GBT 23502-2009 食品中赭曲霉素A的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法

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1、ICS67.050X04'亻咖`中华人民共和国国家标准GB/T23502-¨2009食品中赭曲霉毒素A的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法DeterminationofochratoxinAinfood-Highperformanceliquidchromatographicmethodwithimmunoaffinitycolumnclean-up2009冖04-08发布2009-05-01勇≡臼色中华人民共和国国家质量监督检布中国国家标准化管理嗖墅溽异垦发中华人民共和国国家标准食品中赭曲霉毒素A的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法GB/T23

2、502-2009中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045www.spC.nCt.cn网址电话:685239姓668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销开本880×12301/16印张0.5字数8干字2009年4月第一版2009年4月第一次印刷书号:155066·⒈36949定价14.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533GB/T23502-2009亠刖口本标准的附录A为资料性附录。本标准由全国食品工业标准化技术委员会(SΛC/TC64)提出。本

3、标准由全国食品工业标准化技术委员会食品通用检测技术分技术委员会(SAC/TC64/SC8)归口。本标准起草单位:青岛市产品质量监督检验所、中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中检维康技术有限公司、青岛啤酒股份有限公司。本标准主要起草人:吴如军、鲍蕾、张辉珍、李惠颖、张鹏、余俊红、王雄。GB/T23502-2009食品中赭曲霉毒素A的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法1范围、本标准规定了食品中赭曲霉毒素Λ含量的免疫亲和层析净化高效液相色谱测定方法。{本标准适用于粮食和粮食制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品中赭曲霉毒素A含量的测定。本标准的方法检出限:

4、粮食和粮食制品的检出限为1.0ug/kg,酒类的检出限为0.1ug/kg,酱油、醋、酱及酱制品的检出限为0.5ug/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文仵,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-2008,IS03696:1987,MOD)3方法提要用提取液提取试样中的赭曲霉毒素Λ,经免疫亲

5、和柱净化后,用高效液相色谱荧光检测器测定,外

6、标法定量。4试剂和材料一除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682规定的级水。4.1甲醇:色谱纯。4.2乙腈:色谱纯。4.3冰乙酸:色谱纯。4.4提取液1:甲醇+水(80+⒛)。∶4.5提取液2:称取150g氯化钠、zOg碳酸氢钠溶于约950mL水中,加水定容至1L。4.6冲洗液:称取25g氯化钠、5g碳酸氢钠溶于约950mL水中,加水定容至1L。4.7真菌毒素清洗缓冲液:称取25.0g氯化钠、5.0g碳酸氢钠溶于水中,加人0.1mL吐温20,用水'稀释至1L。f4.8赭曲霉毒素A标准

7、品:纯度≥98%。/4.9赭曲霉毒素Λ标准储备液:准确称取一定量的赭曲霉毒素Λ标准品,用甲醇+乙腈(1+D溶解,-20℃配成0.1m酽mL的标准储备液,在保存,可使用3个月。4.10赭曲霉毒素Λ标准工作液:根据使用需要,准确吸取一定量的赭曲霉毒素A储备液,用流动相稀释,分别配成相当于1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、⒛ng/mI'、50ng/mL的标准工作液,4℃保存,可使用7d。4.l1赭曲霉毒素A免疫亲和柱。4.12玻璃纤维滤纸:直径11cm,孔径1.5um,无荧光特性。5仪器和设备5.1天0.001g。平:感量1GB/T23502

8、—ˉ20095.2高效液相色谱仪:配有荧光检测器。5,3均质器:转速大于10000r/min。5.4高速万能粉碎机:转速10000r/min。5.5玻璃注射器:10mL。5.6试验筛:1mm孔径。5.7空气压力泵。5.8超声波发生器:功率大于180W。6分析步骤6.1试样的制备与提取6.1.1粮食和粮食制品:将样品研磨,硬质的粮食等用高速万能粉碎机磨细并通过试验筛(5.6),不要磨成粉末。称取20g(精确到0,01g)磨碎的试样于100mL容量瓶中,加人5g氯化钠,用提取液1(4.4)定容至刻度,混匀,转移至均质杯中,高速搅拌提取2min。定量滤

9、纸过滤,移取10.0mL滤液于50mL容量瓶中,加水定容至刻度,混匀,用玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清,收集滤液A于干净的容器中。6.1.2

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