高效液相色谱法测定食用调和油中的游离棉酚

《高效液相色谱法测定食用调和油中的游离棉酚》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第４１卷高效液相色谱法测定食用调和油中的游离棉酚·３５·檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱殗殗檱檱谷物化学与品质分析檱檱殗殗檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱高效液相色谱法＊测定食用调和油中的游离棉酚于加乾（宜宾市粮油质量监测站６４４０００）摘要采用反相高效液相色谱法测定食用调和油中游离棉酚，流动相为甲醇∶２％的磷酸水溶液：四氢呋喃＝８８∶１０∶２，Ｃ１８（ＯＤＳ）柱分离，紫外２３５ｎｍ处测定。相对于国标ＧＢ／Ｔ５００９．１４８－２００３植物性食品中游离棉酚的测定缩短了分析时间。本方法的重复性（相对标准偏差）优于５％，回收率为９４％～９８％，最低检测限度为１／

2、ｇ。本方法简单、μｇ易行，可用于食用调和油中游离棉酚的定性定量分析。关键词高效液相色谱法食用调和油游离棉酚食用调和油在我国是一种日常普遍食用的油１实验部分脂，棉籽油作为一种食用油常用来加入食用调和油，棉籽油含有脂溶性色素棉酚，这种物质能导致１．１仪器与试剂胃肠障碍，量大时引起肺出血、呼吸困难等症状。１．１．１Ａｇｉｌｅｎｔ１１００型液相色谱仪（配紫外检测在制油的精炼过程中这种棉酚大部分会被除去，由器）、超声波振荡器。［１］于其毒性较大，国家标准ＧＢ２７１６－２００５规定食１．１．２无水甲醇、磷酸、四氢呋喃等。用油棉酚的限量标准为０．０２％，因此

3、建立快速、１．１．３标准溶液配制精密称取０．１０００ｇ的棉酚高效测定食用调和油中的游离棉酚含量的方法具有标准品，用无水乙醚溶解（如不溶用超声波振荡器重要意义。助溶）。并定容到１００ｍＬ容量瓶中，此液相当于已应用于棉酚测定的各种分析手段有：重量１．０ｍｇ／ｍＬ棉酚，置冰箱保存。法、滴定法、分光光度法，由于棉酚和其它相近的１．１．４棉酚标准液使用液吸取上述标准溶液色素与相同的分析试剂同样起反应，故这些方法并５．０ｍＬ，置于１００ｍＬ的容量瓶中，用无水乙醇定非特异。色谱法，包括纸色谱、薄层色谱、气－液容至刻度。此液相当于５０μｇ／ｍＬ的棉酚。色谱已应

4、用于棉酚分析上。纸色谱和薄层色谱缺乏１．２色谱条件敏感性，而气－液色谱法需要预先转换成为棉酚的色谱柱：ＺｏｒｂａｘＯＤＳＣ１８柱４．６ｍｍ×２５０三甲基硅烷基酯衍生物。高效液相色谱（ＨＰＬＣ）ｍｍ，流动相：甲醇：２％的磷酸水溶液∶四氢呋对于分析类似结构的化合物是一种高度敏感、高度喃＝８８∶１０∶２；流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ。检测波长选择及比较迅速的技术。本文描述了棉酚定性定量分别为２３５ｎｍ。检测中控制柱温为室温。分析的高效液相色谱方法。该方法相对于国标ＧＢ／Ｔ５００９．１４８－２００３植物性食品中游离棉酚的１．３样品的提取与测定［２］测定缩短

5、了分析时间。取约１ｇ的样品油，精密称重，加入５．０ｍＬ＊通讯地址：宜宾市真武路·３６·粮食储藏２０１２（６）无水乙醇，玻璃珠数粒，在混匀器上振荡混匀提取后，缩短了保留时间，并且得到较尖锐的峰形，见５ｍｉｎ，置于冰箱冷冻过夜，过滤，离心。滤液用图２。因此最后确定流动相为：乙睛、水、四氢呋于高效液相色谱分离测定，进样量１０μＬ。喃的混合比例为８∶１８∶２，用磷酸调至ｐＨ２．５。另吸取０，１．０ｍＬ，２．０ｍＬ，５．０ｍＬ，８．０ｍＬ的５０μｇ／ｍＬ棉酚标准液，分别置于１０ｍＬ容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，混匀，高效液相色谱测定，进样１０μＬ，根据

6、响应值绘制标准曲线。２结果和讨论２．１波长的选择以５．０μｇ／ｍＬ棉酚标准溶液作紫外扫描，在２００ｎｍ～４００ｎｍ之间有３个吸收峰，分别为２３５ｎｍ，２８０ｎｍ及３７０ｎｍ，最大吸收峰为２３５ｎｍ，故选用２３５ｎｍ为测定波长。紫外扫描图见图１。图２流动相加入和未加入四氢呋喃的分离谱图２．３标准曲线和检测限度按照实验方法１．３作出标准曲线，棉酚在０～４００μｇ／ｍＬ范围内有良好的线性关系，其最低检测限度为１μｇ／ｇ。２．４实验检测在１０ｇ食用调和油中，添加５０μｇ和２００μｇ棉酚后，按实验方法１．３进行试验，色谱图如图３所示，从得到的色谱图来看，

7、一些未辨出的附加峰的保留时间是４．１和５．９分钟，与棉酚的保留时间１０．４相差较远，故不影响棉酚分析。图１５．０μｇ／ｍＬ棉酚标准溶液吸收光谱２．２流动相的选择根据棉酚分子结构，８位上的羟基受邻位羟基的作用，氢原子易离解，呈较强酸性，故在流动相中加酸，抑制游离棉酚离解，使之呈分子状态，在键合柱上保留时间增加，从而达到分离的目的。使图３试样的分离色谱图用ＺｏｒｂａｘＯＤＳＣ１８柱时，洗脱液选择乙睛一水系２．５精密度与回收率统（ｐＨ２．５磷酸）和甲醇一水系统（ｐＨ２．５，磷酸）分别进行实验，棉酚在柱中的停留时间较长，按１．３色谱条件下测定了棉酚含量

8、的精密度和均在１５ｍｉｎ以上。可见，棉酚在保持力强的柱填回收率。测定结果见表１，由表１可见：６次平行充剂内，洗脱是很困难的。当加入少量的四氢呋喃测定其