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时间：2021-11-16
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1、水中细菌总数的测定实验目的学习水样的采取方法和水样细菌总数的测定方法了解平板菌落计数的原则应用平板菌落计数法测定水中细菌总数由于水中细菌种类繁多，对营养和生长条件要求差别很大，很难找到一种培养基在一种条件下适合所有细菌生长繁殖。因此，以一定的平板生长出来的菌落计算出的水中细菌总数仅是一个近似值。目前常用牛肉膏蛋白胨培养基。实验原理实验器材培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基仪器及其它用具：灭菌三角烧瓶、灭菌培养皿、灭菌吸管、灭菌试管、灭菌具塞玻璃瓶实验步骤水样的采取自来水：先将自来水龙头用火焰灼烧3min，再开放水龙
2、头水流5min，以灭菌三角烧瓶接取水样。池水、河水或湖水：取距水面10-15cm的深层水样，将具塞玻璃瓶瓶口向下浸入水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，盛满后将瓶塞盖好再从水中取出。细菌总数测定：自来水：①用灭菌吸管吸取1mL水样，注入灭菌培养皿中（2个）②倾注约15mL已溶化并冷却到45℃左右的培养基，使二者充分混合均匀③制作空白对照组④培养基凝固后培养并计数池水、河水或湖水等：①稀释水样②从最后3个稀释度的试管中各吸取1mL稀释水，注入灭菌培养皿中（6个）③倾注约15mL已溶化并冷却到45℃左右的牛肉膏蛋白胨琼
3、脂培养基，使二者充分混合均匀④培养基凝固后培养并计数菌落计数计算平均菌落数①当只有1个稀释度的平均菌落数在30-300之间时，以该平均菌落数×稀释倍数②当有2个稀释度的平均菌落数在30-300之间时，按二者菌落总数的比值决定③若所用稀释度的平均菌落数均>300，按稀释度最高的平均菌落数×稀释倍数④若所用稀释度的平均菌落数均<30，按稀释度最低的平均菌落数×稀释倍数⑤若所用稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，选最接近30-300的平均菌落数×稀释倍数
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