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时间:2018-03-08
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1、白血病白血病(Leukemia)是一类造血干细胞的恶性克隆性疾病。发生恶性克隆性增殖的细胞:分化障碍,凋亡受阻,停滞在细胞发育的不同阶段,积聚在骨髓和其他造血组织中,并浸润其他组织器官正常造血受抑制感染、贫血、出血及肝脾淋巴结肿大。概述急性白血病:细胞分化停滞在较早阶段慢性白血病:细胞分化停滞在较晚阶段分类按细胞分化程度与病程缓急分类分类分类发病自然病程血及骨髓细胞形态急性白血病(AL)较急一般仅几个月异常原始及早期幼稚细胞为主慢性白血病(CL)缓慢一般为数年异常成熟细胞与晚期幼稚细胞为主细胞形态和生物学特征分类AL急性淋巴细胞白血病(ALL)-L1、L2、L3急性髓细胞白血病(AML)-M0
2、、M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7。CL慢性粒细胞白血病(CML)、慢性单核细胞白血病(CMOL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢性粒单核细胞白血病(CMML)特殊浆细胞白血病(PCL)、多毛细胞白血病(HCL)、幼淋巴细胞白血病,EL、BL尚未阐明。目前认为凡导致染色体异常、癌基因突变、活化和抑癌基因失活等因素均有可能导致白血病的发生。多认为与物理、化学、生物等因素相关,尤其病毒因素。病因和发病机制(一)病毒感染:已证实鸡、小鼠、猫、牛和长臂猿等动物的自发性白血病组织中分离出白血病病毒。从人类T细胞白血病细胞中分离出一种逆转录病毒,称HTLV。(二)电离辐射:已证实电离辐射可引起白
3、血病,与放射剂量及放射部位相关。病因和发病机制(三)化学物质:已发现苯及其衍生物,乙双吗啉,氯霉素,磺胺类及某些解热镇痛药、抗癌药(尤其是烷化剂)等能引起骨髓毒性而导致白血病。(四)遗传因素:家族性白血病约占白血病的0.7%。某些遗传性疾病和免疫缺陷性疾病容易发生白血病。(五)其他血液病:MDS,淋巴瘤,骨髓瘤,PNH等病因和发病机制细胞体积:由大→小,巨核和早幼粒例外。胞浆量:由少变多;颜色:深蓝→浅蓝→淡蓝→淡红;颗粒:从无到有,由非特异性到特异性。胞核大小:大→小→脱核(红系);形态:圆形→凹陷→分叶(粒系);颜色:淡红→紫红→深紫;结构:细丝→粗网状→块状。核仁大小:由大变小;数目:多
4、→少→消失。血细胞的发育演变规律由于细胞形态学对细胞之识别能力有限,采取以下分型方法。细胞形态学(morphology,M)、免疫学(immunology,I)、细胞遗传学(cytogenetics,C)、分子生物学(molecularbiology,M)。分类是白细胞(包括血小板、血管内皮细胞等)在正常分化成熟的不同阶段以及活化过程中在这些不同谱系(lineage)细胞胞浆或细胞膜表面出现或消失的标记,参与机体重要的生理和病理过程。八十年代在WHO和国际免疫学联合会(IUIS)组织下,将识别同一分化抗原的来自不同实验室的单克隆抗体归为一个分化群CD:clusterofdifferentiat
5、ion/clusterdesignation白细胞分化抗原免疫分型ImmunophenotypingCD2CD4CD#=clusterdesignationnumber流式细胞术(FlowCytometry,简称FCM)是一种可以快速、准确、客观,并且同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性的技术,同时可以对特定群体加以分选研究对象为生物颗粒,如各种细胞、染色体、微生物、及人工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征,并加以定量流式细胞术简介通过流式细胞仪我们可以得到以下信息-相对细胞大小-相对细胞颗粒密度和内部复杂度-染色过细胞的相对荧光强度流式细胞仪系统InjectorTipFlu
6、orescencesignalsFocusedlaserbeamSheathfluid1.散射光信号前向角散射光(FSC,ForwardScatter)入射激光的同向散射光信号:细胞相对大小及其表面积。侧向角散射(SSC,SideScatter)入射激光90角的散射光信号细胞颗粒度及细胞内相对复杂性。ForwardAngleLightScatter前向角散射光——FSCFALSSensorLaser侧向角散射光——SSCFALSSensor90LSSensorLaser散射光能被用来区分不同细胞群体的基本形态上的差异-通常使用“散点图”来看散射光信号-散点图上的一个点就代表一个细胞颗粒的数据
7、散射光散点图——DotPlotlysedwholeblood其中:FSC:反映细胞的大小SSC:反映细胞内颗粒性FSC/SSC:不能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开CD45/SSC:CD45是WBC抗原,RBC.PLT为阴性。CD45在成熟细胞表达强,幼稚细胞表达弱。在淋巴,单核及粒细胞表达强度不同。优点:能将淋巴单核及幼稚细胞区分开,特异分析白血病细胞免疫表型。FCM设门法荧光素吸收激光能量荧光素将
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