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《围生期孕妇b族链球菌感染和耐药性检测对妊娠的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、围生期孕妇B族链球菌感染和耐药性检测对妊娠的影响 B族链球菌(groupBStreptococcus,GBS)也叫无乳链球菌［1］,是一种兼性厌氧革兰阳性链球菌,属于条件致病菌,常寄居阴道及胃肠道,也可寄居于婴幼儿上呼吸道,临床常通过细菌培养、GBS核酸检测等进行GBS筛检。据相关研究报道［2］,正常孕妇阴道中GBS的检出率为6.5%~36.0%,孕妇围产期感染GBS是引发胎膜早破、新生儿败血症、新生儿宫腔感染、脑膜炎、肺炎等疾病的重要因素之一,有研究证实,对GBS阳性孕妇采取抗生素治疗,对有效降低新生儿感染率、发
2、病率均具有重要意义。本文分析研究围生期孕妇B族链球菌(GBS)感染和耐药性检测对妊娠结局的影响。总结报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料 选取2013年2月~2014年2月本院妇产科接诊的410例产期孕妇,年龄22~37岁,平均年龄(28.2±1.6)岁,孕期35~37周,所有产妇均知悉本组研究目的,自愿参与本实验并签署知情同意书。 1.2方法 1.2.1仪器及试剂 ①GBS培养鉴定：采用Todd-He处轻轻旋转,采集直肠分泌物,每位孕妇均采集两份标本,一份(阴道拭子+肛拭子)用于实时荧
3、光PCR检测,一份用于细菌培养。 1.2.3GBS的分离培养及鉴定标本尽快送至实验室,将拭子置于3mg/mlTodd-Hel+庆大霉素8Hg/ml),在35℃环境中增菌培养18~24h,然后分别接种于小牛血清和羊血脂平板培养基,在35℃CO2浓度5%的环境中培养24~36h,选择有β溶血环的菌落,通过革兰染色镜检查阳性,触酶试验阴性,将菌落接种于rapidID32STAEP鉴定板条,在37℃中培养4h,读取结果,采用VITEK-2进行B群链球菌细菌药敏MIC实验。 1.2.4定量PCR检测 提取阴道分泌
4、物核酸DNA,将阴道拭子浸于1mlTris-HCl溶液中,加入溶菌酶至浓度至100μg/ml,在37℃环境下震荡3min,加入蛋白酶K至200μg/ml,在56℃条件下反应3h,然后以10000r/min离心5min,取200μl上清液提取DNA,具体步骤按照DNA提取试剂盒说明书操作。 GBS的PCR检测按照GBS核酸检测试剂盒说明进行操作。 GBS核酸荧光定量PCR检测按照GBS核酸荧光定量PCR试剂盒说明书进行操作。 1.2.5扩增测序 送上海生工生物工程股份有限公司测试分析。 1.3
5、观察指标 ①实时PCR法与培养法检测GBS感染结果的对比；②GBS药敏试验结果；③围生期孕妇GBS感染阳性者与阴性者的妊娠结局。 1.4统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件进行统计分析。 计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。 P<0.05表示差异具有统计学意义。 2结果 2.1实时PCR法与培养法检测GBS感染结果的对比本组410例孕妇中,经培养法检测阳性者23例,阳性率为5.5%(23/410),实时PCR法检测阳性者41例,阳性率为10.0%(41/410),两种检测方法的阳性检出
6、率比较差异具有统计学意义(χ2=5.491,P<0.05)；以分离培养法为标准,实时荧光PCR法检测围产期孕妇GBS感染的敏感性为100%(23/23),特异性为95.6%。 2.2培养法分离出GBS的耐药性检测结果 培养法共检出23例GBS阳性者,对其进行进行药物敏感MIC实验,敏感度见表1。 2.3PCR法检测GBS感染阳性者与阴性者妊娠结局的对比 GBS阳性组与阴性组在早产发生率方面差异无统计学意义(P>0.05),GBS阳性组胎膜早破、宫内感染的发生率明显高于阴性组,差异有统计学意义(
7、P<0.05),见表2。【1】 3讨论 GBS是一种常寄居阴道及胃肠道的兼性厌氧革兰阳性链球菌,多项研究表明［4,5］,围生期GBS感染会导致妊娠不良结局,据相关研究报道［6］,我国妊娠妇女GBS带菌率为3.5%~32.4%,研究GBS的检测方法、耐药性均对指导临床治疗具有重要意义。本组研究以410例产期孕妇作为研究对象,于孕35~37周时取孕妇阴道下1/3分泌物及肛周分泌物拭子,采用实时定量PCR和培养法法进行GBS检测,对培养分离出的GBS进行药敏试验,结果显示,实时PCR检测、培养法检测围产期GB
8、S感染阳性率分别为10.0%和5.5%,均在上述研究报告的范围内,但二者差异显着,实时PCR检测的阳性率明显高于培养法。除此之外,培养法检测会受到标本采集、运送、培养条件等因素的影响,因而检出率会存在一定的变化；而实时PCR检测可有效规避上述因素,且检测时间仅为4h,本组研究中实时PCR检测的敏感性为100%(23/23),特异性为95.6%。
