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《基因枪介导的海岛棉gossypium+barbadensel.茎尖遗传转化体系的建立》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、棉花学报CottonScience2014袁26渊3冤院213~220基因枪介导的海岛棉(L.)茎尖遗传转化体系的建立*马玲玲袁魏延宏袁何兰兰袁柴蒙亮袁朱华国袁孙杰袁张薇(石河子大学农学院/新疆兵团绿洲生态农业重点实验室袁新疆石河子袁832003)摘要院以新疆海岛棉品种新海13号的茎尖为转化受体袁采用基因枪介导法袁研究DNA包裹浓度尧微载体种类尧前渗处理时间尧轰击条件尧筛选方法等对茎尖转化的影响袁建立了基因枪法介导的海岛棉茎尖转化体系遥研究结果表明袁采用1.5滋g窑滋L-1的质粒DNA包裹1.0滋m金粉微载体袁前渗处理12h袁轰
2、击压力为7.584MPa(1100psi)袁轰击距离为6cm袁后渗处理16h袁恢复处理24h袁在120mg窑L-1卡那霉素浓度下直接筛选35d遥在添加4g窑L-1活性炭粒的生根培养基中诱导抗性幼苗生根袁获得抗性再生植株遥通过PCR和RT-PCR检测袁共得到5株转抗除草剂基因的阳性植株遥该研究体系的建立为海岛棉的遗传转化奠定了基础袁为海岛棉的育种工作提供了材料遥关键词院海岛棉曰基因枪法曰茎尖曰遗传转化中图分类号院S562.035文献标志码院A文章编号院1002-7807(2014)03-0213-08*MaLingling,Wei
3、Yanhong,HeLanlan,ChaiMengliang,ZhuHuaguo,SunJie,ZhangWei(832003,冤Inthisstudy,biolisticstransformationsystemwasestablishedwithapicalmeristemsofNo13,avarietyofL.culturedinXinjiang.Severalfactorsofthesystemarestudied,whichcontainedthewrappedconcen-trationofDNA,thetypeof
4、microcarrier,theearlypenetrationprocessingtime,bombardmentconditionandscreeningtechnique,etal.Theoptimaltransformationsystemisasfollowsunderotherconstantconditions.Microcarriersofadiameterof1.0滋mwerecoveredupwiththeDNAconcentrationof1.5滋g窑滋L-1.Apicalmeristemswerebomb
5、ardedwiththeheliumpressureof7.584MPa(1100psi),andwiththebombardmentdistanceof6cm.Targetmaterialswereculturedfor12hbeforebeingbom-bardedand16hafterbeingbombardedintheosmoticmedium.Afterrecoveringfor24hintherecoverymedium,targetmateri-alsweremovedtothekanamycinscreenin
6、gmediumcontainingtheconcentrationof120mg窑L-1kanamycintoscreendirectlyfor35days.Resistantseedlingswereinducedtotakerootsintheinductionrootingmediumadding4g窑L-1activatedcharcoalgran-uleandtheregeneratingplantswereobtained.AfterPCRandRT-PCRdetection,fivetransgenicregene
7、ratedplantswereob-tainedintheendinwhichthegenewereexpressed.L.;biolisticstransformation;apicalmeristem;genetictransformation海岛棉是纤维品质最优的栽培棉种袁新疆是大袁但仍然存在一系列问题袁如枯黄萎病加剧尧产我国海岛棉的唯一产区遥近年来袁随着人们对高量较陆地棉低等遥基因工程技术的迅速发展为改档纺织品需求的增加袁海岛棉的种植面积逐年扩良海岛棉品种提供了新的途径袁而建立有效的海收稿日期院2013-08-16作者简
8、介院马玲玲渊1988-冤袁女袁硕士研究生袁malingling00@gmail.com曰*通讯作者袁zhw_agr@shzu.edu.cn基金项目院国家转基因生物新品种培育重大专项渊2011ZX08005-005冤曰石河子大学科学技术研究发展计划野动植物育种专项
