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1、企业跨国并购领域文献的可视化研究--基于WOS数据库的分析8892//.paper.edu-<1-中国科技论文在线NtWRKY对植物病毒侵染的响应及amiRNA技术在植物抗病毒方面的应用#刘晶晶<1，程春玲<1，席玉珍2，魏书<1**基金项目：高等学校博士学科点专项科研基金（20<1234<18<1<10002）作者简介：刘晶晶（<1989-），女，研究方向：茶叶生物化学通信联系人：魏书（<1960-），男，教授，植物次生代谢（<1.安徽农业大学，茶叶生物化学与生物技术重点实验室，合肥230036；52.合一环保科技有限公司，日照276800
2、）摘要：植物病毒对烟草等经济作物造成的损失巨大，本文从烟草NtWRKY40转录因子和amiRNA（artificialmicroRNA）两个方面,研究了NtWRKY40在烟草在病毒侵染过程中的应答作用并应用amiRNA的方法抑制病毒表达。结果表明：野生烟草在病毒侵染后9d，<10NtWRKY40的表达量显著升高，而NtWRKY40过表达转基因烟草在病毒侵染后，病毒相关基因的表达高于野生型对照，与染病程度成正相关，说明过表达NtWRKY40增加了植株对病毒的敏感性，该基因是一个负调控因子。此外，作者以烟草天然miR<167前体为骨架，构建了用于
3、抑制马铃薯Y（PVY）病毒外壳蛋白基因的amiR<167-PVY，并转化烟草。对转基因植株进行抗病毒实验的结果显示，amiR<167-PVY转基因植株对病毒有一定的抑制作用。<15实验结果为进一步研究amiRNA介导病毒抗性的产生机制，寻找最佳靶序列，及利用该策略培育多抗病毒转基因植物提供依据。关键词：烟草花叶病毒；马铃薯Y病毒；WRKY转录因子；amiRNA；抗病毒中图分类号：S57220RolesofNicotianatobacumNtWRKY40inPlantRespondingtoVirusInfectionandApplicatio
4、nofamiRNATechnologyinPlantVirusResistanceLIUJingjing<1,CHENChunling<1,XIYuzhen2,WEIShu<1(<1.KeyLaboratoryofTeaBiochemistryandBiotechnology,AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei,25230036;2.HeyiEnvironmentalProtectionTechnologyCo.,Ltd.Rizhao,276800)Abstract:SomeofWRKYtranscriptio
5、nfactorsareknownbeinginvolvedinplantabioticdefense.AWRKYgene,ahomologueofArabidopsisWRKY40,wasfoundbeingdramaticallyinducedbyplantvirusandfurthercharacterizedinthisstudy.Toverifyitsfunction,NtWRKY40over-expressed30tobaccoplantswereestablished.Aftervirusinfection,thetranscri
6、ptionlevelsofNtWRKY40andvirusrelatedgeneswerequantifiedusingquantitativerealtimePCRatthreestages(6h,3d,9d).Resultsshowedthattobaccomosaicvirusinfectionledto<150foldhigherofNtWRKY40transcriptinnon-transgenicwildtypetobaccothannon-infectedcontrol.NosignificantchangeinNtWRKYtr
7、anscriptionlevelswasnotedintheNtWRKY40over-expressedtobaccoaftervirusinfection.35NtWRKY40over-expressedtobaccoswerefoundmoresensitivetoTMVinfectionthannon-transgenicwildtype.OurdatasuggestedthatNtWRKY40wasanegativeregulatorinplantresponsestoTMVinfection.Inaddition,wedesigne
8、danartificialmiRNAconstructamiR<167-PVY,forsilencingthecoatproteingeneofPotatoviru
