维生素c测定方法综述

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1、维生素C测定方法综述摘要目前研究维生素C测定方法的报道较多。本文介绍了滴定法、荧光法、光度分析法、高效液相色谱法的原理，举例说明操作过程，并结合多方面综合对比分析它们的优缺点，得出它们的适用范围，以确定最适合测定维生素C的方法更好地评价水果产品质量。关键字维生素C测定原理测定方法评价维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能，所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件中较稳定，维生素C开始氧化为脱氢型抗坏血酸(有生理作用)。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起

2、解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义。本文总结近年来的文献报道维生素C测定方法主要有滴定法、荧光法、光度分析法、高效液相色谱法。1.滴定法测定维生素C1.1测定原理2，6一二氯靛酚法和碘量法是较常见的滴定测定维生素C的方法。还原型抗坏血酸还原染料2，6一二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6一二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯

3、靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。碘量法的原理：维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种，当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子，随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。1.2测定操作2，6一二氯靛酚法：取适量的样品可食部，加入100mL2%草酸溶液，制成匀浆。取同一样品匀浆10g，加入1%草酸溶液20mL，摇匀，用滤纸过滤，取5mL过滤液于锥形瓶中，用2，6一二氯靛酚钠盐溶液滴定(1mL≈0.02mgVitC)，以淡红色存在30s内不褪色为滴定终点。记录2，

4、6-二氯酚靛酚钠盐溶液的消耗量，根据结果计算出样品中维生素C含量(mg/100g)。碘量法：将果蔬洗净，用纱布拭干其外部所附着的水分，若样品清洁可以不必洗。样品可以先纵切为4~8等份，分别称取20g可是用食部分，置于研钵中加入2%Hcl15~10ml，研磨至浆状，移于100ml容量瓶中，用2%HCl加至刻度线处，混匀，过滤，记录滤液总体积。样品液的测定:在50ml烧杯中，用移液管注入10%KI溶液0．5ml，0.5%的淀粉溶液2ml，样品液5ml，蒸馏水2.5ml，用0.001NKIO3液滴定，要一滴滴加入，并时时摇动烧杯，至微蓝色不褪色为终点(一分钟不褪为止)。

5、记录所用KIO3液毫升数，计算维生素C含量。1.3测定方法评价2，6-二氯酚靛酚滴定法具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰，如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。碘酸钾滴定法较便宜，使用碘酸钾滴定法测定蔬菜中维生素C含量较为简便易行，而2，6一二氯靛酚法相对复杂。总的来说，滴定法操作简便、快速，无须特殊仪器，但在测定深色样品时，准确度和精确度欠佳。2.荧光法测定维生素C[1]2.1测定原理Deutsch和Weeks曾经报道过一种检测维生素C的

6、荧光分析法(OPDA)，并被指定为维生素C的经典荧光分析法。在该方法中，维生素C先被活性炭(Norit)氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA)，DHAA再与荧光底物邻苯二胺(OPDA)结合生成荧光产物，通过对该荧光产物的检测实现对维生素C的定量分析。孙振艳等[1]提出了一种新的测定维生素C的荧光分析方法。基于维生素C被Cu2+氧化为DHAA，DHAA进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用，通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。2.2测定操作荧光分析法(OPDA)的测定方法：称取一定量样品，研磨后用水浸泡，取清液加入适量1%草酸溶液，振摇约3mi

7、n，加入0.2g已处理好的活性炭再充分振摇约3min后过滤，滤液加于两个25mL比色管再加入5.0mL缓冲溶液,，其中一管加入2.0mL硼酸溶液(即空白)摇匀，放置15min后，两管均加入邻苯二胺溶液10mL，避光放置30min待测。样品荧光强度减去空白荧光强度值即为样品相对荧光强度值。孙振艳等的荧光分析法：在25mL比色管中依次加入0.6mLCuSO4溶液，2.0mL十六烷基三甲基溴化铵溶液，2.0mL苯甲酸溶液，一定体积的维生素C标准溶液，，5.0mLNaOH-邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液，用蒸馏水定容，摇匀。在35℃恒温水浴中加热30min，将溶液流水冷却至室温，

8、激发波长为