马铃薯内生细菌的分离鉴定及种群多样性分析

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1、2016（6）：41-46中国蔬菜CHINAVEGETABLES研究论文马铃薯内生细菌的分离鉴定及种群多样性分析*屈青松彭万里翟立明刘晓林榕姗（山东农业大学生命科学学院，山东农业微生物菌种资源保藏中心，山东泰安271018）摘要：为了分离鉴定马铃薯内生细菌，对相同种植地点的3个不同品种马铃薯内生细菌的群落结构进行分析；从不同品种马铃薯中分离纯化菌株，进行基因序列分析和生理生化鉴定；取相同部位马铃薯组织进行PCR-DGGE操作，并对DGGE图谱上的条带进行差异性分析。最终分离得到9株内生细菌，鉴定1-1、1-2

2、为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilissp.），1-3为类芽孢杆菌（Paenibacillussp.），1-4为韩国假单胞菌（Pseudomonaskoreensissp.），1-5、1-6、2-3为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefacienssp.），2-2为苍白杆菌（Ochrobactrumsp.），3-6为副球菌（Paracoccussp.）。DGGE图谱表明不同品种的马铃薯内生细菌既有差异性又有相似性。最终结果表明3个品种马铃薯内生细菌具有较丰富的种群多样性，且

3、差异性明显，品种可能是影响马铃薯内生细菌群落结构的重要因素。关键词：马铃薯；DGGE；内生细菌；鉴定植物内生菌是指在植物生活史的一定阶段或全种子等器官、组织或细胞间隙之中。部分内生细菌部阶段存在于健康植物内部组织的微生物类群，而的次生代谢物中有时含有与宿主植物相同或相似的被感染的寄主植物不会表现明显感染症状（Herre活性成分（Fisheretal．，1993；何劲等，2006）。etal．，2007；陈雪英等，2008；李瑞等，2009）。由于内生细菌长期生长于寄主内部，并与之协内生菌要从严格消毒的

4、组织和汁液中分离，或从植同进化，故具有促进植物生长、抵抗病虫害的能力，物组织内直接扩增微生物DNA来证明其存在（Stone部分内生细菌还有增加寄主对环境胁迫的抗性作用etal，2000；石晶盈等，2006）。内生细菌广泛存（Munifetal．，2001）。研究表明马铃薯的块茎中具在于植物体内，分布于植物的叶、茎、花、果实、有丰富的内生菌资源（文才艺等，2004），因此研究马铃薯内生细菌的分类及其生物多样性对后续的屈青松，男，本科生，专业方向：生物科学，E-mail：quqingsong@研究有很大的指

5、导意义。outlook.com一些不可培养的微生物可通过扩增出其*通讯作者（Correspondingauthor）：林榕姗，女，副教授，硕士生导师，DNA分子的手段证明其存在，变性梯度凝胶电泳专业方向：资源与环境微生物，E-mail：lrs2680@163.com（DGGE）就是一种常用的非培养手段研究微生物收稿日期：2016-01-18；接受日期：2016-04-20基金项目：国家级大学生创新创业训练计划项目（201410434084）种群的方法，根据DNA在不同浓度变性剂中变性resistantgene

6、Ty-1，1materialwithheterozygosisresistantgeneTy-2，5materialswithpureresistantgeneTy-3，7materialswithheterozygosisresistantgeneTy-3，101materialswithresistantgeneCf-9，1materialwithpureresistantgenePh-3，6materialswithheterozygosisresistant

7、genePh-3，68materialswithresistantgeneI-2，45materialswithresistantgeneMi-1.Amongthem，DHG-27contains7resistantgenes.Therewere5materials（DHG-11，DHG-20，DHG-34，ZHG-8，HG-4）containing6resistantgenes.Therewere2materials（HG-3andXHG-35）contain

8、ing5resistantgenes.Keywords：Tomato；Molecularmarker；Resistantgenedetection—41—《中国蔬菜》学术论文下载www.cnveg.org研究论文中国蔬菜CHINAVEGETABLES行为的不同而导致电泳迁移率发生变化的原理，将个马铃薯品种为研究对象，从其块茎中筛选内生细