外界环境因素对戊糖乳杆菌生物膜形成的影响

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1、2014年11月农业机械学报第45卷第11期doi:10．6041/j．issn．1000-1298．2014．11．035*外界环境因素对戊糖乳杆菌生物膜形成的影响12111任晓镤妥彦峰李明杨王磊姚东琴(1．塔里木大学南疆特色农产品深加工兵团重点实验室，阿拉尔843300;2．大连工业大学食品学院，大连116000)摘要:以一株分离自新疆传统乳制品中生物膜强阳性的戊糖乳杆菌为研究对象，采用微量板半定量法分别探索了不同理化因素及几种食品添加剂对乳酸菌生物膜形成的影响。结果表明戊糖乳杆菌生物膜形成的最佳理化条件2

2、+为接种量1∶200、培养温度37℃、培养时间48h、葡萄糖质量分数2%、pH值5.8～6.8，Ca及乳酸的加入基本能完全抑制生物膜的形成。关键词:乳酸菌生物膜理化因素食品添加剂中图分类号:TS201.3文献标识码:A文章编号:1000-1298(2014)11-0230-05全细菌，其胞外代谢产物均为公认安全，因此该类细引言菌所形成的生物膜有着巨大的开发研究潜力，深入乳酸菌是世界公认能安全地应用于食品领域的研究并开发利用其特性成为必然趋势。然而，外界细菌，经过乳酸菌发酵的食品酸度高、营养丰富、风条件对任何微生

3、物生物膜形成的影响都是巨大的。味独特，易于消化吸收，改善肠道的微循环，对多种营养条件、理化条件等都极大的影响着生物膜的特［8］疾病能起到预防、治疗或辅助治疗的作用。乳酸菌性和结构。代谢产物乳酸是食品、医药、日化等领域的重要原料本文在前期研究中分离获得了一株戊糖乳杆之一;乳酸菌细菌素可作为食品的天然保护剂，不但菌，其生物膜形成能力表现为强阳性，因此将其作为［1］对人体健康无害，并且具有一定的营养价值。本研究的试验对象，对其生物膜形成的影响因素进细菌生物膜是指细菌黏附于物体表面，并分泌行探索，以期为后续开发利用乳酸

4、菌生物膜提供理大量多糖、蛋白质和DNA等多聚物质，将自身包裹论参考。［2］其中而形成的复杂膜状结构。生物膜是微生物1材料和方法在自然环境下生存的一种方式，它的形成过程是微生物附着、生长、脱落及衰亡过程综合作用的结果，1.1试验材料影响微生物在介质表面形成生物膜的因素有很1.1.1菌株［3］［4］多。所有的微生物均能形成生物膜。胞外多试验中所使用的细菌有两种，表皮葡萄球菌糖是生物膜形成的必需条件，在食品工业上某些微ATCC35984(ＲP62A)是生物膜形成的阳性菌株，在生物胞外多糖，例如黄原胶、凝胶多糖、短梗霉

5、多糖、试验中作为生物膜形成的阳性对照;戊糖乳杆菌分［5］海藻多糖等，能够改善食品的流变学特性，增强食品离自新疆特色乳制品酸奶疙瘩，经检测为生物膜形的稳定性和持水能力，赋予食品良好的口感和风味;此成的强阳性菌株，为试验菌株。外，对人体还具有突出的生理功能，如抗肿瘤、调理肠1.1.2培养基及培养条件［6］道、抗致突变、抗溃疡、降低血清胆固醇等。表皮葡萄球菌培养基为胰蛋白胨大豆肉汤国内有关乳酸菌生物膜的研究很少，尤其是戊(TSB)，戊糖乳杆菌培养基为MＲS肉汤培养基，均糖乳杆菌生物膜更是鲜有报道;国外关于这类有益在3

6、7℃条件下有氧培养。［7］生物膜的研究也处于起始阶段，Morikawa曾对枯1.1.3主要仪器及试剂草芽孢杆菌有益生物膜对人类的贡献进行了综述，AbsorbanceMicroplateＲeader(Bilog，ELx808)，他指出有益生物膜在作为生防试剂、生物反应器及B120-ＲAD550型酶标仪(Bio-Ｒad)，BGZ-70型电热生物修复等方面起着重要作用。乳酸菌作为公认安鼓风干燥箱(上海博迅)，八道移液器(Eppendorf收稿日期:2013-11-27修回日期:2014-01-03*国家自然科学基金资

7、助项目(31160342)和新疆塔里木大学校长基金资助项目(TDZKSS201309)作者简介:任晓镤，讲师，主要从事食品微生物学研究，E-mail:rxp_love@126．com第11期任晓镤等:外界环境因素对戊糖乳杆菌生物膜形成的影响231AG)，96孔板(LabphilBiotechnology)，葡萄糖、氯化钠、7.8、8.8、9.8、10.8)的液体培养基稀释菌液，检测生氯化钙、氯化镁、乳酸、柠檬酸、苹果酸、磷酸、明胶、麦芽物膜形成。2+2+糊精等生化试剂均为国产分析纯。(7)Ca与Mg2+2+1.

8、2试验方法用含不同质量分数Ca与Mg(0、0.5%、1.2.1乳酸菌的培养1.0%、1.5%)的液体培养基稀释菌液，检测生物膜将细菌甘油管划线接种于琼脂培养板活化，待形成。过夜培养后挑取单克隆接种到液体培养基，37℃培1.2.4食品添加酸类对乳酸菌生物膜形成的影响8养过夜(活菌数达到约10cfu/mL)。(1)乳酸1.2.2生物膜试验在细胞培养板中分别加入不同体积分数(0、［9］根据C