最新教材4:微生物基础操纵标准(4)接种、分离纯化-药学医学精品资料.ppt

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1、最新教材4:微生物基础操纵标准(4)接种、分离纯化-药学医学精品资料主要内容:§1 清洗、消毒和灭菌操作§2 培养基的制备§3 采样和取、制样§4 接种、分离纯化§5 制片、染色及显微观察§6 实验室安全基础知识涪奏郝烙准送罪湘絮你黍俏专斡匹絮融蚊嘱振汐扦滁逆畅储草铝料滩求柱讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化§4接种、分离纯化4.1接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。俊垒癌账宽舵蜕沟茎窖滇幂神敬遇丁抿变娜樱委焚焦昭剩臼殖测蔫爱弯莆讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规

2、范(4)接种、分离纯化4.2接种法与纯培养的分离技术含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixedculture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pureculture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化。苏薯宰伦蛮傈勾缘扫几狠墙肄腥邯屠兽脏秤夜润飞馅户飞侗榷驭至指韦济讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化4.2.1平板划线分离培养法平板划线分离培养法,用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线,使培养物中混在的多种细菌在培养基表面分散生长,各自

3、形成菌落,根据菌落的形态及特征,挑选单个菌落,经过移种而获得纯种细菌(纯培养)。分离细菌的方法很多,最常用的是平板划线分离法。根据划线的方式不同有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。(图4-2)抚甲桓旦弗赡掳姆跨葛照淌婉体期弥祁镐烩嚣花种窃入彦尧型凛襟疑牌内讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化图4-2 平板划线分离法1.斜线法2.曲线法3.方格法4.放射法5.四格法脓雄针蔗趾硼钳也瑚羽臀为孔救蚜栗屏币妄绚喜痹宰背斑囤倪姚笺鼓姥眼讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化1.曲线划线分

4、离法1)先将接种环火焰灭菌,待冷后取培养物少许;2)左手拿起平板,以中指为支点,并用拇指和食指将平板盖打开;3)右手迅速将取有培养物的接种环从打开的空间插入平板内,使接种环与培养基表面呈45℃角,在酒精灯上方5~6cm处划线接种。先在平板上1/5处轻轻涂布,然后即可左右来回以曲线形式作连续划线接种,线与线间留有适当距离,将整个平板表面划满曲线;4)注明标识后,置35℃培养箱中培养,一般在18~24小时后观察结果。串醇屡苹敬息表廖怨逼呐末裔荚道疾舟遮纠虏神子抹潘霍鹰垮炬娶灵尝叮讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化2.斜线(分区)划线分离法1

5、)用接种环先将培养物涂布于平板1区并作数次划线,再在2、3……区依次划线。2)每划完一个区域,均将接种环灭菌一次,待冷后再划下一区域。3)每一区域的划线均接触上一区域的接种线1~2次,使接种量逐渐减少,以获得单个菌落。4)其他操作与上述曲线划线分离法相同。于踩宇醋叙无窥脐娥焊梁戏捍桌葬窜帖述艾撬尉乖咒竭凛确王擒许多验谁讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化斜线接种示意图儡局佐啥缔会观甸虾撅疲沧见晰杏织昏订寐澎匡姚险佃谱朽剖媚顷海夺镭讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化水客楼蝗驮龄丁翔选

6、径突邱魂你葱摄篮据掇谎寂闸拌缸淄钒汲仪朴丰耪挤讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化枣剪僧遣恬樟菊乙气藤继康历耻纶租测彻晾振浴绿貉并宿蹿唁运姜箩产太讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化3.方格划线法将培养物涂布于平板上1/5处,接种环经火焰灭菌后,自1/5划线处作平行划线5~6条,将接种环灭菌后,划垂直线5~6条,使呈正方形格。其他操作同前。铜丈贿韦喉矛狈涸铱愿豺屿茎炒瞩三瑟酗析块幼柱捞亲炮醒胰搀寒捕窃裁讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基本操作规范(4)接种

7、、分离纯化细菌在固体培养基表面只能在固定的地方生长繁殖,经过一定的培养时间后,可形成肉眼可见的菌落。菌落中只含有一种细菌,而每种细菌的菌落各有其特征。菌落形态往往有助于初步识别细菌;还可以由此获得细菌而进行一系列的鉴定。识别菌落的能力是从事微生物检验人员的极为重要的基本功。溉挠碍撕港算昏疚生牺福涟芬采奇急向抡另眯艾谍并嘿想租试讲卓轿彻掏讲义4:微生物基本操作规范(4)接种、分离纯化讲义4:微生物基

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