血清无机磷Pi磷钼酸法测定

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血清无机磷Pi磷钼酸法测定1.实验原理磷钼酸紫外终点比色法。钼酸铵+硫酸+磷酸盐磷钼酸络合物;该络合物在340nm有最大光吸收峰。在340nm的吸光度与标本中无机磷的浓度成正比2.标本采集2.1病人准备:无特殊要求。2.2类型:血清、肝素血浆或尿液。3.标本存放:血清/血浆稳定性:4~25℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定3个月。尿液稳定性:4~25℃在pH<5保存可稳定2天;不可使用已被污染的标本。收集24h尿液时,应在收集瓶中加入10%(W/V)盐酸10ml,以防止磷酸盐沉淀。测定前尿液应用蒸馏水作1:20稀释,测定结果乘以21。4.标本运输:室温条件下运输5.标本拒收标准:细菌污染不能做测定。6.实验材料:

16.1奥林巴斯无机磷测定试剂盒试剂1试剂26.1.1试剂准备:试剂为即用式。6.1.2试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2~25℃,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.3变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。6.1.4注意事项:试剂中含硫酸,如与皮肤及粘膜接触,请仔细地用大量水冲洗。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2校准品:使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7.仪器:奥林巴斯AU2700生化分析仪8.操作步骤8.1

2项目基本参数:参见AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤:参见AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判断与分析10.质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法:以TruCalU复合校准品磷校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmol/L报告。12.参考值范围血清/血浆[1]成人:0.84~1.45mmol/L儿童/青少年:1~30天1.25~2.50mmol/L1~12个月1.15~2.15mmol/L1~3岁1.00~1.95mmol/L

34~6岁1.05~1.80mmol/L7~9岁0.95~1.75mmol/L10~12岁1.05~1.85mmol/L13~15岁0.95~1.65mmol/L16~18岁0.85~1.60mmol/L尿液[3]:12.9~42.0mmol/L(注:各实验室应有自己的参考范围。)参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。13.临床意义:无机磷在体内多数以磷酸盐形式存在,主要为骨骼的无机成分,但是在细胞中也以磷脂和核酸形式存在,如腺苷三磷酸(ATP)还参与体内的能量转换。血浆中的无机磷呈磷酸钙的形式,因此血浆无机磷的水平与钙水平息息相关。血清或尿液中无机磷的检测主要用于肾功能失调,骨骼和甲状旁腺疾病等的诊断。在肾功能衰竭、甲状旁腺功能减退、假性甲状旁腺功能减退以及骨骼和细胞内磷酸钙流失时,无机磷浓度上升。因吸收不良、甲状腺功能亢进和维生素D

4缺乏时,无机磷浓度下降。同时进行钙监测可获得更多的信息。14.操作性能14.1线性范围:0.23~4.84mmol/L。14.2精密度:重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法,AU2700批内重复性小于3%,总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)天间精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)样品11.430.0261.87样品11.400.0422.99样品22.720.0230.85样品22.650.0873.32样品33.490.0421.20样品33.420.1002.9514.3方法学比较:本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时对59个样品进行Pi检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下:y=1.00x-0.045mmol/L;r=0.999。14.4灵敏度:本试剂的检测限为0.23mmol/L。14.5病人结果可报告范围:0.23~4.84mmol/L

5,如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。15.超出范围结果处理本法线性上限为4.84mmol/L。如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。16.病危报警值的处理当血清磷测定值>1.5mmol/L或<0.3mmol/L时,在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17.方法局限性17.1本法线性上限为4.84mmol/L。如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。17.2干扰物质:当样品中抗坏血酸浓度£1704mmol/L,胆红素浓度£342mmol/L,血红蛋白浓度£1.50g/L,甘油三酯浓度£9.0mmol/L时没有观察到干扰。18.补救措施:当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。19.参考文献

61.ThomasL.Clinicallaboratorydiagnostics.1sted.Frankfurt:TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.241-7.2.EndresDB,RudeRK.Mineralandbonemetabolism.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofclinicalchemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.p.1395-1457.3.BurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofclinicalchemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.p.182920.其他:仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。

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