000001b9_王晓鹏-应用药理

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1、酸浆果多糖对小鼠体液免疫的影响（王晓鹏[注王晓鹏，北京理工大学生命学院药理学硕士主要研究方向为免疫药理学]，李岩[注李岩，北京理工大学生命学院教授主要研究方向为肿瘤免疫药理学]）摘要：目的:探讨在不同免疫状态下,酸浆果多糖(SJDT)对小鼠体液免疫的调节作用。方法：采用绵羊红细胞(SRBC)诱导小鼠产生SRBC抗体模型及环磷酰胺(Cy)诱导小鼠免疫增强和抑制模型。小鼠连续灌胃SJDT7d。采用MTT法检测脂多糖(LPS)诱导的小鼠胸腺B淋巴细胞增殖,分光光度法测小鼠血清半数溶血值(HC50)和小鼠脾

2、细胞IgM抗体生成水平。结果:SJDT(400mg·kg-1)灌胃给药7d能提高正常小鼠的胸腺指数、脾脏指数、血清HC50和脾脏B细胞增殖,SJDT(200,400mg·kg-1)对Cy(150mg·kg-1)诱导的免疫低下小鼠的胸腺指数、脾脏指数、血清HC50、脾脏B细胞增殖、脾细胞IgM水平具有明显的恢复作用,SJDT(400mg·kg-1)对Cy(250mg·kg-1)诱导的免疫亢进小鼠的胸腺指数、脾脏B细胞增殖和脾细胞IgM水平均有下调作用。结论:SQDG对小鼠体液免疫反应具有一定的双向调节

3、作用。关键词：酸浆多糖、体液免疫、双向调节近年来，传统中药和天然药物的研发取得较大进展，其活性成分如多糖都有良好的免疫调节作用，临床上应用中药治疗免疫失调型疾病取得相当疗效。酸浆果多糖是较为典型的植物多糖，目前已有报道[1]表明酸浆果多糖有一定的免疫调节作用。研究药物的免疫药理学作用时，多以病态模型进行研究。本实验采用SRBC诱导小鼠产生SRBC抗体模型及环磷酰胺(cyclophosphamide，Cy)诱导小鼠免疫增强和抑制模型。在抗原刺激前给小鼠腹腔注射Cy，可明显增强抗原抗体反应，可能是由于抑

4、制和消除了Ts细胞的前体，减少Ts细胞对免疫反应的负调节；在抗原刺激后注射，则主要抑制Th细胞，从而使抗原抗体反应降低。本实验研究SJDT对不同免疫状态下小鼠抗体生成的作用，探讨其体液免疫调节作用的部分机制。材料与方法1.实验材料1.1.实验动物昆明小鼠，雄性，8周龄，18-22g，北京大学医学部实验动物科学部提供，许可证号：SCXK(京)2006-0008，先在动物房适应性培养3天后分组实验。1.2.药品与主要试剂SJDT：酸浆果多糖，有北京理工大学生命学院药理实验室提取，实验前用三蒸水配成该实验

5、所需剂量；无菌脱纤维绵羊血，由广州蕊特生物科技有限公司提供，用于实验前制备SRBC；豚鼠血清，元亨生物提供，用于制作补体；都氏液：碳酸氢钠1.0g，氰化钾0.05g，高铁氰化钾0.2g，蒸馏水加至1000mL；阿氏液：氯化钠0.420g，枸橼酸0.055g，构橼酸钠0.766g，葡萄糖2.05g，加水溶解并稀释至100mL，灭菌；环磷酰胺(cyclophosphamide，Cy)，江苏恒瑞医药股份有限公司；四氮基偶氮唑蓝（MTT），Sigma公司产品；胎牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司提供；D

6、MEM：Sigma公司DMEM培养粉，加NaHCO33.7g，三蒸水1L配成溶液，过滤除菌，用时溶液中加lⅹl05IU/L青霉素G，100mg/L链霉素，100g/L的胎牛血清；磷酸盐缓冲盐液(PBS)，将NaCl8.0g，KCl0.2g，KH2PO40.2g，Na2HPO4·12H202.5G，加三蒸水至1000ml，灭菌；.二甲基亚砜(dimethylsulfoxide，DMSO)，广东汕头市西陇化工厂。1.3.主要仪器SW-CJ-1D型单人净化工作台：苏州净化设备公司提供；CO2培养箱：德国H

7、eraeus公司；酶联免疫测定仪：国营华东电子管厂。1.实验方法1.1.SRBC模型的建立及Cy诱导的小鼠免疫低下及免疫亢进模型的建立[2]采用腹腔注射SRBC方法诱导小鼠产生SRBC抗体，致敏当天给于腹腔注射Cy(150mg•kg-1)建立免疫抑制模型，致敏前3d腹腔注射Cy(250mg•kg-1)建立免疫亢进模型。1.2.实验分组和给药方案实验分正常小鼠的SRBC模型、Cy诱导的小鼠免疫低下模型以及Cy诱导的小鼠免疫亢进模型。每大组小鼠随机分SRBC模型对照组、Cy诱导模型组、SJDT低、高2个

8、剂量组(200,400mg•kg-1)，免疫亢进组自注射Cy后d4起、免疫抑制组于致敏前2d开始灌胃，qd，连续7d，正常组、SRBC组和Cy组分别给予相同体积量的生理盐水灌胃。1.3.胸腺、脾脏指数的测定末次给药前称重，给药30min后脱颈处死，立即取出并称量脾脏、胸腺重量，计算其指数。分别以每10g小鼠的脾重(mg)和胸腺重(mg)作为胸腺指数和脾脏指数。计算公式如下：脾(胸腺)指数=脾(胸腺)重量(mg)／体重(10g)1.4.血清半数溶血值（HC50）的测定[