高效液相色谱法测定茶饮料中的咖啡因

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1、※检测分析饮料工业2015，Vol.18，No.145高效液相色谱法测定茶饮料中的咖啡因黄现青（河南农业大学，河南郑州450002）摘要：本文探讨了用高效液相色谱法测定茶饮料中的咖啡因的最佳波长、流动相、柱温、流速等条件。获得的最佳检测条件为：波长273nm，流动相乙腈∶水=20∶80，柱温20℃，流动相流速1mL/min。在0~200μg/mL的浓度范围内线性关系良好，加标回收率为99.69％。建立的方法能够准确的测定茶饮料中的咖啡因含量。关键词：高效液色谱法；饮料；咖啡因；测定DeterminationofCaffeine

2、inTeaDrinksbyHPLCHUANGXian-qing(Henanagriculturaluniversity，Zhengzhou450002，China)Abstract:HPLCisusedtoexplorethefactorssuchascolumntemperature,wavelength,mobilephaseandflowrate’sofcaffeineintea.Thebestconditionsiswavelengthof273nm，mobilephaseacetonitrile:water20∶80

3、，columntemperature20℃，andtheflowrateof1mL/min.Inconcentrationrangeof0～200μg/mL，linearrelationwasgood.Standardadditionrecoveryratewas99.69%.Establishedmethodscanaccuratelydeterminecaffeineinteadrinks.Keywords:HPLC；drinks；caffeine；determination中图分类号：TS275.2文献标志码：A文章编号

4、：1007-7871（2015）01-0045-03咖啡因又称咖啡碱，属黄嘌呤衍生物，化学名称1，3，7-三甲基黄嘌呤，是可从茶叶或咖啡中提取的一1材料与方法种生物碱。它能兴奋大脑皮层，使人精神兴奋。咖啡中含咖啡因1.2%~1.8%，茶叶约含2.0%~4.7%。可乐、1.1材料与试剂APC药片中均含有咖啡因。有咖啡因成分的咖啡、茶饮咖啡因（F.W．194.19EINECS）纯度99％；绿茶、料及能量饮料十分畅销，因此，咖啡因也是世界上最普红茶饮料购自超市；甲醇、乙腈均为色谱纯。遍被使用的精神药品，在北美，90%成年人每天都使用

5、1.2仪器与设备咖啡因，很多自然来源的咖啡因也含有多种其他黄嘌呤Waterse2695高效液相色谱仪；DOS色谱柱为生物碱，包括强心剂茶碱、可可碱以及其他物质，例如ODSC18柱（150mm×4.6mm，4.5m）上海迈隆科技有单宁酸。通过前期市场调查发现，市场上许多茶饮料都限公司。在标注或未标注的情况下加入一定量的咖啡因。1.3方法目前测定咖啡因的方法很多，如薄层色谱法（TLC）、1.3.1对照品溶液的制备紫外分光光度法（UV）和高效液相色谱法（HPLC）。本文精密称取咖啡因，用蒸馏水配成浓度分别为20、主要建立高效液相色谱

6、法测定茶饮料（绿茶、红茶）中咖40、60、80、100μg/mL的咖啡因对照品溶液。啡因含量的方法，以满足现代检测对快速准确、预处理1.3.2色谱条件优化简便等方面的需求。分别对影响HPLC测定准确性的检测波长、流动收稿日期：2014-04-21基金项目：河南省教育科学“十一五”规划课题：食品安全教学质量保障体系优化研究（[2010]-JKGHAZ-0028）作者简介：黄现青（1977—）男，博士，副教授，研究方向为食品科学。E-mail：hxq8210@126.com462015，Vol.18，No.1饮料工业检测分析※相、

7、最佳流速、最佳柱温等色谱条件进行研究，确定色2.4柱温的选择谱条件并建立标准曲线。取浓度为12μg/mL咖啡因标准溶液，将柱温分别调1.3.3供试品溶液的制备与测定节在10、15、20、25、30℃，测定结果见表2。结果表分别购买不同批号的绿茶、红茶饮料，各取约明，柱温在10～30℃之间，峰面积和出峰时间均无明显50mL，用超声波振提15min，进行脱气至无气泡产生。差异，从环境、仪器维护等角度考虑，选择柱温20℃进取脱气后试样10mL，水相滤膜过滤，取5mL滤液备行测定。用。在前期建立的条件下对其中咖啡因的含量进行测定。表2

8、柱温对咖啡因含量的影响2结果与讨论Table2Columntemperature’seffectsoncaffeine柱温/℃峰面积/S保留时间/min2.1检测器检测波长的确定1011.415.15对浓度为500μg/mL的咖啡因标准溶液进行紫外扫1511.405.14描，