DB13-T 5159-2019 辣椒红中反式辣椒红素含量的测定

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1、ICS67X04DB13河北省地方标准DB13/T5159—2019辣椒红中反式辣椒红素含量的测定2019-12-27发布2020-01-28实施河北省市场监督管理局发布DB13/T5159—2019前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由邯郸市市场监督管理局提出。本标准起草单位：晨光生物科技集团股份有限公司、河北省食品检验研究院。本标准主要起草人：杨清山、王红、陶晓青、张兰天、刘亚玲、李挥、季邵东、周丽、石文杰。IDB13/T5159—2019辣椒红中反式辣椒红素含量的测定1范围本标准规定了辣椒红中反式辣椒红素的高效液相色谱测定方法。本标准适用于辣椒红

2、中反式辣椒红素的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。3原理反式辣椒红素是辣椒红的主要成分，属于类胡萝卜素类，其在辣椒红中的天然存在状态是反式辣椒红素酯。反式辣椒红素酯经过碱液皂化后，均转化为游离的反式辣椒红素。使用紫外-可见分光光度法测得辣椒红中的总类胡萝卜素含量，再使用高效液相色谱法测得反式辣椒红素在液相图谱中的面积归一化比例，以总类胡萝卜素含量乘以反式辣椒红素比例得到反式辣椒红素含量。4

3、试剂或材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。4.1试剂a)正己烷（C6H14）：色谱纯；b)甲醇（CH4O）；c)无水乙醇（C2H6O）；d)甲苯（C7H8）；e)丙酮（C3H6O）：色谱纯；f)乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯；g)氢氧化钾（KOH）；h)无水硫酸钠（Na2SO4）。4.2试剂配制4.2.1萃取剂（HEAT）：将正己烷、无水乙醇、丙酮、甲苯按10:6:7:7的体积比例混合摇匀。4.2.240%氢氧化钾—甲醇溶液（m/v）：取氢氧化钾40g（精确至0.1g）于250mL烧杯中，加入约10mL水迅速用玻璃棒搅拌溶解后，加入

4、甲醇50mL，搅拌至澄清，移入100mL容量瓶中，用甲醇定容、摇匀静置待用。其应为无色透明液。1DB13/T5159—20194.2.310%无水硫酸钠溶液（m/v）：称量无水硫酸钠100g（精确至0.1g）于500mL烧杯中，加水溶解后转移到1000mL容量瓶定容。4.3对照品辣椒红素：（CAS:465-42-9）：对照品，纯度≥90%。4.4标准溶液配制辣椒红素对照品溶液：将适量对照品溶解至25mL正己烷中，用作峰位置定性使用，置于-20℃冰箱保存，有效期1年。5仪器和设备a)高效液相色谱仪（配备紫外检测器或其他等效检测器）；b)紫外-可见分光光度计；c)电子天平：感量为

5、0.1g和0.01mg；d)恒温水浴锅。6试验步骤6.1样品液制备称取0.15g（精确至0.1mg）样品置于50mL容量瓶中，用HEAT定容，摇匀后放在暗处静置10