辣椒中辣椒红素的分离及其含量测定

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1、中国食物与营养2010年第08期FoodandNutritioninChinaNo．08，2010辣椒中辣椒红素的分离及其含量测定韩晓岚，胡云峰’，赵学志。，何洪巨(天津科技大学食品工程与生物技术学院，天津~00457；。国家蔬菜工程技术研究中心，北京100097)摘要：目的：研究辣椒中辣椒红素的分离和含量测定方法。方法：采用高效液相色谱进行分离，并鉴定其成分及含量。色谱条件：Inerl；silOD-5色谱柱(4．6X250mm，5m)，流动相：甲醇一二氯甲烷，流速：1ml／min，检测波长：4

2、74nm，柱温：5O℃，进样量：10l。结果：对辣椒红素提取液进行分离工艺探索，根据它的物理、化学特性对K0H用量、乙醚用量和静置时间进行了研究，经过二次旋转回归试验优化结合响应面分析，得出最高纯度和最优条件组合：K0H用量为5．59ml，乙醚用量为15．574ml，静置时间为2．54h，分离后的样品纯度由2．8％提高到17．2％，提高了6．14倍。结论：本研究在HPLC快速测定辣椒中辣椒红素中具有使用价值。关键词：辣椒红素；分离；高效液相色谱；响应面分析有机溶剂浸提出来的辣椒红色素粗品中，含有

3、辣型离心机，上海安亭科学仪器厂；BS210S型赛多利斯椒素、蛋白质、脂肪、单宁酸、恶臭物质等，因此，电子分析天平，德国Sartorius公司；DIKE型电子恒温必须对粗品进行精制，特别是要去除辣味和臭味。辣水浴锅，北京市光明医疗仪器厂。椒素类物质由14种以上的辣椒素同系物组成，其中，1．2实验方法辣椒素和二氢辣椒素约占90％以上。辣椒素的化学名1．2．1色谱条件色谱柱：InertsilOD-3，4．6X250I1邶，称为8。甲基．6一癸稀香草基胺，分子中既有酰胺键，5／~m，不锈钢柱；流动相：A

4、一甲醇，B一二氯甲烷；流又有酚羟基。酰胺在碱作用下水解成无辣味物质，酚速为lml／min；进样量：11；室温：(28士2)℃；色羟基在微弱电离下与NaOH发生成盐作用，分成两相谱柱温度：30~C；检测波长：474mm，以峰面积外标促进了辣素和色素的分离。法定量。1．2．2辣椒红素分离工艺准确称取0．2g样品粉末1材料与方法一加入丙酮4ml一35℃下超声波提取25min~收集提1．1材料与仪器设备取液3500r／min的条件下离心l0min一将上清液倒入干红辣椒，中国农业科学院提供；辣椒红素标分液

5、漏斗一加入KOH和甲醇的混合液，其中KOH含样，CHROMADEXINC．公司，纯度93．3％；甲醇量为5％一静置皂化一加入乙醚一加入10％NaC1一静(色谱级)，Dikmatechnologies；丙酮(分析级)，北置，待下部分溶液呈无色，分液明显一去除下部分京化学试剂公司；二氯甲烷(分析级)，北京化学试无色溶液一用NaC1溶液冲洗几次一将溶液倒人放有剂公司；乙醚(分析级)，北京化学试剂公司；KOH无水NaSO的漏斗中一乙醚冲洗几次，待被染红的(分析级)，北京化学试剂公司；NaC1(分析级)，

6、无水NaSO重新变回白色一将滤液倒入梨形瓶一减北京化学试剂公司。压真空干燥一用丙酮溶解干燥物一将干燥物溶液定容DGU．20A型高效液相色谱仪[包括LC-20AD10ml一12000r／min条件下离L,30mln--,进行HPLC检测泵，SIL一20A自动进样器，CTO一20A注温箱，SPD一20A并进行纯度计算。二极管阵列检测器，CBM一20A控制器，色谱柱C。(2502结果与讨论mm×4．6mm，5m)】，日本岛津公司；SineSonic150型超声波洗净机，神明台工业株式会社；TDL一40

7、B2．1分离方法的单因素试验基金项目：云南科技合作项目(2~6FY110708—2)。作者简介：韩晓岚(1984～)，女，硕士研究生，研究方向为农产品加工及贮藏。通讯作者：何洪巨韩晓岚等：辣椒中辣椒红素的分离及其含量测定51单因素试验得出因素最佳条件为：KOH为5ml，因素，分别以x、x和x代表，每一个自变量的低、乙醚用量达~lJ20ml，静置时间为3h。中、高试验水平分别以一1、0、1进行编码，根据相应2．2二次正交旋转回归试验结果及方差分析的试验表进行试验后，对数据进行二次回归拟合，得2．2

8、．1响应面分析方案本实验采用Box—Behnken设到包括一次项、二次项、交互项的二次方程，分析各计作进一步优化。综合单因素试验结果，选取KOH用因素的主效应和交互效应，最后在一定水平范围内求量、乙醚用量和分离时间对辣椒红素纯度影响的三个取最佳值，试验方案及结果见表1隅～10]o表1三因子二次正交旋转回归设计方案及结果2．2．2模型方程的建立根据试验结果建立的数学模式中：Y为辣椒红素纯度，％；x。为KOH用量，型为：m1；x为乙醚用量，ml；x，为静置时间，h。Y=25．09+2．37Xl+0．