Waters-e2695高效液相色谱仪维护操作培训

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Waterse2695日常维护使用培训奥锐特QC实验室

1•选择适当的洗针溶剂（绿管溶剂）和SealWash溶剂•清洗进样针（NeedleWash）•清洗柱塞杆密封（SealWash）•平衡系统•Purge进样器•实验操作•清洗系统•Purge进样器•清洗进样针（NeedleWash）•清洗柱塞杆密封（SealWash）正确的实验步骤

2检查sealwash瓶（绿签）和Ndlwash（细管棕瓶）是否干涸，并及时添加。PrimeSealwash(清洗密封垫)作用：润滑柱塞杆，冲洗残留的流动相或缓冲盐沉淀。操作步骤：Diag→Primesealwash→start（注意：sealwash不会自动停止，检测前查看底部管路有液体流动）PrimeNdlwash（清洗进样针）作用：洗针可除去进样针上沾污的缓冲盐流动相和样品，从而延长进样器密封垫的寿命。操作步骤：Diag→PrimeNdlwash→start开机维护

3Sealwash管路的说明Sealwash溶液流动于柱塞杆密封垫外，起到润滑柱塞杆的作用。干涸后会导致：流动相内析出的盐磨损柱塞杆和柱塞杆密封垫。磨损的柱塞杆抽取流动相比例不准确（会偏少），压力下降。磨损的柱塞杆密封垫导致流动相漏液，压力下降。故障的直观表现：保留时间推迟

4干灌注Dryprime干灌注（管路干涸，执行该操作）作用：当某一管路中流动相走干时，执行该操作。操作步骤：轻轻振摇溶剂瓶中的过滤头以除去可能留存的气泡；在灌注排液阀出口插上一支注射器，然后打开排液阀（反时针旋转半圈）。不要将注射器固定在排液阀上，而要用手将其贴紧阀的出口；选择DryPrime，然后按OK；按屏幕上你想灌注的相应的流路（A,B,C,或D）键；用一只手握住注射器，同时用另一只手抽注射器的杆，使针筒中产生一段让流路中空气逸出所必需的真空；重复此操作直至排液口有溶剂流出。这可能需要几分钟时间。

5湿灌注Wetprime湿灌注（更换溶剂或溶剂瓶、系统长时间空闲，执行该操作）特别注意：在由缓冲溶液改为高有机溶液时，为避免“分离单元”内出现盐沉淀，请使用中间溶剂（低有机溶剂或纯水）过渡。操作步骤：选择WetPrime，然后按OK；设置Flow（参考）：5ml/min、Time：5min，然后按OK。

6湿灌注

7灌注进样器PurgeInjector灌注进样器作用：除去前一次运行残留的流动相；清除来自流路或注射器的气泡；在做完wetprime后，改变到一个新的可混溶的溶剂。操作步骤：选择PurgeInjector，然后按OK。

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9峰面积重现性差：注射器Purgeinjector灌注注射器注射器中出现的气泡会导致系统抽取的样品量不准确，进而影响峰面积的重现性。进样前检查注射器内流动相是否存在气泡。

10操作步骤：选择InjectSamples（样品进样）选项，Enter，出现InjectSamples（样品进样）对话框，如上图：VialRange：样品瓶位置Injectspervial：进样次数（5~10次）Runtime：运行时间（一般0.5min）Injectvolume：进样量（设置要比检测时的进样量大，一般为40μl或80μl）备注：通常以该方式作为进样前的洗针操作。InjectSamples样品进样

11预设方法在仪器面板上将SOP中的方法预设好进行稳定，当运行方法为梯度方法时，可以先设置一段时间的梯度最高有机比例进行色谱柱适应。（但有些方法在最高有机比例下容易失去压力，如R-CMH，需要注意。）操作步骤：右侧面板上使用方向按钮将虚线框移至所要修改的地方，直接输入数字，Enter确定。

12溶剂置换（纯有机相和缓冲盐不能直接置换）缓冲盐溶液水或低浓度有机溶液纯有机相溶液所有的仪器接头都会因为缓冲盐的析出而导致压力升高或压力不稳，严重的会导致堵塞。防止缓冲盐析出措施：检测完成后，对使用过含缓冲盐流动相的管路进行纯化水或低浓度有机溶液的置换。注意！！！

13Lostprime压力丢失Checkvalve(单向阀)注意阀芯箭头方向单向阀清洗步骤：40℃～50℃纯水超声20min；异丙醇超声20min；最后甲醇超声10min。安装单向阀时需注意单向阀阀芯的箭头方向为向上。注意！！！

14Inlinefilter（在线过滤器）PartsNo.WAT088084在线过滤器清洗步骤：纯水（亦可水浴加热）清洗20min；异丙醇超声20min；最后甲醇超声10min。安装在线过滤器滤芯时需注意滤芯方向，且需放平后再上紧。灌注流动相时压力变高注意！！！

15注意！！！定期检查检测器灯能量回车键分屏显示键选项移动键主屏幕方法调用，A/B通道切换设置及诊断单/双波长，自动调零运行/停止键第二功能键监视色谱图屏幕对比度Diag---(选2)sampleandrefenergy按shift-1(lamp)shift—1—shift—1检查检测器灯的能量(灯的亮度)检查检测器灯的使用时间手动关检测器灯

16流动相供给不畅，泵压力不稳。溶剂过滤头堵不锈钢滤头应先用纯化水超声清洗。若不行，则可用100%的异丙醇超声波清洗20分钟，之后再用纯化水超声清洗。注意！！！

17注意！！！色谱柱连接正确连接管路前端与色谱柱存在空隙，造成死体积。PEEK管头部太细，与色谱柱连接后有空隙，造成死体积。