猪关节内细菌的分离鉴定及生物特性分析

猪关节内细菌的分离鉴定及生物特性分析

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1、16中国兽医杂志2014年(第50卷)第10期ChineseJournalofVeterinaryMedicineᇬܱࢫଽ༥ऩק࡫৖ٳࠣള໾หྟٳ༅ޅݚࡲđਾཫתđઔมđࡻᆞభđࢀԽဉđᅦӑ႖(1.浙江金华职业技术学院,浙江金华321007;2.青岛易邦生物科技有限公司,山东青岛266032;3.浙江同点生物科技有限公司,浙江杭州310004)ᅋေğ通过对16个猪场中关节肿胀的病料进行细菌分离,其中2型猪链球菌的分离率最高,为56.3%,其次为7型猪链球菌,副猪嗜血杆菌的致病率为25%,但关节液中的分离率仅为6.25%,未分离到HPS的关节液PCR

2、也为阴性,但在关节相对应的猪肺脏中分离到的副猪嗜血杆菌,经小鼠攻毒试验证明其致病性。表明2型链球菌造成的关节肿胀发病率最高。ܱ࡯Սğ副猪嗜血杆菌;猪链球菌;关节炎ᇏ๭щᅣ໓"ğ઒ᆽѓང໓4ğোٳğčĎ*TPMBUJPOđJEFOUJGJDBUJPOBOECJPMPHJDBMDIBSBDUFSTPGQBUIPHFOTPGQJHMFUQPMZBSUISJUJT123111HEHai-jian,LIUXiao-dong,MATao,JIANGZheng-qian,JIANGChun-yan,ZHANGCha

3、o-ying(1.JinhuaPolytechnic,Jinhua321007,China;2.QingdaoYibangbiotechnologyco,LTD,Qingdao266032,China;3.ZhejiangTongdianBiotechnologyCo,Ltd,Hangzhou310030,China)"CTUSBDUPathogenswereisolatedfrompigletswithpolyarthritispigletson16pigfarms.Amongthesepathogens,theisolationrateofserotyp

4、e2streptococcussuis(SS)was56.3%,thehighestamongalltheisolates,andthesecondisserotype7SS.TheincidenceofHaemophilusparasuis(HPS)was25%,whiletheisolationrateofHPSfromjointeffusionwasonly6.25%.PCRdetectionofjointef⁃fusionwithnoHPSwasalsonegative,whiletheHPSisolatedfromlungswasprovedpath

5、ogenicusingmicechallengingassay.,FZXPSETHPS;Serotype;polyarthritis关节肿胀是保育猪的常见疾病,而且常常伴1.2材料HPS标准菌株:由华南农业大学传染随发生败血性疾病或者脑炎,为猪场造成了严重病教研室惠赠;TSA与TSB培养基,购自杭州天和[1]的经济损失。引起关节肿胀的疾病很多,包括微生物试剂有限公司;Taq酶等PCR反应试剂,购猪链球菌、副猪嗜血杆菌、猪丹毒杆菌、支原体自TaKaRa公司。等,但目前常见的病原仍是猪链球菌和副猪嗜血[10]1.3细菌分离参考尹秀凤等的副猪嗜血杆菌杆菌[2]。从

6、临床症状上很难将这2种疾病区分开[11]及戴金玲等的链球菌分离方法,用接种环挑取来,必须借助实验室诊断予以确诊。本文是在发肺脏黏液或者关节液,划线于含5%牛血清及生关节肿胀的病死猪中,同时从关节和肺脏中进0.1%NAD的TSA平板上,37℃培养16~24h后,行细菌的分离,比较不同细菌的分离率,并分析挑取单菌落于含5%牛血清及0.1%NAD的TSB培这两种细菌在猪体内的生物学特性。养基中振荡培养24h。ҋਘაٚم1.4细菌的鉴定1.4.1模板的提取取100μL菌液或者关节稀1.1病料来源从浙江的几个猪场中采集,这几释液煮沸10min,离心后取上清作为PCR模

7、板,利个猪场的保育仔猪均出现关节肿胀,并伴随败血用PCR方法对细菌进行鉴定。性疾病或者脑炎、呼吸道症状。[2]1.4.2副猪嗜血杆菌的PCR鉴定PCR反应引物收稿日期:2013-04-08见表1,PCR反应体系(25μL):10×Buffer2.5μL,基金项目:浙江省公益类科技计划项目(2012C22051);浙江省25mmol/LMgCl20.5μL,2μmol/LdNTPs0.5μL,金华市科技计划项目(2011-2-032)20μmol/L上、下游引物各0.5μL,TaqDNA聚合酶作者简介:何海健(1966-),男,副教授,硕士,主要从事动物疾病诊疗

8、教学与技术服务,E-mail:heha

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