广西烟仓主要霉变生物的生物学特性研究.

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1、广西烟仓主要霉变生物的生物学特性研究.广西烟仓主要霉变生物的生物学特性研究.　　随着广西卷烟工业的迅速发展，烟叶贮藏的规模越来越大，贮藏时间也相应延长。然而，长期以来，由于仓贮条件简陋，设施落后，管理粗放，加上广西地处亚热带，高温多雨湿度大，致使烟叶在贮藏期间常常遭受各种霉变生物的危害，造成巨大经济损失。据2001-2002年普查的结果，已分离鉴定出危害广西贮藏烟叶的有曲霉、青霉、根霉、毛霉等四个属的霉变生物，其中以曲霉菌的分布最广，危害最重。目前，我国各省对烟叶仓贮病虫害的研究仅在虫害方面有较多的报道，而霉变生物研究的报道则很少，只有云

2、南省的王革等就云南发现的泡盛曲霉等8种曲霉的形态特征、培养性状和河南的姜夫等及江苏的谢宗传等对卷烟防霉技术作过相关报道。2001年，在广西区烟草公司的大力支持下，作者围绕广西烟仓霉变生物的种类鉴定、主要有害生物的生物学特性、霉变发生条件及防治技术展开了大量的调查和研究。本文就主要有害生物生物学特性的测定结果报道如下。1材料与方法1.1供试菌株选择2001-2002年广西烟仓霉变生物种类普查中出现频率较高的三种曲霉作供试菌，即溜曲霉、匍匐散囊菌原变种、谢瓦散囊菌。各分离菌均先经单孢纯化并回接验证其致病性后移入PDA斜面上保存，试验前再移入P

3、DA平板上25℃培养7d后供测定用。1.2培养基的制备马铃薯、肉汁胨、查氏等组合培养基按常规方法制作，半组合烟汁培养基是按每1000ml水加入所需烟叶的百分含量煮沸30min，用纱布过滤，加水补足1000ml后，加入琼脂18g，121℃下湿热消毒20min制成；天然烟叶培养基是按每三角瓶装入贮藏烟叶5g，再加入水20ml，121℃下湿热消毒20min制成。1.3温度对其生长的影晌将直径5mm的菌苔移入PDA平板上，每皿一块，置于中央，分别在13℃、16℃、19℃、22℃、25℃、28℃、31℃、34℃、37℃、40℃、43℃、46℃和49

4、℃13种温度下培养，分别于7d和7d，14d后测量菌落直径，计算其净生长量[/21并作比较。每处理3皿，即3次重复。1.4湿度对其生长的影晌先将贮藏的烟叶剪成直径约为85mm的圆片，并经湿热灭菌备用。试验在密闭容器中进行，以氯化钙等无机盐饱和溶液作湿度控制物，试验设51%、65%、70%、75%、82%、90%和94%7种湿度。测定时先将烟叶平放于培养皿内，然后移入直径5mm的菌苔，每皿1块，置于25℃下培养，分别于5d，10d，15d，20d，25d，45d后观察各菌的生长情况。1.5pH值对其生长的影晌将直径5mm的菌苔移入pH值分别

5、为2.5，3.0，3.5，4.0，45，5.0，55，6.0，6.5，7.0，75，8.0，8.5，9.0，9.5，10.0，10.5，11.0和11.5的PDA培养基上，置25℃下恒温培养，分别于7d和10d后或7d，14d和21d后测量菌落直径，计算其净生长量并作比较。1.6不同培养基对其生长的影晌将直径5mm的菌苔分别移入10%烟叶煎汁、5%烟叶煎汁、NA，PDA和CA等5种不同的培养基上，置25℃下恒温培养，分别于7d和10d后或7d，14d和21d后测量菌落直径，计算其净生长量并作比较。在天然烟叶培养基上的培养是将菌苔接种至三角

6、瓶内烟叶表面的中央，每瓶一块，在同样温度下培养7d后观察菌体生长情况。1.7致死温度和时间的测定将各菌的孢子连同菌丝用含1%吐温20的菌水从PDA平板上洗下，摇匀后取lml悬浮液加入灭菌的试管中，分别置于50、55、60、65、70℃恒温水浴锅中分别处理5、10、15、20、25、30min后迅速冷却，然后倒入PDA平板上，并涂抹均匀，25℃下培养7-14d后，观察各菌生长情况。2结果与分析2.1温度对各菌生长的影响图1-1、1-2、1-3的试验结果表明，三种曲霉菌的适宜生长温度存在明显差异，其中谢瓦散囊菌的生长温度为16-37℃，最适生

7、长温度为22-31℃，在16℃和37℃下生长微弱；匍匐散囊菌的生长温度为13-31℃，最适温度为22-28℃，在13℃和31℃下生长微弱；溜曲霉的生长温度为16-43℃，最适温度22-37℃，在43℃下仍能微弱生长。结果还表明，在相同条件下，溜曲霉的生长速度比另外两种菌快得多，在22-28℃下培养10d，溜曲霉的菌落已基本长满整个平板，而另两种菌培养至14d，其净生长量仅为10多mm。图1-1温度对谢瓦散囊菌生长的影响图1-2温度对匍萄散囊菌生长影响图1-3温度对溜曲霉生长的影响 　　2.2湿度对各菌生长的影响表1结果表明，三种参试曲霉菌

8、在相对湿度70%以下均不能生长，当相对湿度达75%时，除溜曲霉不能生长外，谢瓦散囊菌、匍匐散囊菌已开始生长，但生长速度很慢，而且相比之下，谢瓦散囊菌稍快，匍匐散囊菌较慢，二者均要在培养的第25