rna干扰与鼻咽癌的研究进展

《rna干扰与鼻咽癌的研究进展》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、RNA干扰与鼻咽癌的研宄进展【】RNA干扰(RNAi)是利用双链小片段RNA高效、特异性地降解细胞内同源mRNA，阻断体内基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型［1］。近几年，RNA干扰研宄在国内外迅速开展，并且扩大到许多方面，如抑制病毒的研究、抑制多药耐药基因的表达、在人体寄生虫研究中的应用、基因治疗、肿瘤研究等。而鼻咽癌的发病机制与许多致病因素有关，实验研究表明RNAi可以通过多种途径影响鼻咽癌细胞的生长，因此RNAi可能为鼻咽癌治疗提供新的方法。【关键词】RNA干扰鼻咽肿瘤小干扰RNAlRN

2、Ai的基本过程和作用机制RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是由双链RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)介导、特异性地降解相应序列的mRNA,从而导致转录后水平的基因沉默(posttranscriptionalgenesilencing,PTGS)现象，具有高效性和高度特异性，已成为基因功能研宄中的一种快速、简便的新方法。目前主要有3种作用机制形式，即转录水平、翻译水平和转录后水平。其中转录后水平是RNAi在各种生物中实现的主要方式。转录水平其干扰机制是通过

3、改变靶基因染色质结构，RNA干扰与鼻咽癌的研宄进展【】RNA干扰(RNAi)是利用双链小片段RNA高效、特异性地降解细胞内同源mRNA，阻断体内基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型［1］。近几年，RNA干扰研宄在国内外迅速开展，并且扩大到许多方面，如抑制病毒的研究、抑制多药耐药基因的表达、在人体寄生虫研究中的应用、基因治疗、肿瘤研究等。而鼻咽癌的发病机制与许多致病因素有关，实验研究表明RNAi可以通过多种途径影响鼻咽癌细胞的生长，因此RNAi可能为鼻咽癌治疗提供新的方法。【关键词】RNA干扰鼻咽

4、肿瘤小干扰RNAlRNAi的基本过程和作用机制RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是由双链RNA(doublestrandedRNA,dsRNA)介导、特异性地降解相应序列的mRNA,从而导致转录后水平的基因沉默(posttranscriptionalgenesilencing,PTGS)现象，具有高效性和高度特异性，已成为基因功能研宄中的一种快速、简便的新方法。目前主要有3种作用机制形式，即转录水平、翻译水平和转录后水平。其中转录后水平是RNAi在各种生物中实现的主要方式。转

5、录水平其干扰机制是通过改变靶基因染色质结构，使其基因转录受限，关闭表达系统。dsRNA被降解成2123个核苷酸长的小片段RNA时，这些小的RNA分子在细胞核内可以诱导组蛋白H3的基因及相应DNA的甲基化［2］。这种序列特异性甲基化的信号与RNA和DNA结合有关。当dsRNA含有与启动子同源的序列，即可使同源靶启动子序列甲基化，从而使靶启动子失去功能，导致下游基因沉默，则转录不能进行。若甲基化出现在编码区，转录能进行，但在转录后水平上沉默。翻译水平［3］主要干扰机制是通过抑制相应mRNA的翻译，使

6、相应的蛋白质表达受阻。其中起重要作用的是微RNA(microRNA,miRNA),它是由长度约70?nt的RNA形成的茎环样前体，经Dicer酶作用后形成长约2125?nt的单链RNA，与相关蛋白结合成诱导沉默复合物［4］(RNAinducedsilencingcomplex，RISC)，然后识别并结合在mRNA的3'末端非翻译区上，阻止核糖体与mRNA的结合及核糖体的移行，从而抑制翻译的进行。转录后水平目前，转录后水平上的干扰是研究最多、最清楚的一种机制。其作用大致可分为以下两个阶段。siRN

7、A形成阶段外/内源性dsRNA通过Argonaute家族基因编码的蛋白质的识别，诱导dsRNA与Dicer结合。在ATP的参与下被Dicer酶切成2123?nt长度的小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)。Billy等［5］在小鼠畸胎瘤细胞F19和P19的细胞质提取物中发现长727?bp的dsRNA被剪切为约2123?nt片段，即siRNA,强烈抑制了同源基因的表达。Zamore等［6］报道，无活性RISC存在于胚胎细胞中，并以250?ku分子质量的前体形式存在，在A

8、TP激活下加工成100?ku的RISC，切割底物mRNAoRISC与互补的靶mRNA结合，在酶的催化下切割、降解，从而达到干扰基因表达的作用。扩增循环阶段RNAi的扩增循环机制即特异性siRNA与靶mRNA结合后，没有被活性酶切割、降解。而是以siRNA中的一条链为引物，以靶mRNA的研究进展为模板，在RNA依赖的RNA聚合酶的作用下，延伸形成新的双链RNA，被Dicer内切酶或相关酶切割为新的2123?ntsiRNA。2RNAi的特征高效性［7］注入细胞内的siRNA比细胞内的mRNA量要少得