资源描述:
《月季花药培养》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、被子植物定义:凡是种子有果皮包被着,胚珠有子房壁包被着的植物,就叫做被子植物一、被子植物和裸子植物2、裸子植物定义:凡是胚珠裸露,外面没有子房壁包被,种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物实例:玉米、大豆、梨、杏实例:松、杉、柏
1
2花的结构:花梗、花托、萼片、花瓣、雌蕊和雄蕊
34、花的作用被子植物的有性生殖是在花里进行的,雌蕊和雄蕊是进行有性生殖的主要部分二、被子植物花粉粒的形成花丝花药:囊状结构,内有很多花粉粒1、雄蕊的结构雄蕊:
4药隔:花药中部,由薄壁细胞构成,内有维管束花药花粉囊(4或2)囊壁花粉粒表皮纤维层2、花药的结构
5
63、花药的发育周缘细胞(初生壁细胞)外:体积较大药室内壁中:一层或几层细胞内:绒毡层分裂孢原细胞造孢细胞花粉母细胞(小孢子母细胞)有丝分裂绒毡层:为花粉粒的发育提供营养,最后消失药室内壁:多量淀粉,发育成纤维层中层:早期分解,吸收,消失
7花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞4、被子植物的花粉发育②花粉粒的形成花粉母细胞(小孢子母细胞)减数分裂①经历时期:四分体时期、单核期、双核期
8四分体时期(进入单核期)有丝分裂单核靠边期(小孢子)单核居中期(小孢子)小孢子(单核花粉粒)
9精子精子有丝分裂花粉管细胞核生殖细胞核生殖细胞营养细胞双核期两个精子和一个营养核的基因型相同
101花粉母细胞4个小孢子减分有分4个花粉管细胞核4个生殖细胞核有分8个精子
11③花粉粒类型一个成熟的花粉粒即为雄配子体,有两种情况:二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成)三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个精子。
12三、被子植物胚囊的形成1、雌蕊的组成柱头、花柱、子房2、子房的结构
13被子植物子房的结构胚珠的结构花粉管精子卵细胞极核子房壁珠被珠孔
14花粉落到雌蕊柱头上以后,在柱头上黏液的刺激下,花粉开始萌发并形成花粉管,花粉管沿着花柱向胚珠方向生长,到达胚珠后从珠孔绕过卵细胞进入胚囊,到达胚囊中卵细胞和极核之间,这时花粉管的前端破裂,两个精子释放出来,其中一个精子与两个极核结合形成受精极核,另一个精子与卵细胞结合形成受精卵,这是被子植物特有的双受精现象4、受精过程
15
16花雄蕊雌蕊花药花粉粒精子精子子房胚珠胚囊子房壁珠被卵细胞两个极核受精卵受精极核胚胚乳种皮种子果皮果实有丝分裂有丝分裂1n1n2n1n3n2n2n2n2n胚是一个新个体的幼体5、发育结果
17
18(二)产生花粉植株的两种途径花粉花粉胚状体愈伤组织丛芽生根移栽脱分化分化再分化诱导脱分化说明:两种途径之间并没有绝对的界限,主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
19①不选择单核期之前花药原因:花药质地幼嫩,容易破碎;②不选择单核期之后花药原因:花瓣开始松动,给材料消毒带来困难;③挑选单核期花药方法:应当选择完全未开放的花蕾,菌少,易消毒。(三)影响花药培养的因素1、材料的选择:⑴不同种类植物的诱导成功率不同。⑵同一种植物,亲本植株的生理状况对诱导成功率有直接影响。⑶合适的花粉发育时期:花期早期时的花药最佳。⑷选择最合适的花粉发育时期
201.影响花粉植株的主要因素:和等。2.材料的选择:①从花药来看,应当选择(初花期、盛花期、晚花期)的花药;②从花粉来看,应当选择(四分体期、单核期、双核期、萌发期)的花粉;③从花蕾来看,应当选择(完全未开放、略微开放、完全盛开)的花蕾。〖思考4〗除此之外,你认为影响花粉诱导成功的因素还有哪些?〖思考5〗为什么选择合适的花粉发育期是诱导花药培养成功的重要因素?材料的选择培养基的组成植物的种类、亲本植株的生理状况、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等。这是因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体,在花粉发育的过程中,只有某一个时期对离体刺激敏感。
21花药培养所采用的培养基各成分中植物生长调节剂的水平和配比起决定作用。⑴诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基:广泛使用2,4-D、IAA;⑵诱导分化的培养基常除去2,4-D而以IBA代之。亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种密度、培养的环境条件等对诱导的成功率都有一定的影响。2、培养基的组成:3、其他因素:
22花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?
23月季花药培养时的花粉粒最好是()A、四分体时期B、单核居中期C、单核靠边期D、二核或三核花粉粒C2、培养基:花药培养基所采用的培养基可能因植物的不同而有所变化小麦中为N6,马铃薯、月季中为MS,油菜中为B5培养基
243、其他因素亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种的密度等对诱导成功都有一定的影响六、实验操作(一)材料的选取②某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。①最常用的方法有醋酸洋红法1、方法
25①醋酸洋红法染色机理醋酸洋红为碱性染色剂,而花粉细胞内有染色体,染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色。将体积分数45%的醋酸100ml煮沸,缓缓加入1g洋红,在加热回流8h,冷却至50℃,过滤即可。②醋酸洋红的配置2、醋酸洋红法
26
27将花药放在载玻片上,加一滴质量分数1%的醋酸洋红,用镊柄将花药捣碎,盖上盖玻片在显微镜下检查。③染色操作3、焙花青—铬钒法将无水酒精与冰醋酸按体积比为3:1的比例混匀①卡诺氏固定液的配制方法
28花药应该在卡诺氏固定液中固定20min,然后取出放在载玻片上,加焙花青—铬钒溶液染色,盖上盖玻片后在显微镜下检查。将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中,溶解后加入0.1g焙花青,混匀并加热至沸腾,煮沸5分钟后冷却至室温,过滤,加蒸馏水定容至100ml。②焙花青—铬钒溶液的配制方法③染色操作
29(二)材料的消毒1、酒精处理①花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒,立即取出。②无菌水清洗③无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
302、消毒液处理(三)接种和培养①放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟(也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液)②无菌水冲洗3~5次用于培养花药,实际上多数未熟,由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护,通常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。
31在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药②要彻底去除花丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成立即将花药接种于培养基上,通常每瓶接种花药7-10个。1、剥取花药①勿损伤花药,以免诱导出非花粉愈伤组织2、接种注意:
32①培养条件:温度控制在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。3、培养②培养:一般经过20-30天培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植株③注意:如果花药开裂释放出胚状体,则一个花药内就会产生大量幼小植株,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培养基上,否则这些植株将很难分开。
33在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常常会出现染色体倍性的变化(主要原因是营养核和生殖核融合造成的)4、鉴定和筛选
34精品课件!
35精品课件!
365、植物组织培养技术与花药培养技术的异同点:项目相同点不同点植物组织培养技术离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。外植体为体细胞,染色体数无需加倍。花药培养技术取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。