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时间:2021-05-13
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1、步骤总结斐林试剂苏丹Ⅲ橘黄色红色砖红色沉淀紫色苏丹Ⅳ双缩脲试剂鉴定物质试剂实验现象还原性糖脂肪蛋白质淀粉碘蓝色生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质和DNA的鉴定1、实验原理:还原性糖+斐林试剂→砖红色沉淀还原性糖:葡萄糖、麦芽糖、果糖非还原性糖:蔗糖、淀粉等+→2、配制斐林试剂:实验一:还原性糖的鉴定水浴加热实验一:脂肪的鉴定1、实验原理:脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色取少量脂肪样液,加入苏丹Ⅲ,震荡,可看到溶液呈了橘黄色,本实验我们用苏丹Ⅲ做染液。实验一:蛋白质的鉴定1、实验原理:蛋白质+双缩脲试剂→紫色络合物2、材料用具:豆浆、蛋清、牛奶都
2、是很好的实验材料。本实验我们用蛋清做实验材料,在用蛋清做实验材料时,要注意将蛋清稀释,如果稀释不够,反应后的产物会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底。问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液?作对照2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3~4滴而不能过量?过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久?时间太长,Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。深化实验——绿叶中色素的提取和分离实验原理:色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中实验关键点:1.选材时应
3、注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶等。2.画滤液细线时,应以细、直、颜色浓绿为标准,重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行,重复2-3次。3.层析时不要让滤液细线触及层析液。绿叶中的色素不止一种,他们都能溶解在层析液中。然而,它们在层析液中的溶解度不同;溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快;反之则慢。这样,几分钟之后绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。且溶解度最高的是胡萝卜素,它随层析液在滤纸上扩散的最快;叶黄素和叶绿素a的溶解度次之,叶绿素b的溶解度最低,扩散的最慢。实验总结(1)在研磨绿叶时,加入少许SiO2是为了研磨得充分
4、,加入少许的CaCO3是为了防止研磨过程中色素受到破坏,加入10ml无水乙醇是使色素溶解在其中,便于提取;(2)因无水乙醇和层析液都是易挥发且层析液是有一定毒性的有机溶剂,所以研磨要快,收集的滤液要用棉塞塞住,层析时要加盖,尽量减少有机溶剂的挥发。(3)用毛细吸管画滤液细线时,线条越细越直效果越好,重复划几次的目的是使滤液细线中含有较多的色素(4)如果层析液浸没了滤纸条上的滤液细线,滤纸条上就不会出现色素带,其原因是滤液细线中的色素溶解在了烧杯中的层析液中,会导致色素带不清晰,影响整个实验的效果。
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