流式细胞术分析黄连素对hepg2细胞细胞周期的影响

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1、毕业论文题目:流式细胞术分析黄连素对HepG2细胞细胞周期的影响学院:生命科学学院专业:生物技术毕业年限:2012年学生姓名:刘秉焱学号:200874020129指导教师:刘国安教授-18-流式细胞术分析黄连素对HepG2细胞细胞周期的影响刘秉焱指导教师:刘国安(教授)(西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州730070)摘要:目的研究黄连素对HepG2肝癌细胞细胞周期的影响。方法用PI对黄连素处理的肝癌细胞HepG2进行染色,用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果黄连素作用于HepG2细胞时,可将细胞周期阻滞在G2/M期,并且有“亚G1期”细胞的出现;抗氧化剂N-乙酰-L-半胱

2、氨酸(N-acetyl-L-cystein,NAC)降低了黄连素诱导HepG2细胞的凋亡率。结论黄连素可以诱导HepG2细胞发生凋亡,较高浓度的黄连素可以将HepG2细胞细胞周期阻滞在G2/M期,NAC可以降低黄连素诱导的细胞凋亡率,黄连素对细胞的毒性作用可能是通过氧化胁迫引起的。关键词:流式细胞术;HepG2细胞;黄连素;细胞周期;细胞凋亡AflowcytometrystudyofTheeffectofberberineoncellcycleinHepG2cellLIUBing-YanTutor:LIUGuo-an(Professor)Abstract:objective

3、Tostudytheeffectedofberberineoncellcycle.MethodsPIwasusedtodyethehepatocarcinomacelldisposedbyberberine.Thechangeofcellcycleweredetectedbyflowcytometry.resultsAsdisposedbyberberine,thecellcyclewerearrestedinG2/M.Thereisanapoptoticpeakappeared.N-acetyl-L-cysteinreducetheapoptosisofHepG2indu

4、cedbyberberine.ConclusionBerberinecaninhibitproliferationofHepG2byarrestingcellinG2/Mandinducingapoptosis.NACcouldreducetherateofcellapoptosisinducedbyberberine.Thetoxiceffectsoncellsofberberinemaybecausedbythestressofoxidation.Keywords:Flowcytometry;HepG2cell;Berberine;Cellcycle;Cellapopt

5、osis-18-肝癌是一种世界上最常见的恶性肿瘤之一,在我国占居民恶性肿瘤死亡的第二位。全世界每年新发肝癌约26万例,占全部恶性肿瘤的4.0%,而42.5%的肝癌分布在中国,中国肝癌死亡率为20.4/10万,占全部恶性肿瘤死亡的18.8%[1]。由于肝癌起病比较隐匿,一经确诊往往已属晚期,故只能进行姑息性切除或放、化疗。疗效也不理想。因此,临床上肝癌病人急需特异性的、有效的新型抗癌方法。肿瘤发生的原因是相当复杂的,其中一个重要原因可能是细胞凋亡的趋势减弱[2]。因些,促进肿瘤细胞凋亡,纠正失衡的机体内环境,是抗肿瘤的一个重要方法。然而,细胞的凋亡受到很多种蛋白质分子调控,这

6、些蛋白质大致可分为促凋亡和凋亡抑制两种蛋白。人体内的细胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡则是病理性的。有关细胞死亡过程的研究,近年来已成为生物学、医学研究的一个热点。细胞的死亡至少有两种方式,即细胞坏死与细胞凋亡。细胞坏死是早已被认识到的一种细胞死亡方式,而细胞凋亡则是近年逐渐被认识的一种细胞死亡方式。细胞凋亡是细胞的一种基本生物象,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型,而且具有复杂的分子生物学机制以及重要的生物学意义。1965年澳大利亚科学家发

7、现,结扎鼠门静脉后,电镜观察到肝实质组织中有一些散在的死亡细胞,它们的溶酶体并未被破坏,显然不同于细胞坏死。这些细胞体积收缩、染色质凝集、从其周围的组织中脱落并被吞噬细胞吞噬,机体无炎症反应。1972年Kerr等三位科学家首次提出了细胞凋亡的概念,宣告了对细胞凋亡的真正探索的开始。在此之前,关于胚胎发育生物学、免疫系统的研究,肝细胞死亡的研究都为这一概念的提出奠定了基础。形态学观察发现细胞凋亡的变化是多阶段的[3]。细胞凋亡往往涉及单个细胞,即便是一小部分细胞也是非同步发生的。首先出现的是细胞体积缩小,连接消失,与

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