微生物检验细菌对药物的敏感试验

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1、第三十五章　细菌对药物的敏感试验本章考点：1.临床常用抗菌药物简介（1）临床常用抗菌药物分类及作用原理（2）抗菌药物选择原则2.需氧菌和兼性厌氧菌的体外抗菌药物敏感试验（1）KB法、稀释法试验原理（2）KB法、稀释法试验方法（3）KB法、稀释法试验结果解释（4）KB法、稀释法试验影响因素（5）杀菌试验（6）体外联合药敏试验3.其他菌的体外抗菌药物敏感试验（1）厌氧菌体外药敏试验方法（2）结核分枝杆菌体外药敏试验方法（3）真菌体外药敏试验方法4.体内抗菌药物的活性和浓度测定（1）原理（2）方法5.耐药菌株的监测（ESBLs、MRS、HLAR、VRE、PRP、AmpC酶）（1）耐

2、药机制（2）耐药表型检测方法（3）耐药菌抗生素应用原则　　第一节　临床常用抗菌药物简介　　一、临床常用抗菌药物简介表5-35-1临床常用抗菌药物抗生素分类代表药物作用机制青霉素类　不耐受β-内酰胺酶：氨苄西林、哌拉西林、替卡西林、青霉素G耐β-内酰阻断细菌细胞壁肽聚糖的合成头孢菌素一代：头孢噻吩、头孢咗啉二代：头孢呋辛三代：头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢哌酮四代：头孢吡肟阻断细菌壁肽聚糖的合成其他β-内酰胺类单环β-内酰胺类：氨曲南碳青霉烯类：亚胺培南、美洛培南阻断细菌细胞壁肽聚糖的合成β-内酰胺酶抑制剂头霉素类：头孢西丁、头孢替坦棒酸、他唑巴坦、舒巴坦　　　　　　与β-

3、内酰胺酶有较高的亲全性以竞争性和不可逆的抑制方式发挥作用氨基糖甙类庆大霉素、链霉素、阿米卡星、妥布霉素、奈替米星与细菌核糖体30S小亚基不可逆结合，抑制mRNA的转录和蛋白合成喹诺酮类诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、左旋氧氟沙星作用于DNA旋转酶，干扰DNA的复制、修复和重组大环内酯类红霉素、克拉霉素、阿齐霉素、罗红霉素可逆结合细菌核糖体50S大亚基抑制蛋白合成，阻止肽链延长林可酰胺类克林霉素结合细菌核糖体50S大亚基，抑制蛋白合成，阻止肽链延长四环素类　四环素、强力霉素、米诺环素结合细菌核糖体30小亚基，抑制蛋白合成，阻止肽链延长氯霉素类氯霉素结合细菌核糖体50S大亚基，抑制

4、蛋白合成，阻止肽链延长磺胺类及增效剂复方磺胺甲唑增效剂：甲氧苄胺嘧啶磺胺类竞争结合二氢叶酸合成酶增效剂结合二氢叶酸还原酶，抑制细菌生长硝基呋喃类呋喃妥因、呋喃唑酮干扰细菌的氧化还原系统，阻断细菌的代谢糖肽类万古霉素、替考拉宁阻断细菌细胞壁肽聚糖的合成　　二、药敏试验中抗菌药物的选用　　按临床需要选用抗菌药物的种类。同类抗菌药物仅选一个作为代表。根据测定细菌的种属和感染部位进行选药，参考NCCLS公布的《抗菌药物敏感性试验执行标准》。　　抗菌药物在标准中分为四组：　　A组为常规首选药敏试验药物。　　B组包含一些临床上重要的，特别是针对医院内感染的药物，也可以用于一级试验。但是，

5、它们只是被选择性地报告，例如当细菌对A组同类药物耐药时，可以选用。其他报告指征可包括以下几点：特定的标本来源（如三代头孢菌素对脑脊液中的肠道杆菌或者TMP／SMZ对泌尿道的分离菌株）；多种细菌感染；多部位感染；对A组药过敏、耐受或无效的病例；为流行病学调查目的向感染控制组报告。　　C组包括替代性或补充性抗微生物药，可在以下情况进行试验：某些单位潜伏存在有对数种基本药物（特别是对同类的，如β-内酰胺类或氨基糖苷类）耐药的，局部流行或广泛流行的菌株；治疗对基本药物过敏的患者；治疗少见菌的感染（如氯霉素对沙门菌属或某些假单胞菌属）；为流行病学目的向感染控制组报告。　　U组仅用于治疗

6、泌尿道感染的抗微生物药（如呋喃妥因和某些喹诺酮类药物）。除泌尿道，其他感染部位分离的病原菌不用此组药物进行试验。　　第二节　细菌对药物的敏感试验　　细菌对抗菌药物的敏感试验（药敏试验）是指在体外测定药物抑制或杀死细菌能力的试验。药敏试验主要用于：①帮助临床医师选择效果最佳的药物进行感染性疾病的治疗，以避免由于抗菌药物使用不当造成的许多不良后果；②进行流行病学调查，了解本院、本地区致病菌的耐药性变迁情况，以便在宏观上控制耐药性的发生发展，对于院内感染的控制也具有积极意义；③药敏试验结果还可以用来做某些细菌的鉴定。④指导有关部门制定流行耐药菌的防治措施。　　一、扩散法（K-B法）

7、　　目前常用的方法是纸片琼脂扩散法，是一种半定量的方法。美国NCCLS纸片扩散法敏感试验分委会所推荐的标准方法是以Bauer-Kirby建立的K-B法，是目前公认的标准实验方法。　　（一）原理　　　　将含有定量抗菌药物的纸片（药敏纸片）贴在已接种待检菌的琼脂平板表面特定部位，该点称为抗菌药源。药物借其分子的扩散力向周围琼脂中扩散，形成了随着药源距离加大，琼脂中药物浓度逐渐减少的梯度浓度。　　其药源周围一定区域的琼脂内药物浓度恰高于抑制待检菌所需浓度时，则该区域内细菌不能生长，形成透明抑菌圈。抑菌圈的大小