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时间:2018-02-27
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1、果汁中总糖的测定方法糖果—还原糖的测定 1.直接滴定法 2 原理 样品经除去蛋白质后,在加热条件下,直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液,以次甲基蓝作指示剂,根据样品液消耗体积,计算还原糖量。 3 试剂 3.1 碱性酒石酸铜甲液 称取15g硫酸铜(CuSO4•5H2O)及0.05g次甲基蓝,溶于水中并稀释至1000mL。 3.2 碱性酒石酸铜乙液 称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠,溶于水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1000mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 3.3 乙酸锌溶液 称取21.9g乙酸锌,加3mL冰
2、乙酸,加水溶解并稀释至100mL。 3.4 亚铁氰化钾溶液(10.6+89.4) 称取10.6g亚铁氰化钾,加水溶解并稀释至100mL。 3.5 葡萄糖标准溶液(1mg/mL) 精密称取1.000g经过98~100℃干燥至恒量的纯葡萄糖,加水溶解后加入5mL盐酸,并以水稀释至1000mL。此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖。 3.6 盐酸 4 仪器 4.1 实验室常规仪器和设备 4.2 古氏坩埚或G4垂融坩埚 5 操作步骤 5.1 样品处理 将样品捣碎混匀待用,样品应避免暴露在空气和阳光下,并尽可能迅速地进行分析。 称取约
3、2.5~5g样品,置于250mL容量瓶中,加50 mL水,摇匀后慢慢加入乙酸锌溶液5mL及亚铁氰化钾溶液(10.6+89.4)5mL,加水至刻度,混匀。静置30min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用。 5.2 标定碱性酒石酸铜溶液 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,从滴定管滴加约9mL葡萄糖标准溶液,控制在2min内加热至沸,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积,同时平行操作三份,取其平均值,计算
4、每10mL(甲、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)。 5.3 样品溶液预测 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,控制在2min内加热至沸,趁沸以先快后慢的速度,从滴定管中滴加样品溶液,并保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以每两秒1滴的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积。 5.4 样品溶液测定 1 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,从滴定管滴加比预测体积少1m
5、L的样品溶液,使在2min内加热至沸,趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定,直至蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积,同法平行操作三份,得出平均消耗体积。 6 结果计算 按下式计算糖果中还原糖的含量: 100100025021×××=VmmX 式中:X—样品中还原糖的含量(以葡萄糖计),%; m1—10mL碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各5mL)相当于还原糖(以葡萄糖计)的质量,mg; m2—样品质量,g; V—测定时平均消耗样品溶液体积,mL。 7 精密度 同一样品两次平行测定值相对差不得超过15%。
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