子标记技术,以其技术简单易行,分析速度快,成本低,不用进行DNA克隆、southern杂交等复杂程序的优点,特别适合于遗传

6、背景不清楚的材料的研究,在中药材鉴定与遗传多样性研究中应用广泛[8~10]。本实验采用RAPD方法,考察冷蒿的遗传结构,探讨冷蒿止血活性成分变异的遗传学基础。  1材料  2007-11分别在呼和浩特、锡林郭勒盟当地收集冷蒿干药材;2008-09在内蒙古通辽市奈曼旗采集冷蒿植株,并用冰块冷冻保存。3个冷蒿群体编号见表1,群体间空间距离大于500km。  2方法  2.1基因组DNA的提取与测定基因组DNA采用改进的CTAB法[11]提取。DNA大小及其完整性采用标准浓度的λDNA/HindⅢ检测,采用SAM3000微量紫外/可见分光光度计测定A260

7、、A280及A230,据此推知各样本总DNA的含量。  2.2RAPD引物的筛选参照王静[12]以及本实验室[11]的方法,优化PCR反应体系,对单一DNA样品多引物进行RAPD-PCR扩增。在Bio-RADGelDoc2000凝胶成像系统上观察拍照。最后,筛选出可产生多态性且重复性好的引物组合。表1材料  Tongliao)E122.16500350~450沙地31株H呼和浩特N40.82(Hohhot)E111.81580335~534.6荒漠草原药材L锡林郭勒N43.95(Xilingol)E115.46790295典型草原药材  2.3数据处

8、理与统计分析构建二元数据矩阵,RAPD为显性标记,同一引物的扩增产物在电泳中迁移率相同的条带被认为是同源性的

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。