在无血清培养基中代谢副产物对杂交瘤细胞生长代谢的影响__氨的作用

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1、在无血清培养基中代谢副产物对杂交瘤细胞生长代谢的影响__氨的作用中国生物制品学杂志2以犯年第巧卷第2期伽nJBioI0gi因:2002，vol.巧.No.2在无血清培养基中代谢副产物对杂交瘤细胞生长代谢的影响:亚.氨的作用‘张立金亦辉张元兴杆(华东理工大学生物反应器工程国家重.点实验室，上海200237)【摘要】目的在无血清培养基中，研究氨对杂交瘤细胞生长代谢的影响。方法在培养基中添加不同浓度的氨，考察细胞生长和代谢及单抗生成的变化。结果添加0.8~UL的氨时就对细胞生长和代谢有影响，当氨浓度达4~FL时，对细胞的生长代谢有明显

2、的抑制，当培养基中氨浓度高于6n咖UL时，细胞生长停止，代谢受到严重影响。氨的添加降低了培养上清中的单抗浓度，但提高了单抗的比生产速率。结论氨对细胞生长和代谢有较大的影响，对单抗浓度的影响主要由细胞密度降低造成，单抗的比生产速率增加。【关键词I杂交瘤细胞细胞培养氨无血清培养IllnuenceofBy甲roduct(Ammoula)ins~一介代M州五ulnonGrowthandN几妞bolismofHybrido“IaCellsZHANGU，」诩Yihui，乙翻八CYu~g(S效衍无妙肠加m勿叮ofB勿决泊乙如r及娇neeri咭

3、，云岛￡chinaUn~i-tyof反icoand不兑h肋及哟户，品ar妙。12的237)【AbS往，ct】objectiveToobsery。theinllu~ofby一p攻duct(~a)inse~一freemediulnonthegrowtllandmet放dismofhybridornacells.Meth侧如Addthe~aatvariousconcentrationsandob-s~the脚wthandlne倒比lismofhybridomac必andthep初uctionofMeAbs.ResulisThe脚Wth

4、and服倒比lismofhybridolnacells~i心uencedafter耐y0.8~l/Lof一a~addedin.The~iaata~ntlationof4~ULshowedsi孚lificantinhibitingeffectonthe，wthandmetabolismofh必ridomacells.Wllentheconcentmtlon~hedal刀ve6~llL，thegrowth~stop户妇，andthemetal刃lism~alsoi祖uencedseriously.A」o嗯withtheadditio

5、nofannnonia，theeoneentlationOfMeAbinculturesupema切叮twasdec~ed，however，thespecificp代duetionrateofit~inc~d.(匀nclusion为兀noniashowedsign饭cantinll~eonthe脚wthandme回阮lismofhybridomaceUs，朋dtheinlluenceofitonMc灿c~n如tion~n面心caused场thedec~ofcelldensity.[K盯和n如]HybridomaCeueeu。以姗

6、Ammo]山aSeIUIn一触ecul姗氨对杂交瘤细胞生长和代谢有较强的抑制作用[lJ。动物细胞培养上清中的氨主要是谷氨酞胺等氨基酸脱氨产生的。在细胞培养中，细胞的谷氨酞胺消耗比其他氨基酸消耗的总和还多，80%一90%的氨是由谷氨酸胺代谢产生的。氨的积累使细胞内UDP氨基己糖增加，影响细胞的生长及蛋白的糖基化过程。氨抑制谷氨酸胺代谢途径，使天冬氨酸和谷氨酸的消耗增加，影响细胞的氨基酸代谢。同时氨浓度的提高，改变了细胞内局部微环境的声，影响了细胞的正常生理功能[2，3】。本文通过WU竹杂交瘤细胞在不同氨浓度下的无血清培养，研究了不

7、同氨浓度对细胞生长代谢的影响。材料与方法1.细胞株WU竹杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞NSI和经免疫的B月』/c小鼠的脾细胞融合而成，分泌抗人T淋巴细胞cD3抗原的I暇.单克隆抗体。该细胞由武汉生物制品研究所建株并提供。国家九五重点攻关项目(95一健一仍一05)通讯作者。中国生物制品学杂志2田2年第巧卷第2期咖nJBiol哈回，2(X)2，Vol.巧.No·2斌斌尧尧二‘三葱飞匕户su‘。一一。︺三q.一奋Time(h)图1氨浓度对细胞生长的影响ng1.1团uen‘e优曰团.艾旧.目圃住灿佣W川I3c目l『ow山inserunl一n犯e

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