高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程

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1、目的：制定规范的高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程。范围：适用于Agilent1260HPLC。责任：色谱检验工程师负责本规程执行。内容：1开机1.1打开电脑。1.2打开液相色谱各个模块的电源。1.3双击桌面“仪器—联机”，进入联机界面。1.4排气：1.4.1手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）。1.4.2右键单击“泵”图标区域，选择“方法…”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min（一般为3－5ml/min），点击“确定”。1.4.3右键单击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“ON”，

2、点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。1.4.4右键单击“泵”图标，点击“方法…”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀。1.4.5右键单击“泵”图标，点击“方法…”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min。1.4.6同理右键单击“柱温箱”，“检测器”图标，点击“方法…”选项，按照方法的要求设置温度，波长，点击“控制”选项，“ON”打开柱温箱和检测器。2编辑方法2.1点击

3、“方法”－“编辑完整方法”开始编辑完整方法。2.2选中除“数据分析”外的三项，进入下一选项卡。2.3方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：Thisisfortest!）。进入下一选项卡。2.4泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1.0ml/min，停止时间：如10min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配比，如乙腈：水＝75：25，A为水，B为乙腈，则设置B：75％即可。进入下一选项卡。2.5自动进样器参数设定:选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶

4、位置，进入下一选项卡。2.6柱温箱参数设定:在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。进入下一选项卡。2.7UV检测器参数设定:在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm。点击确定。2.8在“运行时选项表”中，选中“数据采集”，点击“确定”。2.9从“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定。3单次采集3.1从“运行控制”菜单中，选择“样品信息”选项，选择合适的路径，在“数据文件”中选择“前缀/计数器”，输入样品瓶的位置，点击“确定”。3.2基线平

5、稳后约10分钟，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”。4多次数据采集4.1按照步骤2编辑完整方法。4.2点击“序列”－“序列表”，输入“样品瓶”“样品名称”，“进样次数”，选择合适的“做样方法”4.3点击“序列”－“序列参数”，选择序列数据的保存路径（序列会自动生成以“序列名称－时间”为名称的文件夹保存数据），数据建议以选择“前缀/计数器”保存。4.4从“序列”菜单，选中“序列另存为…”，输入一序列名，如“测试”，点击“确定。4.5从“运行控制”菜单中选择“运行序列”。5数据分析（脱机状态使用）5.

6、1双击“仪器—脱机”图标进入的脱机画面。5.2从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。5.3从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名。点击“确定”，则数据被调出。（如预建立标准曲线，应先打开浓度较低的标样图谱。）5.4做谱图优化：从“图形”菜单中选择“信号选项”。从“范围”中选择“满量程”或“自动量程”及合适的时间范围或选择“自定义量程”调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“确定”。6积分:6.1从“积分”菜单中选择“积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度”，“峰宽”，“

7、最小峰面积”，“最小峰高”。点击，自动加载积分参数。6.2点击左边“√”图标，将积分参数存入方法并退出“积分事件”。6.3如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。7标准曲线7.1点击“校正”－“校正设置”，输入“含量单位”。7.2点击“校正”－“新建校正表”，点击确定。输入“化合物名称”和“含量”，点击“确定”，按照提示删除其他组分。7.3至此完成单级校正，如要增加校正级别，应从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名（第二个标样），点击“校正”－“添加级别”，点击确定，输入“

8、含量”，依次增加校正级别。8打印报告8.1从“报告”菜单中选择“设定报告”选项，点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法”，其它选项不变，点击“确定”。8.2从“报告”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告”底部的“打印”钮。8.3点击“文件”－“另存为”－“方法”，把数据分析方法保存，下次分析可直接在“文件”－“调用”－“方法”下，将该方法调出使用。（调用的方法中含有积分方法，标准曲线方法和打印报告方法）9关