溶血素论文：溶血素 llo 单增李斯特菌 李斯特菌 单克隆抗体

《溶血素论文：溶血素 llo 单增李斯特菌 李斯特菌 单克隆抗体》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、溶血素论文：单增李斯特菌溶血素基因的原核表达及其单克隆抗体的制备【中文摘要】hly是编码单增李斯特菌特有的溶血素蛋白LLO的基因,克隆hly表达LLO蛋白并制备单增李斯特菌特异性的单克隆抗体,为单增李斯特菌特异性检测方法的建立奠定基础。方法：以单增李斯特菌的DNA为模板,通过PCR扩增出hly基因,与PET28a(+)原核表达载体连接,经测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21,并诱导表达。经表达条件优化,大量诱导表达,用镍柱纯化。通过SDS-PAGE和westernblotting鉴定表达的蛋白,通过溶血试验鉴定其溶血活性。用纯

2、化的表达产物免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术制备抗LLO的单克隆抗体,通过间接ELISA鉴定其亚型。单克隆抗体叠加实验分析不同单克隆抗体组合的配对效果。溶血抑制实验鉴定单抗克隆抗体能否抑制LLO的溶血活性。间接ELISA检测单克隆抗体与威尔斯李斯特菌、英诺克李斯特菌、格氏李斯特菌的交叉性。结果：原核表达出58KD的溶血素蛋白,其序列与GeneBank公布的序列有99%的同源性。其最优化的表达条件是28℃下用0.1mmol/LIPTG诱导6h。。溶血实验表明重组表达的LLO具有较强的溶血活性。总共获得13株单克隆抗体,4

3、株为IgGl亚...【英文摘要】s:ToprokaryoticexpresshlygenefromListeriamonocytogenesandpreparespecificmonoclonalantibodyagainstListeriamonocytogenesandmakeabasisfortheestablishmentofspecificdetectionmethodsforListeriamonocytogenes.Methods:ThehlygenewasamplifiedbyPCRaccordingthe

4、templeteofLMDNAandwasconstructedintoprokaryoticexoressionvectorPET28a(+).TherecombinantwastransformedintoE.coliBL21andexpressedoptimally.Theprokaryoticexpressionproductwaspurifiedbynic...【关键词】溶血素LLO单增李斯特菌李斯特菌单克隆抗体【英文关键词】listeriolysinOLLOListeriamonocytogenesLister

5、iamonoclonalantibody【索购全文】联系Q1：138113721Q2：139938848同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务【目录】单增李斯特菌溶血素基因的原核表达及其单克隆抗体的制备摘要4-5Abstract5目录6-71绪论7-181.1单增李斯特菌的生物学特性7-81.2单增李斯特菌在食品中的污染现状81.3单增李斯特菌的致病机理8-91.4单增李斯特菌的相关毒力因子9-121.5单增李斯特菌的检测技术12-161.6本研究的目的、意义16-171.7技术路线17-182材料与方法18-252.1

6、材料18-192.2单增李斯特菌溶血素基因的原核表达19-212.3抗LLO单克隆抗体的制备21-253结果25-364结论36-375讨论37-38参考文献38-45在读期间发表论文和学术交流情况45-47致谢47