探讨不同煎煮方法对黄连阿胶汤治疗慢性咽炎的影响

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1、探讨不同煎煮方法对黄连阿胶汤治疗慢性咽炎的影响黄连阿胶汤出自张仲景的《伤寒论》，由黄连、黄芩、芍药、阿胶、鸡子黄组成，主治少阴病，得之二三日以上，心中烦，不得卧者。目前，黄连阿胶汤临床上常用于神经精神系统疾患且多伴有阴虚火旺、心肾不交之失眠，出血性疾患，热性疾患包括慢性咽炎等症。目前尚未见黄连阿胶汤治疗慢性咽炎的相关药理研究以及不同煎煮方法对其作用的影响。本文采用甲状腺片和氨水联合制造阴虚型慢性咽炎大鼠模型，研究不同煎煮方法黄连阿胶汤样品对大鼠三碘甲状腺原氨酸（triiodothyronine，T3）、甲状腺素（thyroxine，T4）、肿瘤坏死因子（tum

2、ornecrosisfactor，TNF-α）和血管内皮生长因子（tascularendothelialgron;20）g，由郑州大学医学院实验动物中心提供，合格证号：SCX（豫）2010-0002。2.药品黄连、黄芩、白芍（南京海源饮片公司，批号：L110523H、110217H、110508H）；阿胶（山东福胶集团东阿镇阿胶有限公司，批号：1009074）；鸡子黄（郑州市政四街思达超市，批号：S20120215）；甲状腺片（上海实业联合集团长城药业有限公司，批号：20110303）；清咽片（佛山德众药业有限公司，批号：12005)；乌拉坦（北京

3、化工厂，批号：20010328）；大鼠VEGF、TNF-α、T3、T4ELISA检测试剂盒（RB有限公司，批号分别为20120302A、20120302A、20120302A、20120302A）。3.仪器BS210S型万分之一电子天平（北京SARTORIUS有限公司，max210g，d0.1mg）；DHL-A（3+1）型北京东华原十功能煎药机（北京东华原医疗设备有限公司）；BMG型多功能酶标仪（德国）；LBY-N6K自清洗快测血流变仪（北京普利生仪器有限公司）。方法1.试药的制备传统煎煮黄连阿胶汤制备：取处方量黄连12g，黄芩6g，白芍6g，加水

4、15倍量，浸泡30min后，文火煎煮30min，二煎加水13倍量，煎煮20min，分别过滤，合并2次水煎液，浓缩至每毫升含生药0.5g，在不低于60℃的温度条件向合煎液中加入阿胶粗粉9g搅拌烊化；待温度降至50℃以下，加入鸡子黄2枚，搅拌即得。机械常压煎煮黄连阿胶汤的制备：取5倍处方量黄连60g、黄芩30g、白芍30g，加水18倍量，浸泡30min后，文火煎煮40min，二煎加水16倍量，煎煮40min，分别过滤，合并2次水煎液，量取体积得1870mL，取出374mL浓缩至每毫升含生药0.5g，在不低于60℃的温度条件向合煎液中加入阿胶粗粉9g烊化；待温度降至

5、50℃以下，加入鸡子黄2枚，搅拌即得。机械高压煎煮黄连阿胶汤的制备：取5倍处方量黄连60g，黄芩30g，白芍30g，加水12倍量，浸泡30min后，文火煎煮30min，二煎加水10倍量，煎煮30min，分别过滤，合并2次水煎液，量取体积得2000mL，取出400mL浓缩至每毫升含生药0.5g，在不低于60℃的温度条件向合煎液中加入阿胶粗粉9g搅拌烊化5min；待温度降至50℃以下，加入鸡子黄2枚，搅拌即得。阳性组样品的制备：取4片清咽片溶解于50mL蒸馏水中混匀即得。2.动物分组适应性饲养3d后，随即分为6组（每组8只），分别为：空白对照组、模型组、阳性对照清

6、咽片组、黄连阿胶汤传统煎煮组、黄连阿胶汤机械常压组、黄连阿胶汤机械高压组（以下简称空白组、模型组、阳性组、传统煎煮组、机械常压组、机械高压组）。实验室温度20-26℃，相对湿度40%-60%。大鼠自由饮食饮水3.给药情况大鼠适应性饲养3d，从第4天起，除空白组外，其他组大鼠灌胃甲状腺片溶液（1.25mg/100g体质量），空白组大鼠灌等量0.9%氯化钠溶液连续14d，同时将浓度为2.5%的氨水装入达芬霖喉露喷雾器内，给需造模的大鼠喷咽，每天1次，每次喷3掀，连续喷15d。空白组动物用0.9%氯化钠溶液喷咽，操作方法与造模组相同。每天观察动物咽部的黏膜形态、色泽

7、及分泌物情况等。第20天进行灌胃给药，各组动物药物灌胃剂量如下：空白组给予0.9%氯化钠溶液；阳性组给予清咽片混悬液0.3g/kg；传统煎煮组给予传统煎煮混悬液3g/kg；机械常压组给予机械常压混悬液3g/kg；机械高压组给予机械高压混悬液3g/kg，给药体积均为1mL/100g，给药时间1周。4.实验方法连续灌胃7d后，用20%乌拉坦0.5mL/100g麻醉各组大鼠，自腹主动脉取血，其中4mL以6000r/min离心10min，收集血清。采用酶联免疫双抗体法进行测定，具体步骤按试剂盒说明书进行。用酶标仪在450nm波长下测定各孔吸光度值（Ａ值），绘制标准曲线

8、，依据标准曲线计算出各待测样本中TNF