氨基葡萄糖盐酸盐分析方法比较

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1、氨基葡萄糖盐酸盐分析方法比较摘要：分别采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）、高效液相色谱-示差折光检测法（HPLC-RID）和高效离子色谱-脉冲安培检测法（HPIC-PAD）检测氨基葡萄糖盐酸盐，确定了几种方法的检测限和线性范围，考察了方法的精密度，测定了氨基葡萄糖盐酸盐的加标回收率。结果显示，在三种方法中HPIC-PAD方法能测定到最低浓度的氨基葡萄糖盐酸盐，且具有最高的精密度；HPLC-RID方法检测限最高，精密度最差。关键词：高效液相色谱，高效离子色谱，蒸发光散射，示差折光，脉冲安培检测前言：氨基葡萄

2、糖类物质具有重要的生理活性，Elson-Morgan法[1]是此类物质测定的经典方法，由于其只能测定总的糖类而使其应用受到限制。多种色谱方法在糖类的分析中发挥着重要作用，如气相色谱法[2]（GC）、凝胶色谱法[3]（GPC）、高效毛细管电泳法[4]（HPCE）、高效液相色谱法[5,,,678]（HPLC）、高效离子色谱法[9,10]（HPIC）等。这些检测方法对不同糖类化合物的检测分析各有不同的优势。最常用的糖类化合物的分析方法为高效液相色谱法，近年来离子色谱技术在糖类化合物分析中的应用也越来越广泛。本文对几种糖类物质测定方法

3、在氨基葡萄糖盐酸盐分析中的应用进行了比较，为氨基葡萄糖类物质分析的方法选择提供指导。1、实验仪器和材料1.1试剂和样品乙腈（TEDIA，HPLC级），超纯水（Milli-Q），氨水（西陇化工，分析纯）氨基葡萄糖盐酸盐标准样品（国家海洋局第三海洋研究所），氨基葡萄糖盐酸盐对照品（中国药品生物制品检定所），硫酸氨基葡萄糖胶囊（由厦门蓝湾科技有限公司提供）准确称取、精确定容的浓度为40.00mg/mL和1.00mg/mL的氨基葡萄糖盐酸盐标准储备液。1.2仪器和条件电子天平（SartoriusBP211D），Milli-QBioce

4、lA10超纯水机（Millipore）HPLC-ELSD法：Waters-Alliance2695型高效液相色谱仪，AlltechELSD800蒸发光散射检测器，WatersCarbohydrate柱（250mm×4.6mm，4μm）；流动相为乙腈：水=70：30；流速：1.0mL/min；柱温：28oC；ELSD参数：载气流速为3.00L/min，蒸发管温度为80oC。HPLC-RID法：高效液相色谱仪（Waters），K-2401RI检测器（诺尔KNAUER），氨基柱AsahipakNH2P-504E；流动相（其中氨水浓度

5、为0.05%）乙腈比水为80：20，流速为1.2mL/min，柱温25oC。HPIC-PAD法：ICS-3000型离子色谱仪（Dionex）：ED3000电化学检测器，Au工作电极，Ti对电极，pH/Ag/AgCl复合参比电极，糖类分析柱CarboPacPA10（250mm×4mm）；NaOH浓度为20mmol/L，流速：0.6mL/min，柱温和检测池温度均为30oC。2、结果与讨论2.1方法检测限实验2.1.1HPLC-ELSD法精密量取氨基葡萄糖盐酸盐标准储备溶液（40.00mg/mL），稀释不同浓度进样，直到检测获得的

6、氨基葡萄糖盐酸盐主峰信号为检测器噪声水平的3倍为止，得氨基葡萄糖盐酸盐的最低检测限为0.2μg。2.1.2HPLC-RID方法精密量取氨基葡萄糖盐酸盐标准储备溶液（40.00mg/mL），稀释不同浓度进样，直到检测获得的氨基葡萄糖盐酸盐主峰信号为检测器噪音水平的3倍为止，得氨基葡萄糖盐酸盐最低检测限为10.66μg。2.1.3HPAEC-PAD方法精密量取氨基葡萄糖盐酸盐标准储备溶液（1.00mg/mL），稀释不同浓度进样，直到检测获得的氨基葡萄糖盐酸盐主峰信号为检测器噪音水平的3倍为止，得氨基葡萄糖盐酸盐最低检测限为0.12

7、5ng。对比三种方法的结果可以看出，三种方法中HPIC-PAD方法能够检测最低浓度的氨基葡萄糖盐酸盐，可用于极低浓度下的样品检测。HPLC-RID方法效果最差。2.2标准曲线2.2.1HPLC-ELSD法分别精密吸取氨基葡萄糖标准储备溶液（40.00mg/mL）稀释成0.24、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20mg/mL各不同浓度。过滤取10μL进样，以测得面积y对进样量x（μg）进行线性回归，得线性回归方程为：y=2.0786×106x-1.3639×106，r2=0.9991。本方法在2.4～12.0μg范围

8、内，线性良好。2.2.2HPLC-RID方法分别精密移取氨基葡萄糖盐酸盐储备液（40.00mg/mL）稀释成8.00、16.00、24.00、32.00mg/mL各不同浓度。过滤取20μL进样，以测得面积y对进样量x（μg）进行线性回归，得回归方程为y=5800.9x–483