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时间:2018-01-21
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1、甘露糖处理对康乃馨切花花瓣衰老的影响1前言鲜切花是花卉产业的重要组成部分,采后保鲜是鲜切花产业发展面临的关键性技术问题。为使鲜花持久展示其诱人的色泽和美丽,必须对其进行保鲜处理。目前鲜花保鲜技术是制约花卉市场发展的瓶颈所在,对其进行研究是提高花卉市场中鲜花的品质和市场竞争力的关键。鲜花保鲜是一个潜在的市场,通过保鲜处理的鲜花,品质也可以得到相应的改善和提高,可以保持长时间的挺直新鲜[1]。随着花卉市场的不断发展,鲜花保鲜技术必然成为一个长期存在而又必需的部份,同时也将推动中国鲜切花市场的发展。到目前为止,国内外不少学者对鲜切花衰老机理进行了多方
2、面的研究,各种物理、化学、生物等不同的保鲜技术也应用于实际的生产流通贮藏当中。物理保鲜方法主要有低温贮藏、减压贮藏、气调贮藏、辐照处理等。化学保鲜是现代保鲜技术中普遍采用的技术。目前应用的化学保鲜类试剂主要有杀菌剂、无机盐、乙烯抑制剂、植物生长调节剂等。由于化学保鲜法存在重金属和化学污染等问题,因此生物保鲜技术的发展就受到人们的期待。目前主要应用的技术有壳聚糖护色保鲜、糖类保鲜法、竹醋液保鲜法等。生物保鲜法是近年来新发展起来的最具有前景的保鲜方法[2]。随着生物保鲜法研究的逐渐深入,各类生理物质的保鲜研究不断有报道,而甘露糖切花保鲜的研究报道却
3、甚少。甘露糖能够抑制植物代谢的作用已得到充分证实,并且具有延迟果实后熟等作用[3~4],同时也是某些植物转基因安全筛选体系的筛选剂[5~8],因此推测甘露糖对鲜花应具有保鲜作用,在找出最佳保鲜效果的甘露糖浓度的基础上,本研究跟踪测定在该浓度下鲜切花花瓣的生理生化指标变化,以确定甘露糖预处理在切花衰老过程中是否具有保鲜作用。2材料与方法2.1材料大红色康乃馨,统一从广州市岭南花卉批发市场购买,选取含苞待放、花色、大小结实一致的单头花蕾。2.2试验设计8配制浓度各为3%、5%、10%的甘露糖溶液,将康乃馨花枝剪成15cm长,之后插入上述溶液中进行常
4、温脉冲处理,对照为去离子水处理。两处理花朵数为19枝,时间为16h。脉冲处理结束后,切取花茎长度为4cm的康乃馨花枝,置于去离子水中瓶插。从切花瓶插之日起,观察花朵萎蔫情况,并每隔1d定时用游标卡尺记录花朵最大直径(简称花径)。从形态观测结果得出能延缓切花衰老的最适甘露糖溶液浓度。用该浓度的甘露糖溶液对康乃馨切花进行脉冲处理及瓶插试验(两处理花朵数各为63朵),方法同上。观察期内,用温度计分别定时测量室温和水温,保持环境的一致性。每隔2d进行各生理生化指标的测量,每个处理进行3次重复即测量3朵花,结果取平均值。2.3测定指标2.3.1瓶插寿命计
5、算保鲜天数,从瓶插开始,每天观察外部形态指标,当花失水萎蔫或发生“垂头”现象,即作为瓶插寿命结束的标志。2.3.2可溶性蛋白含量的测定用考马斯亮蓝G-250法[9]测定蛋白质含量。称取花瓣0.5g放入研钵中,加入2ml蒸馏水和少许石英砂研磨,磨成匀浆后用6ml蒸馏水分次洗涤研钵,洗涤液收集在同一离心管中,在4000r·min-1下离心10min,弃去沉淀,上清液转入容量瓶,以蒸馏水定容至10ml,摇匀后待测。吸取样品提取液0.1ml,放入具塞刻度试管中(设两个重复管),加入5ml考马斯亮蓝G-520试剂,充分混合,放置2min后,在595nm下
6、比色,记录吸光度值,通过标准曲线查得蛋白质浓度(μg·ml-1),以蒸馏水做空白。结果计算:样品蛋白质含量(μg·g-1鲜重)=C×V/W式中,C为查标准曲线所得每管蛋白质浓度,μg·ml-1;V为提取液总体积,ml;W为样品质量,g。2.3.3丙二醛含量的测定用硫代巴比妥(TBA)法[9]。取0.5g花瓣样品,加5%TCA(三氯乙酸)5ml,研磨后所得匀浆在3000r·min-1下离心10min,上清液备用。吸取1.5mlMDA8提取液于刻度试管中,加入2.5ml0.5%巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液,于沸水浴上加热10~15min,迅速冷却。于
7、1800g离心10min。取上清液于532nm、600nm波长下测定光密度,以蒸馏水调零。结果计算:丙二醛含量(nmol·g-1)=(OD532-OD600)×A×V/a1.55×10-1×W式中,A为反应液总量,(4ml);V为提取液总量,(5ml);a为测定用提取液量,(1.5ml);W为材料重,g;1.55×10-1为丙二醛微摩尔吸光系数。2.3.4细胞膜透性的测定用电导法[9]测定花瓣细胞膜透性。用直径1cm打孔器取样,为了减少伤口处物质外流的影响,需将花瓣小圆片用去离子水充分冲洗后再用滤纸吸干外附水备用。用天平准确称取0.5g的花瓣小
8、圆片对应放入已编号的三角瓶中,加入30ml的去离子水,在振荡器上浸泡2h后,测定电导值。将测过电导率的各三角瓶(浸泡液及材料)放入沸水中煮沸10min
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