库尔勒香梨kfpmyb及其启动子的克隆和对激素的应答反应

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1、园艺学报,2015,42(8):1448–1456.ActaHorticulturaeSinica1448doi:10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0030;http://www.ahs.ac.cn库尔勒香梨kfpMYB及其启动子的克隆和对激素的应答反应*王博慧,孙晓霞,牛建新(石河子大学农学院,特色果蔬栽培生理与种质资源利用兵团重点实验室,新疆石河子832003)摘要:为明确库尔勒香梨萼片脱落和宿存与kfpMYB基因表达的关系,以其花器官为材料,根据库尔勒香梨kfpMYB基因c

2、DNA序列及梨基因组信息设计引物,通过PCR获得了该基因长度为1659bp的基因组DNA序列和2440bp的上游调控序列,利用PLACE和PlantCare数据库进行启动子顺式作用元件的预测分析。生物信息学分析表明,kfpMYB启动子序列中存在一些与激素调节相关的元件,如脱落酸响应顺式作用元件ABRERATCAL、DPBFCOREDCDC3和EBOXBNNAPA,赤霉素信号抑制因子WRKY71OS、GARE-motif和TATC-box,生长素诱导有关元件NTBBF1ARROLB和TGA-element。利

3、用实时荧光定量PCR检测了不同生长调节物质处理对kfpMYB转录水平的影响,实时荧光定量PCR分析结果表明ABA、ETH、GA、NAA和果树促控剂(PBO)对kfpMYB的表达均有不同程度的影响,说明这些调控元件参与了基因的表达。关键词:库尔勒香梨;MYB基因;启动子;激素;调控元件中图分类号:S661.2文献标志码:A文章编号:0513-353X(2015)08-1448-09CloningofkfpMYBGeneandItsPromoterinKorlaFragrantPear(Pyrussinkian

4、gensis)andDeterminationTheirResponsestoHormones*WANGBo-hui,SUNXiao-xia,andNIUJian-xin(CollegeofAgriculture,ShiheziUniversity,XinjiangProductionandConstructionCropsKeyLaboratoryofSpecialFruitsandVegetablesCultivationPhysiologyandGermplasmResourcesUtilizatio

5、n,Shihezi,Xinjiang832003,China)Abstract:TheflowersofKorlaFragrantpear(PyrussinkiangensisYu)wereusedasmaterialstomakesuretherelationshipbetweenKorlaFragrantpearfruitcalyxshedorpersistenceandtheexpressionofthekfpMYBgene,accordingtokfpMYBgene’scDNAsequenceand

6、peargenomicinformationdesignedapairofprimers,agenomicDNAsequencewithalengthof1659bpandanupstreamregulatorysequencewithalengthof2440bpwereobtainedbyPCR,thepromoter’scis-actingelementswereanalyzedandpredictedusingPLACEandPlantCaredatabases.Bioinformaticsanal

7、ysisshowedthatthekfpMYBpromotersequenceincludedtranscriptionalregulatoryelementsrelatedtohormonalregulation,includingthreeABA-responsivecis-actingelements(ABRERATCAL,DPBFCOREDCDC3,andEBOXBNNAPA),threeGA-responsiveelements(WRKY71OS,GARE-motif,andTATC-box),a

8、ndtwoauxin-responsive收稿日期:2015–04–01;修回日期:2015–07–06基金项目:国家自然科学基金项目(31360474);高等学校博士学科点专项科研基金博导类联合资助课题(2013651810002)*通信作者Authorforcorrespondence(E-mail:njx105@163.com)王博慧,孙晓霞,牛建新.库尔勒香梨kfpMYB及其启动子的克隆和对激素的应答反应

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