大白菜—结球甘蓝1号染色体二体异附加系自交后代indel标记分析和染色体数鉴定

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1、园艺学报，2015，42(7)：1347–1355.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0106；http：//www.ahs.ac.cn1347菊花开花抑制基因CmFLC-like1的克隆及表达特性分析*展妍丽，王萃铂，亓钰莹，陈发棣，蒋甲福（南京农业大学园艺学院，南京210095）摘要：为深入研究夏菊的春化机理，利用多聚酶链式反应（PCR）结合5′RACE、3′RACE技术克隆夏菊品种‘优香’[Chrysanthemummorflo

2、rium（Ramat.）Kitam.‘Yuuka’]开花抑制基因CmFLC-like1的cDNA全长序列，获得其全长为945bp，开放阅读框（ORF）为636bp，编码1条211个氨基酸残基的多肽，且具有典型的MADS结构域。同源性分析表明，CmFLC-like1与葡萄（Vitisvinifera）VvFLC和龙眼（Dimocarpuslongan）DlFLC的同源性最高，分别为55%和52%。进化树聚类分析表明，CmFLC-like1蛋白与拟南芥和核桃的FLC遗传距离最近。亚细胞定位表明，CmFLC-like1基

3、因定位在核上。在酵母体系中发现CmFLC-like1没有转录激活活性，拟南芥原生质体转化发现具有转录抑制活性。菊花植株营养生长期不同组织器官的RT-PCR表明CmFLC-like1在叶片中表达量最高，茎和茎尖中次之，根中最少。低温（4℃）可抑制CmFLC-like1表达，且处理时间越长，抑制表达越明显。关键词：菊花；春化作用；FLC；RT-PCR+中图分类号：S682.11文献标志码：A文章编号：0513-353X（2015）07-1347-09CloningandExpressionAnalysisofFlowe

4、ringInhibitorCmFLC-like1GeneinChrysanthemum*ZHANYan-li，WANGCui-bo，QIYu-ying，CHENFa-di，andJIANGJia-fu（CollegeofHorticulture，NanjingAgriculturalUniversity，Nanjing210095，China）Abstract：Thefull-lengthcDNAsequenceofChrysanthemummorflorium（Ramat.）Kitam.‘Yuuka’CmFLC-

5、like1genewasobtainedusingPCRandRACE.ThecDNAwas945bpinlengthwitha636bpopenreadingframewhichencodesapeptideof211residues.CmFLC-like1hasahighhomologytoVvFLC（Vitisvinifera）andDlFLC（Dimocarpuslongan）containedatypicalMADSdomain，withthehomologyof55%and52%，respectivel

6、y.CmFLC-like1waslocatedinthenucleargenomebysubcellularlocalization.Andithasnotranscriptionactivationactivityinyeastsystem，whileitshowinhibitoryactivityintheplastidtransformationsystem.CmFLC-like1hasthehighestexpressionlevelsinleaves，whilethelowestexpressionins

7、temsandshoottip，followedbyroot.TheexpressionofCmFLC-like1wasinhibitedbylowtemperature，especiallyat4℃，.Furthermorethelongerthecoldtreatmenttime，themoresuppresserof收稿日期：2015–03–24；修回日期：2015–05–26基金项目：国家自然科学基金项目（31372100）；教育部新世纪优秀人才支持计划项目（NCET-12-0890）；江苏省“青蓝工程”和

8、“双创计划”项目*通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：jiangjiafu@njau.edu.cn）ZhanYan-li，WangCui-bo，QiYu-ying，ChenFa-di，JiangJia-fu.CloningandexpressionanalysisoffloweringinhibitorCmFLC-like1