大草蛉化学感受蛋白基因cpalcsp3组织表达谱及气味结合特性分析

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1、棉花学报CottonScience2015袁27渊3冤院260―267大草蛉化学感受蛋白基因3组织表达谱及气味结合特性分析1,2221,2222*1*王思豹袁张帅袁雒珺瑜袁李兆群袁吕丽敏袁王春义袁崔金杰袁董双林渊1.南京农业大学植物保护学院/农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室袁南京210095曰2.中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室袁河南安阳455000冤摘要院昆虫化学感受蛋白(Chemosensoryprotein,CSP)具有结合和运载气味分子穿过感器淋巴液到达嗅觉受体的作用袁但尚

2、未见有关大草蛉()CSP功能的报道遥本研究克隆得到大草蛉3基因袁利用RT-qPCR技术测定了其在成虫各组织的表达谱袁发现3基因主要在雌雄虫的触角和头部表达袁暗示该基因参与了大草蛉的嗅觉及味觉感受遥为探讨其嗅觉功能袁利用原核表达系统和荧光竞争结合试验测定了CpalCSP3蛋白与84种气味物质的结合能力遥结果表明袁CpalCSP3蛋白与橙花叔醇尧(+)轧雪松醇和茁轧紫罗兰酮具有很高的结合能力袁结合常数()为8.79~9.79滋mol窑L-1曰与根皮苷尧月桂醛尧乙酸香叶酯和琢轧蒎烯也有较高的结合能力袁为11.5

3、4~19.06滋mol窑L-1遥分析认为袁CpalCSP3蛋白可能在大草蛉对这些气味的嗅觉感受中起作用袁使得大草蛉能对害虫寄主植物有效定向进而搜寻到猎物遥关键词院大草蛉曰化学感受蛋白曰组织表达谱曰原核表达曰荧光竞争结合试验中图分类号院S435.622文献标志码院A文章编号院1002-7807渊2015冤03-0260-0810.11963/issn.1002-7807.2015030101,2221,2222*WangSibao,ZhangShuai,LuoJunyu,LiZhaoqun,L俟Limin,

4、WangChunyi,CuiJinjie,DongShuan-1*glin(1.210095,;2.455000,)Insectchemosensoryproteins(CSPs)playimportantrolesinolfactoryperceptionbytransportinghydrophobicchemicalvolatilesacrossthesensillumlymphtoolfactoryreceptors,butthisrolein(Rambur)hasnotbeenaddressed

5、.Inthispaper,agene3wasclonedandthetissueexpressionprofileofthe3geneinmaleandfemaleadultswasdeterminedbyreal-timequantitativepolymerasechainreaction.Resultsshowedthatthe3genewashighlyex-pressedintheheadsandantennaeofbothsexes,suggestingitsinvolvementinolfa

6、ctionandgustation.Tofurtherexploretheol-factoryroleofthegene,recombinantCpalCSP3proteinwasobtainedbytheexpressionsystem,andthebindingaffinitiesofCpalCSP3proteinfor84plantvolatilesweremeasuredusingfluorescentcompetitivebindingassay.Amongthetest-edcompounds

7、,nerolidol,(+)-cedrolandbeta-iononehadhighbindingaffinitiestoCpalCSP3protein,withvaluesrangingfrom8.79to9.79滋mol窑L-1.Inaddition,phlorizindihydrate,dodecylaldehyde,geranylacetateand(+/?)-alpha-pinenealsoshowedhighbindingaffinities,withvaluesfrom11.54to19.0

8、6滋mol窑L-1.Together,theseresultssuggestthatCpalCSP3pro-teinmayplayaroleinolfactionoftheseplantvolatiles,whichfacilitatehost-plantsearchinginadult.chemosensoryprotein;tissueexpressionprofile;prokaryoticexpression;fluo

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