最新现代分离技术——天然活性成分的层析纯化策略课件PPT.ppt

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1、现代分离技术——天然活性成分的层析纯化策略层析方法:正相硅胶优点:经济、可常压操作、加压可提高效率局限性:不可逆吸附、使用大量有害有机溶剂、国产硅胶验证文件不健全2层析方法:反相硅胶优点:常用于检测、少量制备,有硅胶基架的C4,C8,C18以及聚苯乙烯基架的SOURCE介质多种选择,分辨率高。局限性:成本高,介质昂贵、放大生产困难3层析方法:葡聚糖凝胶优点:适合含羟基、氨基、羧基、芳香环的苷类、黄酮、多酚、丹宁等。可多次使用局限性:流速慢,比硅胶更适合亲水性物质,可与硅胶为互补技术。7层析方法:离子交换优点:适合生物碱、有机酸

2、等的分离。有些阴离子交换介质也适合苷类、皂苷、黄酮纯化,可多次使用局限性:受制于带电荷物质8纯化平台:生物碱平台技术:〈PH3的酸水提取—阳离子交换SPSepharoseHP—中、高压硅胶反相生物碱带碱性,在传统的硅胶或氧化铝层析上效果往往不理想。SPSepharoseHP载量高、易于直接放大,对生物碱有特殊的选择性,可从酸水粗提物中分离结构近似的十几种生物碱,一步纯化可达60-80%的纯度。9纯化平台:生物碱中、高压反相层析如Source15RPC或C18硅胶可将纯度提高到90%以上。Source是以聚苯乙烯为基架的反相介质

3、,可耐受1M强酸强碱,比传统的如反相介质使用范围更宽广,寿命更长。10纯化平台:有机酸平台技术:〉PH11的碱水提取—阴离子交换QSepharoseHP或SephadexLH20—中、高压硅胶反相有机酸多成盐,亲水性强。带负电荷,经QSepharoseHP一步纯化可达50%纯度,然后再上SephadexLH20可至90%以上。11纯化平台:皂苷类平台技术:〉PH11的碱水提取—阴离子交换QSepharoseHP—中、高压硅胶反相皂苷同时具有强极性的糖基和弱极性的母核。皂苷含羧基12纯化平台:黄酮苷类平台技术:水和醇提取—阴离子

4、交换QSepharoseFF去色素—SephadexLH20—中、高压硅胶反相QSepharoseFF是去处植物色素的有效方法,可对提取物进行第一步纯化,SephadexLH20适合精细纯化13纯化平台:黄酮、醌、多酚类平台技术:水和醇提取—SephadexLH20—中、高压硅胶反相SephadexLH2014纯化平台:内酯、萜类平台技术:水和醇提取—中、高压硅胶反相管道化的加压硅胶层析可在密闭的环境下操作,大大提高生产速度、重复性、安全性、可控性。15纯化平台:蛋白质、活性肽、动物毒素平台技术:Sepharose离子交换;S

5、uperdex/Sephacryl分子筛层析—Source RPC反相层析蛋白类物质在纯化时需留意保持其空间结构,避免失活,所以一般采取温和的离子交换和分子筛层析,寡肽分子则可使用反相层析16纯化平台:多糖平台技术:水、醇提取—穿透式Sepharose离子交换脱蛋白—Superdex200/Sephacryl300-1000分子筛层析一种药材里可以含有多种类型的多糖,其结构、性质、功效不一。如香菇中含有水溶性、酸溶性、碱溶性多糖,综合利用分子筛及离子交换层析可进一步获得各组分纯品。多糖中的蛋白质可引起临床副反应,穿透式阴阳离子

6、交换法可以一、两步快速去除多糖中残存的蛋白质,易于放大和自动化17第七章病因与气血津液辨证第一节病因辨证六淫证候   饮食劳伤疫疠证候七情证候   外伤一、六淫证候六淫致病的特点:季节性、由外而侵犯人体、可以单独致病亦可结合致病三点。六淫包括:风、寒、暑、湿、燥、火六种邪气。(一)风淫证候致病特点:风性轻扬开泄,易犯高位和肌表;善行数变,具有发病急,变化快,游走不定和动风的表现;风为百病之长,常与其它病邪合并侵犯人体。临床表现:风邪犯表:发热,汗出,恶风,舌苔薄白,脉浮缓为主症。兼见头痛,鼻塞流涕,咳嗽。风郁皮肤:皮肤瘙痒,皮

7、疹或风团。风中经络:肢体麻木拘急,甚则痉挛抽搐,颈项强直,角弓反张,或口眼歪斜,半身不遂。风兼寒湿,流注关节:关节游走性疼痛。(二)寒淫证候致病特点:寒为阴邪,其性清冷,易伤阳气,出现寒冷现象;寒性凝滞,阻碍气血运行,出现疼痛寒性收引,出现筋脉拘挛收缩。(二)寒淫证候临床表现:寒邪束表:恶寒发热,头身疼痛,无汗,咳喘,苔薄白,脉浮紧。寒邪直中:腹痛肠鸣,呕吐泄泻。寒袭关节:关节冷痛,拘急不利。(三)暑淫证候致病特点:暑为阳邪,其性炎热,易耗气伤津,出现高热烦渴,身倦乏力;暑易伤心,出现心烦瞀乱,神昏不语暑多夹湿,出现胸脘满闷,

8、恶心纳呆头身困重。(三)暑淫证候临床表现:伤暑:身热汗出,口渴引饮,神疲乏力,小便短黄,舌红,脉虚数。中暑:壮热口渴,卒然昏倒,汗出不止,甚至昏迷惊厥,舌绛干燥,脉濡数。(四)湿淫证候致病特点:湿性重浊,出现头身困重;湿性粘滞,故发病缓慢,病后缠绵;阻遏气机,易伤脾胃,出现脘

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