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1、中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn双酪氨酸诱导小鼠肠道氧化应激及炎症反#应11,21,2**张帅,施用辉,乐国伟5(1.江南大学食品学院,营养与功能因子研究中心,江苏无锡214122;2.食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214122)摘要:目的:探究氧化蛋白质的重要产物双酪氨酸(DT)对消化吸收的主要部位——肠道的氧化状态及炎症反应的影响。方法:通过测定十二指肠,空肠,回肠和结肠中ROS、GPX10和T-AOC水平以及DT,AOPPs,MDA的含量评估肠道氧化程度。HE染色的近端空肠切片的显微观察结果结合回肠紧密连接蛋白及其相关炎症细胞因子的基因表达水平说明
2、肠道的炎症情况。肠道菌群结构组成采用T-RFLP分析,并用qRT-PCR进一步定量分析。结果:10周饲喂DT导致小鼠肠道ROS水平显著上调(p<0.05),GPX和T-AOC活力明显减弱(p<0.05),DT,AOPPs及MDA大量积累(p<0.05);HE染色显微观察结果显示空肠明15显萎缩,组织学评分进一步说明肠绒毛显著缩短;回肠紧密连接关键蛋白的基因表达水平明显降低(p<0.05),炎症细胞因子基因表达水平显著升高(p<0.05);肠道菌群结构与正常组相比发生了明显的变化,乳杆菌和乳球菌丰度呈倍数减少(p<0.05)。结论:DT诱导肠道氧化应激,削弱肠道抗氧化防御能力,造成氧化损伤,从
3、而引起一定程度的肠道炎症反应和菌群结构的改变,并且这些效应成剂量依赖性。20关键词:氧化应激;肠道炎症;肠道菌群;双酪氨酸;T-RFLP中图分类号:R151Dityrosineinducedoxidativestressandinflammationtomicegut11,21,225ZHANGShuai,SHIYonghui,LEGuowei(1.FoodNutritionandFunctionFactorResearchCenter,SchoolofFoodScienceandTechnology,JiangnanUniversity,Wuxi214122,PRChina;2.State
4、KeyLaboratoryofFoodScienceandTechnology,JiangnanUniversity,Wuxi214122,PRChina)30Abstract:Abjective:ThisstudyinvestigatetheeffectsofDityrosine(DT)administrationontheoxidativestatusandtheinflammatoryresponseofintestinaltractwhichisthecriticalpartofdigestionandabsorption.Methods:Thedegreeofoxidativest
5、resswasdeterminedbymeasuringthelevelsofROS,GPXandT-AOCandthecontentsofDT,AOPPsandMDAintheintestinal.MicroscopicobservationresultsofHEstainedproximaljejunumslicescombinedwithgeneexpressinglevelsof35intestinaltightjunction(TJ)proteinsandrelativeinflammatorycytokinesreflectedintestinalimflammation.Flo
6、raingutwasanalysedthroughT-RFLP,andquantitativeanlysisofspecificbacterialwasconductedbyRT-PCR.Results:10-weekfeedingofDTsignificantlydecreasedthelevelofGPXandT-AOCinmicegut(p<0.05),whileincreasedthecontentofROS,DT,AOPPsandMDAremarkably(p<0.05).MicroscopicobservationofHEstainingaccompanyingwithhisto
7、logicalscore40showedintestinalvillishorteneddistinctivelyinjejunum.TherewasanotabledeclineinTJproteins(p<0.05)whileanobviousriseinpro-inflammatorycytokines(p<0.05).Futhermore,bacterialstructurewaschangedbyD