棉蚜化学感受蛋白agoscsp2的基因克隆、时空表达动态及气味结合特征分析

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1、棉花学报CottonScience2014袁26渊3冤院228~236棉蚜化学感受蛋白AgosCSP2的基因克隆尧时空表达动态及气味结合特征分析1,22222**1*李娜袁张帅袁雒珺瑜袁吕丽敏袁崔金杰袁李国清(1.南京农业大学植物保护学院/农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室袁江苏南京210095曰2.中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室袁河南安阳455000)摘要院化学感受蛋白是一类存在于昆虫化学感受器中的可溶性蛋白袁可能与昆虫识别外界化学信息有关遥本研究从棉蚜()转录组数据中克隆得到1条编码化学感受蛋白的cDNA序列袁命名为2(Gen

2、Bank登录号KC017751)遥使用qRT-PCR技术对此化学感受蛋白mRNA在棉蚜中的时空表达谱进行了分析袁结果表明2在多数类型棉蚜若虫中的表达量明显高于成虫中的表达量曰在寄主为棉花时的表达量高于寄主为木槿时曰在无翅成蚜中足的表达量相对其他组织较高遥荧光竞争性结合试验表明AgosCSP2与气味化合物的结合能力较弱遥推测该基因主要参与棉蚜若虫对寄主的适应过程袁具有嗅觉以外的生理功能遥试验结果为进一步研究2的功能奠定了基础遥关键词院棉蚜曰化学感受蛋白曰表达谱曰原核表达曰纯化曰荧光竞争结合试验中图分类号院S435.622文献标志码院A文章编号院1002-7

3、807渊2014冤03-0228-091,21222**1*LiNa,ZhangShuai,LuoJunyu,LyuLimin,CuiJinjie,LiGuoqing(1.210095,;2.455000,)Chemosensoryproteins(CSPs),whichbelongstoaclassofsmallsolublepolypeptidesininsectchemicalreceptors,mayberelatedwiththeprocessofstoringandreleasingthechemicalodorsforinsects.Int

4、hisstudy,onefull-lengthcDNAofchemosensoryproteingenewasclonedfrom,named2(GenBankaccessionNo.KC017751).Thetem-poralexpressionpatternofthegenewasstudiedbyqRT-PCRanalysis.Theresultsindicatedthattheexpressionlevelsinnymphweresignificantlyhigherthanthoseinadult;the2washigherexpressedi

5、nthehostofcottonthanthatintheoverwin-teringhosthibiscusanditwashigherexpressedinlegthanthatinotherorganizations.ThebindingcharacteristicsshowedthatAgosCSP2hadlowbindingabilitieswithodorantligands.Theresultsuggestedthatthe2genemostlikelyfunctionedintheprocessofcottonaphidnymphadap

6、tationtohost,butnotfunctionedasthechemosensoryoftheinsect.Thisexperimentmaybevaluableforstudyingtheroleof2inchemicalsensors.:;chemosensoryprotein;expressionprofiles;prokaryoticexpression;purification;competitivebindingexperiment棉蚜()属同翅目(Homoptera)尧能传播瓜类尧番茄等多种蔬菜作物的病毒病害袁蚜科(Aphidida

7、e)尧蚜属()袁在世界各地均有分特别在华北及西北半干旱地区已成为农业上的布遥棉蚜是我国棉花尧瓜类等作物的重要害虫袁并主要害虫遥由于其生殖周期短尧繁殖量大袁一旦条收稿日期院2013-11-15作者简介院李娜渊1987-冤袁女袁硕士研究生袁lina19870604@126.com曰*第一通讯作者袁男袁博士袁教授袁liguoqing001234@yahoo.com.cn曰**第二通讯作者袁男袁博士袁研究员袁cunjinjie@126.com基金项目院野十二五冶国家科技支撑计划项目院棉花病虫害生态控制技术研究与集成示范渊2012BAD19B05冤3期李娜等院棉蚜

8、化学感受蛋白2的基因克隆尧时空表达动态及气味结合特征分析229件适宜袁在短期内便