人工牛樟木段木栽培技术: - 南台科技大学知识

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1、菌種篩選技術要培育好的牛樟芝,首先就要掌握優秀的菌種,然後再用以培養優良的子實體。牛樟芝子實體或菌絲體產量的高低和功效的好壞,除了和培養是否管理得當有關之外,最重要的是和原始菌種質量優劣有十分密切的關係,而菌種質量的優劣取決於遺傳特性及製種技術。品質優秀的菌種,具有高生產力與高次級代謝物合成力,一般人要生產牛樟芝都可由財團法人食品工業研究所的「生資中心」購得菌種,但真正優秀的菌種需要靠自己分離。優良生產菌種分離、篩選包括以下幾個過程:(一)菌種分離和菌種培養1菌種分離培養基製作:秤取200克去皮且切成薄片的馬鈴薯,置於不鏽鋼鍋中,加入1000毫升的水,加

2、熱至煮沸,保持沸騰狀態一小時左右,直到馬鈴薯片到達輕壓而不爛的狀態為止,然後用紗布過濾,濾取濾液。濾液中加入50到80克的洋菜瓊脂,繼續煮沸,直到洋菜瓊脂完全溶解。接著加入50克葡萄糖,並將水量補充至1000毫升,然後以1.2公斤的蒸氣壓滅菌30分鐘。滅菌後,於生物安全操作台內分裝於培養皿中,培養基凝固後即可應用。2菌種分離:菌種分離就是從牛樟芝子實體、長有菌絲體的培養基,或用孢子分離菌種,以培養出純的牛樟芝菌絲體作為接菌種子。菌種分離包括新鮮子實體組織分離及菌木分離兩種。(1)新鮮子實體組織分離a、組織分離對種原種性的要求:分離用的種原必須是種性優良、

3、產量高、色澤鮮艷、生長快速的年輕菇體。牛樟芝子實體成熟後,外部組織通常會纖維化,細胞中原生質已很稀少,所以成熟子實體上分離的菌種菌絲生命力較弱;同時子實體成熟後,由於已完全纖維化,很難用小刀將菇體切開;若反覆切割,就會傷到菌絲,很難以獲得良好的菌種,所以多年生的成熟子實體反而不宜做為種原使用。b、分離方法:用刀片將牛樟芝菇體由段木上取下,用清潔的紗布或塑膠袋將菇體包好,放入生物安全操作台;生物安全操作台經過十五分鐘的紫外線照射和酒精消毒後即可進行分離。分離時,子實體表面用沾有75%乙醇的清潔紗布擦拭,然後用鋒利小刀將菇體表皮切去,將裡面肉質部分分割成0.

4、5公分大小的小塊,接種於培養皿中。每一培養皿置放一塊,蓋上蓋子即可。移植完畢後,將上述培養皿置於25℃下培養,菌絲長至三分之二培養皿時,將外圍成長快速的菌絲切下並移植置新的培養皿中,經過二到三次的移植後即可獲得優良的菌種。(1)菌木分離取含有牛樟芝子實體的段木一段,表面用刀切去材質鬆軟的腐朽部分,接著送入生物安全操作台,在操作台中用沾過75%乙醇的紗布擦拭,進行表面消毒。消毒後切除表面部分,將裡面長有牛樟芝菌絲的木材切割成火柴梗大小的木片,用鑷子夾起送入培養基上,將培養皿置於恆溫、恆濕的培養箱中。箱中溫度控制在25℃,一般經過二到四星期可發現白色的菌絲由

5、木片邊緣長出,待菌絲長至三分之二培養皿時,將外圍成長快速的菌絲切下並移植至新的培養皿中。由於菌木分離容易感染雜菌,可於培養基配置時加入抗生素抑制雜菌生長,經過兩到三次的繼代培養後,即可獲得無雜菌污染的菌絲。通常按此標準操作程序即可挑選到優良的牛樟芝菌種作進一步擴大繁殖之用。3.菌種的繁殖擴大:生產上需用的菌種量非常多,因此,分離獲得的菌種需進一步的擴大繁殖,以獲得更多的菌種。從菌種供應單位購置來的菌種也需進一步擴大繁殖。菌種擴大繁殖包括:培養皿固態菌種擴大繁殖法與液態菌種繁殖法。固態法是在無菌操作台內中將培養皿上的菌種用解剖刀分割成0.5公分大小的小塊,

6、再挑於新的固態培養基上,每一培養皿放置一小塊,在25℃下培養,培養3~4星期後,菌絲長滿八成培養皿即可使用。(一)牛樟芝固態植菌原種的製作培養原種就是將培養皿的菌種接種於含木質素、纖維素培養基上長成的固態菌絲體。凡是含有木質素、纖維素、半纖維素、澱粉、蛋白質的原料均可做原種培養料,一般用來培養牛樟芝植菌原種的原料主要是牛樟木屑,或牛樟木的枝葉等,但由於牛樟木屑取得困難,近年來已改用其他闊葉樹木屑、棉子殼、黃豆粉、米糠、玉米粉等外加馬鈴薯抽出物、碳酸鈣、蔗糖調製而成。木屑、棉子殼等是菌絲體生長的碳源;黃豆粉、馬鈴薯抽出物等可提供豐富的氮源養分。蔗糖容易被菌

7、絲利用,能幫助菌絲早期的生長,所以在原種培養料中可放1%左右的蔗糖。碳酸鈣可延緩培養基的酸化,有利於菌絲體後期的生長。(二)牛樟芝生產菌種的培養生產牛樟芝固態菌種常用的培養基配方如下:牛樟木或其他闊葉木木屑74%,黃豆粉24%,碳酸鈣和蔗糖各1%,含水量60%左右。牛樟木或其他闊葉木木屑70%,黃豆粉7%,麩皮20%,碳酸鈣和蔗糖各1%,含水量58~60%。棉子殼80%,玉米粉14%,麩皮5%,碳酸鈣和蔗糖1%,磷酸二氫鉀0.1%,硫酸鎂0.05%,含水量60%左右。牛樟木或其他闊葉木木屑40%,黃豆粉25%,玉米粉30%,蔗糖、碳酸鈣各1%,磷酸二氫鉀

8、0.1%,硫酸鎂0.5%,含水量60%左右。培養基含水量是指每100公斤已拌好的

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