三角帆蚌珍珠层呈色机理探讨实验设计

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1、三角帆蚌珍珠层呈色机理探讨实验设计一、预备实验计划1、总类胡萝卜素的提取方法及效率2、利用ß-胡萝卜素为标准品制备标线，测定类胡萝卜素的总量3、HPLC测定样品类胡萝卜素的种类及含量4、样品中微量元素的测定及比较二、实验总体步骤1、样品来源选择来源相同（同一水域）的白色、紫色、粉色三角帆蚌珍珠层（外套膜边缘部）样品、紫踵劈蚌珍珠层。2、样品前处理用次氯酸钠（5%）处理10分钟（？），去除贝壳表面角质层和棱柱层（？）；注意浸泡时间及效果。3、珍珠层的粉碎待白色、紫色、粉色三角帆蚌珍珠层、紫踵劈蚌珍珠风干后，用粉碎机粉碎成粉（应

2、注意粉碎时的温度，防止类胡萝卜素的降解）。4、总类胡萝卜素的提取用丙酮：石油醚（1：1）（丙酮主要有利于提取极性较小或非极性的如β-胡萝卜素；石油醚主要有利于提取极性的类胡萝卜素）按料液比1：5在棕色瓶中萃取，同时加入0．01％丁基羟基甲苯抗氧化，离心将上清液，反复萃取至萃取液无色，合并上清，真空干燥后，用丙酮定溶至25ml棕色容量瓶中，最好在当日测定或低温保存。5、类胡萝卜素的总量测定以ß-胡萝卜素为标准品制定标准曲线，分光光度计法（最大吸光度处的波长，448nm左右），测定样品中类胡萝卜素的总量。6、类胡萝卜素的组成及含

3、量检测样品过滤后，利用HPLC（外标法和内标法）检测萃取样品中类胡萝卜素的组成及含量。7、微量元素的测定主要检测哪几种微量元素。8、探讨珍珠层呈色与类胡萝卜素、微量元素的关系Algae,themaincarotenoidproducersintheaquaticenvironment,dependontheseason,sothecarotenoidcontentsofshrimpschange,alsodependingontheseasons.三角帆蚌不同组织中类胡萝卜素的含量比较分析一、开题报告主要内容：1.本研究的意

4、义：分析类胡萝卜素在不同组织中积累的情况；同时阐述珍珠层颜色与类胡萝卜素含量的关系。2.国内外研究现状：综述贝类（主要是海水贝类、淡水贝类）软组织中类胡萝卜素的含量、种类的研究概况。（如果内容少，可以扩大到水产品，如虾、鱼组织中的类胡萝卜素分类研究。）3.技术路线比较简单：制定标准曲线；有机容积萃取软组织中类胡萝卜素，分光光度计比色；比较分析。二、主要实验步骤：1、选择来自同来源的三角帆蚌，清水中暂养2d让消化道排空。2、用b-胡萝卜素标准品，分光光度法比色（480nm），制定标准曲线，建立回归方程。（需要摸索配置合适的浓度

5、梯度，参考长旋螺（thespindleshell）肌肉中含量在0.045mg/g）。3、测量壳长、壳高、壳宽、湿重；解剖，辨别不同珍珠层颜色，分别取外套膜（外套膜按不同颜色珍珠层部位分别取样）、鳃丝、斧足、闭壳肌、性腺；每种样品取重复6个以上，按重量体积比（1g：5ml）添加丙酮与石油醚（1：1）的混合液，组织研磨后4℃下静置过夜，离心取上清液，再加5ml丙酮与石油醚混合液萃取，反复萃取至无色，合并上清液，480nm测定吸光度。1、计算不同组织类胡萝卜素含量，用统计软件分析组织差异，不同颜色珍珠层外套膜的类胡萝卜素含量。许多

6、研究者对三角帆蚌不同颜色珍珠的有机相进行了拉曼光谱研究。一、类胡萝卜素的相关资料叶黄素（1utein），玉米黄素（zeaxanthin），番茄红素（lycopene），ß-胡萝卜素（ß-caroten）虾青素Astaxanthin1、化学性质类胡萝素是一类异戊二烯化合物。由尾尾相连的2个二十碳单位构成四十碳的分子母体碳架，并从中衍生出许多不同的化合物。类胡萝素分子最显著的结构特征是分子中含有由不同数目的双键或单键的长链所构成的中央分子区域，形成1个共轭体系。多数类胡萝素分子中带有9～l3个共轭双键．由于C=C双键的存在，使每

7、个类胡萝素分可有多种同份异构体。2、主要种类类胡萝卜素(carotenoids)是天然色素多烯色素的总称，广泛存在于动、植物和微生物界，能在水产动物体内转化并沉积。其按结构可分为胡萝卜素类和叶黄素类。前者由碳和氢组成，属于烃类色素，如胡萝卜素；后者属于含氧色素，是烃类色素的衍生物，含有羟基、羰基、甲氧基等，如虾青素、角黄素等。其中虾青素，是动物界分布最广泛的一种叶黄素，尤其在海洋甲壳类动物和鱼类体内是主要的类胡萝卜素。胡萝卜素类的色素有a-胡萝卜素、b-胡萝卜索、g-胡萝卜素，均是维生素A源，在体内可转化为维生素A，其对鱼体

8、的着色作用受其转化率的影响，一般认为着色效果不明显(于昱，2004)。叶黄素是胡萝卜素的含氧衍生物，这类化合物无论是天然来源还是人工合成来源都能被吸收，最终沉积在水产动物组织中。在天然饲料中，类胡萝卜素有顺式和反式两种构型，由于反式构型胡萝素具有较红的色泽和较高的稳定性，因此反式较顺式有好