洋葱假单胞菌产脂肪酶条件的优化

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1、第53卷第1期湖北农业科学Vol．53No.1湖北农业科学2014年2014年1月HubeiAgriculturalSciencesJan．，2014洋葱假单胞菌产脂肪酶条件的优化王旭愿，张敏，李成涛，沈颖辉，武晶（陕西科技大学教育部轻化工助剂化学与技术重点实验室，西安710021）摘要：采用RashidNp－nPP比色法，通过单因素试验和正交试验对洋葱假单胞菌（Pseudomonascepacia）产脂肪酶的培养基主要成分和发酵条件进行优化，以提高聚丁二酸丁二醇酯（PBS）的生物降解速率。结果表明，该菌种产脂肪酶的最适培养基为菜子油5．0g／L，酵母膏0．5g／L，乳化剂Tween－

2、602．5g／L，培养基初始pH8．0；最适培养条件为接种量9％，培养温度35℃，摇床转速130r/min，培养时间3d。在此优化培养基条件下，洋葱假单胞菌产脂肪酶活性可达32．935U／mL。关键词：洋葱假单胞菌（Pseudomonascepacia）；聚丁二酸丁二醇酯（PBS）；脂肪酶；优化中图分类号：Q939．11＋2+；TQ925.6文献标识码：A文章编号：0439－8114（2014）01－0184-04OptimizationofProductionConditionsoftheLipasefromPseudomonascepaciaWANGXu－yuan，ZHANGMin

3、，LICheng－tao，SHENYing－hui，WUJing（KeyLaboratoryofAuxiliaryChemistry＆TechnologyforChemicalIndustry，MinistryofEducation，ShaanxiUniversityofScience＆Technology，Xi’an710021，China）Abstract：ThecolorimetricmethodofRashidNp－nPPwasused，andsinglefactorandorthogonalexperimentswereappliedtooptimizethefermenta

4、tionmediumandcultureconditionsofPseudomonascepacia，inordertoimprovetheproductionofli-pasetoimprovethebiodegradationrateofpoly（butylenesuccinate）（PBS）．Theresultsshowedthattheoptimummediumcon-tained5．0g／Lrapeseedoil，0．5g／Lyeastextract，2．5g／LemulsifierTween－60，withtheinitialpH8．0．Theoptimumcul-ture

5、conditionswere9％inoculation，culturetemperature35℃，shakerotation130r/minandculturinglength3days．Undertheoptimumconditions，thelipasefromPseudomonascepaciacouldreach32．935U／mL．Keywords：Pseudomonascepacia；polybutylenessuccinate（PBS）；lipase；optimization众所周知，大多数的传统塑料难以降解，且不本研究是从洋葱假单胞菌出发，对1株代谢脂易回收利用，其造

6、成的环境污染引起了社会各界的肪酶的菌株进行了培养基和发酵条件的优化，以提广泛关注［1，2］高其可降解PBS脂肪酶的代谢产量和活力，为后续。因此，人们投入了大量的精力去研究开发可生物降解的环境友好型材料，聚丁二酸丁二微生物降解PBS基共聚物的研究提供了基础数据。醇酯（PBS）具有良好的生物降解性和力学性能，因1材料与方法而受到了极大的关注［3－6］。PBS废弃后，在土壤微生物的作用下，可降解为低分子量物质，最终降解为1．1菌种对环境无污染的CO和H［7］试验于2012年12月至2013年3月在陕西科22O。在PBS的生物降解过程中，虽然其行为是由微生物主导，但直接起降技大学教育部轻化工助

7、剂化学与技术重点实验室解作用的是微生物代谢过程中所产生的脂肪酶，即进行。洋葱假单胞菌（Pseudomonascepacia）由本实在脂肪酶的作用下，PBS主链中的酯键发生水解断验室自主分离筛选并鉴定保存。裂进而发生降解［8］。因此，提高微生物代谢生产脂肪1．2培养基酶的能力对于促进PBS降解，提高PBS降解速度有菌种保存培养基：牛肉膏0．3g、蛋白胨0．5g、着十分重要的作用。NaCl0．5g、琼脂2g、蒸馏水100mL、pH7．0。收稿日期：