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1、洗板机校准方法及不确定度评定洗板机是用于清洗酶标板中残留溶液的仪器,洗板机酶标板是否清洗干净是决定酶标分析仪检测结果是否正确的关键因素之一。 1 校准方法 1·1 校准条件 环境温度20±5℃,相对湿度不大于85%。室内温度变化不能大于1℃/h,水温与室温之差不应超过2℃。 1·2 校准用标准物质 纯水(蒸馏水或去离子水)。 1·3 校准设备 分度值为0·1mg的天平,分度值为0·1℃的水银温度计。 1·3 校准方法 (1)水温测定 首先将洗涤液全部换为蒸馏
2、水或去离子水,将分度值为0·1℃的水银温度计插入蒸馏水或去离子水中,待温度计示值稳定5min后测定蒸馏水或去离子水的温度。 (2)空杯质量 选用1排(每排12个杯)干净的酶标杯放入天平中称量,得到空杯质量M0。 (3)清洗 把该酶标杯放入酶标空板中,开启洗板机用蒸馏水或去离子水对酶标杯进行清洗。 (4)清洗后每杯残留量 把清洗后的酶标杯放入天平中进行称量,得到清洗后的酶标杯M1。则清洗后每杯的残留量M2按下式计算:M2=(M1-M0)/12其中:M2—清洗后每杯的残留质量(
3、mg);M1—清洗后12个杯的质量(mg);M0—清洗前12个空杯质量(mg)。 (5)清洗后每杯残留体积 酶标板清洗后每杯的残留体积按下式计算V=M2/ρw其中:V—清洗后每杯的残留体积(μL);M2—清洗后每杯残留质量(mg);ρW—测定温度下纯水密度值(mg/μL)。 2 数学模型V=(M1-M0)/(ρW×12)(1)由于纯水的密度在常温下变化不大,以水温20·0℃时纯水的密度为0·998203g/mL为例来进行评定,式(1)可简化为:V=(M1-M0)/11·978(2)灵敏
4、度系数为:C1=VM1=111·978C2=VM0=-111·978标准不确定度:u1=
5、C1
6、u(M1)u2=
7、C2
8、u(M2) 3 输入量的标准不确定度的评定 不确定的主要的来源包括称量过程中引入的不确定和测量重复性引入的不确定。 3·1 称量过程中引入的不确定度 称量过程中引入的不确定度主要为电子天平的不确定度引起的测量体积的不确定度,采用B类方法进行评定。电子天平不确定度的由检定证书给出,其扩展不确定度为0·4mg,包含因子k=2,则其标准不确定度为:u(Mi)=0·2mg
9、。u1=
10、C1
11、u(M1)=111·978×0·2=0·017μLu2=
12、C2
13、u(M2)=111·978×0·2=0·017μL另外估计自由度v1=v2=50。由电子天平不确定度引入的测量体积不确定度为:ucB=u21+u22=0·0172+0·0172=0·024μL合成标准不确定度的有效自由度:veffB=0·02440·017450+0·017450=99 (3)传播率公式 由上式和各量关系可知其标准不确定度:uΔt=u2ti+u2t0=2ut 3.3各项不确定度分析 (1
14、)电测设备误差引入的标准不确定度为:u1=2·2·6mK2·33K=0·05%输入模拟温度信号,经多用数字表校准,所引起的不确定度 (2)流量信号发生器不确定度:u2=0 (3)热系数查表误差:u3=0·1%3=0·058% (4)测量时的接触电阻及导线电阻影响:u4=232mΩ100Ω=0·002% (5)被检热能表分辨力产生的引入的不确定度检定时,热量表的热能变化量至少为500个数字,所以引入不确定度为0·2%,矩形分布μ5=0·2%3=0·12% 3·4 不确定度汇总:通
15、过以上分析,将各分量列于表5。 3·5 合成现对不确定度: (1)合成相对不确定度为uc=0·05% (2)有效自由度veff=(0·05)40·054/∞+0·0584/∞+0·0024/∞+0·124/∞=∞3·6 扩展不确定度的评定:取置信概率p=95%,有效自由度veff取∞,查t分布表得k95=t95(∞)=1·960所以扩展不确定度UE95rel=1·960*2(u2t1+u2t3+u2t4+u2t5=0·28%p=95% 3·7 热能表计算器示值误差的测量不确定度结果
16、的报告热能表计算器示值误差的扩展不确定度UE95rel=0·28%,veff=∞。